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嘉峪檢測(cè)網(wǎng) 2025-04-07 20:21
摘 要： 建立了超高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法同時(shí)測(cè)定干血斑中維生素A和維生素E的含量。樣品經(jīng)純化水超聲提取，甲醇沉淀蛋白，乙酸乙酯萃取，上層萃取液氮?dú)獯蹈珊髲?fù)溶。采用Accucore C18色譜柱（50 mm×2.1 mm，2.6 μm）分離，在正離子多反應(yīng)監(jiān)測(cè)模式下進(jìn)行檢測(cè)。維生素A、維生素E的質(zhì)量濃度分別在0.1～3、0.5～30 mg/L范圍內(nèi)和相應(yīng)色譜峰面積與同位素內(nèi)標(biāo)色譜峰面積之比的線性關(guān)系良好，相關(guān)系數(shù)均大于0.995。維生素A、維生素E的樣品加標(biāo)回收率分別為87.2%～92.8%、98.6%～108.5%，測(cè)定結(jié)果的相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差均小于8%（n=6）。該方法適用于干血斑中維生素A和維生素E的同時(shí)測(cè)定。
關(guān)鍵詞： 干血斑； 維生素A； 維生素E； 超高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法
維生素是人體必需的微量營(yíng)養(yǎng)素，參與調(diào)節(jié)體內(nèi)各種代謝過程和生理活動(dòng)，缺乏或過量都會(huì)引發(fā)相應(yīng)的疾病[1?3]。其中，維生素A具有維持正常視力、促進(jìn)生長(zhǎng)發(fā)育、增加機(jī)體對(duì)傳染病的抵抗力等作用，缺乏時(shí)可引起夜盲癥、角膜干燥癥、皮膚干燥脫屑等疾病[4-5]；維生素E具有抗衰老、抗氧化、抗凝血、增強(qiáng)免疫力、改善血液循環(huán)、防止動(dòng)脈硬化等作用[6]，長(zhǎng)期缺乏可引起巨細(xì)胞性溶血性貧血、生殖機(jī)能障礙等疾病[7]。流行病學(xué)研究表明，維生素A、E缺乏或不足仍是一個(gè)重要的公共健康問題，尤其在兒童、孕婦、老年等特殊人群中[8]。通過精準(zhǔn)檢測(cè)維生素濃度水平，并對(duì)危險(xiǎn)因素進(jìn)行干預(yù)，能顯著改善維生素缺乏或過量導(dǎo)致的危害，提升國(guó)民健康水平[9]。
目前維生素的檢測(cè)方法主要包括分光光度法、免疫層析法、高效液相色譜法和液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜法等[10-11]。液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法因具有靈敏度高、特異性好、多指標(biāo)同時(shí)檢測(cè)等優(yōu)勢(shì)，已成為維生素檢測(cè)的“金標(biāo)準(zhǔn)”[12-13]。干血斑采樣是利用濾紙采集血液樣本的技術(shù)[14]，相較于常規(guī)靜脈采血方法，干血斑具有采血量少、儲(chǔ)運(yùn)簡(jiǎn)便、生物安全性好等優(yōu)勢(shì)，是一種適于兒童、孕婦、老年等特殊人群的微創(chuàng)采血方法[15-16]。為了更好地滿足臨床維生素檢測(cè)需求，筆者采用超高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜技術(shù)，建立同時(shí)測(cè)定干血斑中維生素A和維生素E的方法，并進(jìn)行方法的驗(yàn)證及應(yīng)用研究。
1. 實(shí)驗(yàn)部分
1.1 主要儀器與試劑
超高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜儀：SCIEX QTRAP 5500型，美國(guó)SCIEX公司。
電子天平：ES225SM-DR型，感量為0.01 mg，上海天美天平儀器有限公司。
多管渦旋混合儀：MTV-100型，杭州奧盛儀器有限公司。
高速冷凍離心機(jī)：5427R型，艾本德（上海）國(guó)際貿(mào)易有限公司。
超聲波清洗機(jī)：SB-5200D型，寧波新芝生物科技股份有限公司。
超純水機(jī)：UPH-IV-10TNP型，四川優(yōu)普超純科技有限公司。
氮吹儀：BCN9602型，深圳逗點(diǎn)生物技術(shù)有限公司。
維生素A（視黃醇，VA）、維生素E（α-生育酚，VE）、[19,19,19,20,20,20-D6]視黃醇（視黃醇-d6）：質(zhì)量分?jǐn)?shù)分別為96.0%、98.3%、97.0%，批號(hào)分別為G0063895、G0089685、G0063135，曼哈格（上海）生物科技有限公司。
3,4-二氫-2,8-二甲基-5,7-二(三氘甲基)-2-(4,8,12-三甲基十三烷基)-6-色滿醇（α-生育酚-d6）：質(zhì)量分?jǐn)?shù)為98%，批號(hào)為MBBD0883，美國(guó)西格瑪奧德里奇公司。
人工全血基質(zhì)：批號(hào)為23I002，北京匯智和源生物技術(shù)有限公司。
甲醇：質(zhì)譜純，天津市康科德科技有限公司。
乙酸乙酯：質(zhì)譜純，上海安譜實(shí)驗(yàn)科技股份有限公司。
甲酸：色譜純，上海安譜實(shí)驗(yàn)科技股份有限公司。
1.2 儀器工作條件
1.2.1 色譜儀
色譜柱：Accucore C18柱（50 mm×2.1 mm，2.6 μm，美國(guó)賽默飛世爾科技公司）；柱溫：40 ℃；進(jìn)樣體積：10 μL；流動(dòng)相：A相為0.1%(體積分?jǐn)?shù))的甲酸-水溶液，B相為0.1%(體積分?jǐn)?shù))的甲酸-甲醇溶液，流量為0.4 mL/min；洗脫方式：線性梯度洗脫，洗脫程序見表1。
表1 梯度洗脫程序
Tab. 1 Gradient elution procedure
1.2.2 質(zhì)譜條件儀
離子源：電噴霧離子源(ESI)；掃描模式：正離子模式；數(shù)據(jù)采集模式：多反應(yīng)監(jiān)測(cè)掃描(MRM)；離子源溫度：500 ℃；離子化電壓：5 500 V；氣簾氣壓力：138 kPa；噴霧氣壓力：414 kPa；輔助加熱氣壓力：345 kPa；碰撞氣壓力：41 kPa。維生素A、維生素E及內(nèi)標(biāo)的質(zhì)譜參數(shù)見表2。
表2 維生素A、維生素E及內(nèi)標(biāo)的質(zhì)譜參數(shù)
Tab. 2 Mass spectral parameters of vitamin A, vitamin E and internal standard
1.3 實(shí)驗(yàn)步驟
1.3.1 溶液配制
標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備溶液：精密稱取維生素A、視黃醇-d6、維生素E、α-生育酚-d6適量，分別置于容量瓶中，加入甲醇溶解并定容，搖勻，得維生素A、視黃醇-d6標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備溶液的質(zhì)量濃度為1 000 mg/L，維生素E、α-生育酚-d6標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備溶液的質(zhì)量濃度為2 000 mg/L。
混合內(nèi)標(biāo)工作溶液：分別準(zhǔn)確移取視黃醇-d6、α-生育酚-d6標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備溶液適量，用甲醇稀釋后混勻，配制成混合內(nèi)標(biāo)工作溶液（視黃醇-d6、α-生育酚-d6的質(zhì)量濃度分別為10、20 mg/L）。
混合標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備溶液：分別準(zhǔn)確移取維生素A、維生素E標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備溶液適量，用甲醇稀釋后混勻，配制成高濃度混合標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備溶液（維生素A、維生素E的質(zhì)量濃度分別為60、600 mg/L）和低濃度混合標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備溶液（維生素A、維生素E的質(zhì)量濃度分別為2、10 mg/L）。
系列混合標(biāo)準(zhǔn)工作溶液：分別準(zhǔn)確移取高、低濃度混合標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備溶液適量，與人工全血基質(zhì)混勻，配制成維生素A質(zhì)量濃度分別為0.100 0、0.245 0、0.390 0、0.680 0、1.260、1.550、3.000 mg/L，維生素E質(zhì)量濃度分別為0.500 0、1.975、3.450、6.400、12.30、15.25、30.00 mg/L的標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品系列混合標(biāo)準(zhǔn)工作溶液。按相同方法，制得到維生素A質(zhì)量濃度分別為0.240 0、0.600 0、1.200 mg/L，維生素E質(zhì)量濃度分別為4.000、10.00、20.00 mg/L的質(zhì)控樣品系列工作溶液。
1.3.2 標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品、質(zhì)控樣品和空白樣品制備
準(zhǔn)確移取系列混合標(biāo)準(zhǔn)工作溶液75 μL，分別滴到濾紙片，晾干，得到干血斑標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品及質(zhì)控樣品。另取人工全血基質(zhì)，按照相同方法制成干血斑空白樣品。
1.3.3 樣品處理
使用直徑為3 mm的打孔器，在干血斑樣品上取兩個(gè)干血點(diǎn)（相當(dāng)于6 μL全血），置于2 mL離心管中，加入75 μL 純化水，超聲提取5 min，加入100 μL混合內(nèi)標(biāo)工作溶液，渦旋振蕩1 min，加入乙酸乙酯1 000 μL，渦旋振蕩10 min，以12 500 r/min的轉(zhuǎn)速離心15 min。吸取乙酸乙酯層900 μL，置于U型96孔板中，氮?dú)獯蹈?，加入體積分?jǐn)?shù)為70%的甲醇-水溶液100 μL復(fù)溶，渦旋振蕩5 min，以4 000 r/min的轉(zhuǎn)速離心5 min，取上清液測(cè)定。
1.3.4 樣品測(cè)定
取上述樣品溶液，在1.2儀器工作條件下測(cè)定，以色譜峰面積內(nèi)標(biāo)法定量。
2. 結(jié)果與討論
2.1 質(zhì)譜參數(shù)優(yōu)化
由于維生素A和維生素E結(jié)構(gòu)中均存在芳香環(huán)、脂肪鏈和羥基結(jié)構(gòu)，在正離子模式下電離較為穩(wěn)定，因此采用正離子模式下進(jìn)行檢測(cè)。從一級(jí)質(zhì)譜掃描圖和二級(jí)碎裂質(zhì)譜掃描圖可知，維生素A在ESI正離子模式下形成的[M+H]+準(zhǔn)分子離子為m/z 269.3，主要碎片離子為m/z 231.9、m/z 93.0；維生素E的[M+H]+準(zhǔn)分子離子為m/z 431.3，主要碎片離子為m/z 342.9、m/z 165.1。采用儀器優(yōu)化程序?qū)ι鲜鲭x子對(duì)的錐孔電壓和碰撞能量值進(jìn)行優(yōu)化，分別以信號(hào)更強(qiáng)的m/z 93.0和m/z 165.1作為定量離子，按相同碎裂模式選擇同位素內(nèi)標(biāo)的離子對(duì)，優(yōu)化后的參數(shù)見表2。
2.2 色譜條件優(yōu)化
基于維生素A和維生素E的疏水性，選擇C18反相色譜柱進(jìn)行色譜分離。比較了Thermo Scientific Accucore C18柱（50 mm×2.1 mm，2.6 μm）和Phenomenex Kinetex C18柱（50 mm×2.1 mm，2.6 μm）對(duì)維生素A和維生素E的分離效果，結(jié)果顯示，Kinetex C18柱分離的維生素A色譜峰出現(xiàn)裂峰，峰形較差，而Accucore C18柱可以實(shí)現(xiàn)所有組分的分離且峰形良好，保留時(shí)間穩(wěn)定，因此選擇Accucore C18柱作為色譜柱。
分別采用甲醇-水、乙腈-水作為流動(dòng)相，比較添加甲酸（體積分?jǐn)?shù)為0.1%）對(duì)目標(biāo)化合物色譜峰形及分離效果的影響，結(jié)果表明，以甲醇-水作為流動(dòng)相，并在兩相中分別添加體積分?jǐn)?shù)為0.1%的甲酸，可增加分析物的響應(yīng)強(qiáng)度，各組分分離效果良好，且峰形良好。
2.3 樣品處理?xiàng)l件優(yōu)化
2.3.1 萃取溶劑的選擇
維生素A和維生素E均為脂溶性維生素，易溶于正己烷、石油醚、乙醚、乙酸乙酯等多種有機(jī)溶劑。本實(shí)驗(yàn)分別考察了乙酸乙酯、正己烷、乙酸乙酯-正己烷（體積比為1∶1）的萃取效果見圖1。由圖1可知，當(dāng)乙酸乙酯作為萃取劑時(shí)，維生素A和維生素E的響應(yīng)更強(qiáng)，提取效率更高，且化合物峰形較好，因此，選用乙酸乙酯作為萃取溶劑。
圖1 不同提取溶劑對(duì)維生素A及維生素E提取效果的影響
Fig. 1 Influence of different solvents on the extraction of vitamin A and vitamin E.
2.3.2 復(fù)溶液的選擇
分別采用體積分?jǐn)?shù)為50%和70%的甲醇-水溶液作為復(fù)溶液，比較目標(biāo)化合物的峰面積見圖2。由圖2可知，以體積分?jǐn)?shù)為70%的甲醇-水溶液進(jìn)行復(fù)溶時(shí)，目標(biāo)化合物的響應(yīng)更強(qiáng)，且色譜峰形較好，因此選擇體積分?jǐn)?shù)為70%的甲醇-水溶液作為復(fù)溶液。
圖2 不同復(fù)溶液對(duì)維生素A及維生素E復(fù)溶效果的影響
Fig. 2 Influence of different solution on the reconstitution of vitamin A and vitamin E.
2.4 選擇性
按照1.3.3所述方法處理干血斑空白樣品、高濃度質(zhì)控樣品、臨床干血斑送檢樣品，在1.2儀器工作條件下進(jìn)行測(cè)定，在目標(biāo)成分維生素A、維生素E及內(nèi)標(biāo)的保留時(shí)間處無(wú)雜質(zhì)干擾，目標(biāo)成分及內(nèi)標(biāo)之間亦無(wú)干擾。
2.5 殘留
按照1.3.3所述方法，分別對(duì)干血斑空白樣品、標(biāo)準(zhǔn)曲線最低（定量下限）和最高濃度樣品進(jìn)行處理，在標(biāo)準(zhǔn)工作曲線最高濃度樣品之后測(cè)定空白樣品，用目標(biāo)物的峰面積來評(píng)估殘留，攜帶污染測(cè)試結(jié)果見表3。由表3可知，標(biāo)準(zhǔn)曲線最高濃度樣品之后測(cè)定的空白樣品中，目標(biāo)物的殘留量不超過定量下限的20%，且內(nèi)標(biāo)殘留量不超過5%，滿足分析方法要求[17]。
表3 攜帶污染測(cè)試結(jié)果
Tab. 3 Results of carry-over effect
2.6 線性關(guān)系與檢出限、定量限
在1.2儀器工作條件下，對(duì)標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品系列混合標(biāo)準(zhǔn)工作溶液進(jìn)行測(cè)定，以目標(biāo)物的質(zhì)量濃度為橫坐標(biāo)（x），以對(duì)應(yīng)的色譜峰面積與同位素內(nèi)標(biāo)色譜峰面積之比為縱坐標(biāo)（y），進(jìn)行線性回歸，繪制標(biāo)準(zhǔn)工作曲線。
以3倍信噪比對(duì)應(yīng)的維生素A、維生素E質(zhì)量濃度作為方法檢出限，以10倍信噪比對(duì)應(yīng)的維生素A、維生素E質(zhì)量濃度作為方法定量限。
維生素A、維生素E的線性范圍、線性方程、相關(guān)系數(shù)、檢出限和定量限見表4。
表4 維生素A、維生素E的線性范圍、線性方程、相關(guān)系數(shù)、檢出限和定量限
Tab. 4 Linear range, linear equation, correlation coefficient, detection limit, and quantification limit of vitamin A and vitamin E
由表4可知，維生素A、維生素E分別在質(zhì)量濃度分別為0.1～3、0.5～30 mg/L范圍內(nèi)與相應(yīng)色譜峰面積比線性關(guān)系良好，相關(guān)系數(shù)均大于0.995，滿足分析方法要求［17］。
2.7 精密度和準(zhǔn)確度
按照1.3.3所述方法，分別對(duì)標(biāo)準(zhǔn)曲線最低濃度樣品和低、中、高濃度質(zhì)控樣品進(jìn)行處理，每組6份，在1.2儀器工作條件下進(jìn)行測(cè)定，計(jì)算方法精密度和準(zhǔn)確度，其中精密度表示為測(cè)定值的變異系數(shù)，而準(zhǔn)確度表示為測(cè)定值與標(biāo)示值的百分比，試驗(yàn)結(jié)果見表5。由表5可知，維生素A的準(zhǔn)確度為95.0%～106.6%，維生素E的準(zhǔn)確度為97.6%～108.6%，二者的精密度均不超過7.2%，滿足分析方法要求[17]。
表5 精密度和準(zhǔn)確度試驗(yàn)結(jié)果
Tab. 5 Results of precision and accuracy assessment
2.8 樣品加標(biāo)回收試驗(yàn)
選取3組臨床全血樣品，每組6份，分別加入低、中、高濃度的混合標(biāo)準(zhǔn)工作溶液，混勻后得加標(biāo)樣品工作溶液，按1.3.2方法制備干血斑加標(biāo)樣品，按1.3.3方法進(jìn)行處理，然后在1.2儀器工作條件下測(cè)定；另取上述臨床全血樣品制成干血斑樣品，用于檢測(cè)本底值，試驗(yàn)結(jié)果見表6。由表6可知，維生素A的加標(biāo)回收率為87.2%～92.8%，維生素E的加標(biāo)回收率為98.6%～108.5%，測(cè)定結(jié)果的相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差均不超過5.2%（n=6），滿足分析方法要求[17]。
表6 樣品加標(biāo)回收試驗(yàn)結(jié)果
Tab. 6 Recovery results of spiked samples
3. 結(jié)語(yǔ)
建立了液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法同時(shí)測(cè)定干血斑樣本中維生素A和維生素E含量，分別對(duì)質(zhì)譜、色譜檢測(cè)條件以及前處理過程中的萃取液、復(fù)溶液等進(jìn)行了優(yōu)化，從而提高了檢測(cè)靈敏度。該方法能夠在5 min內(nèi)完成維生素A、維生素E的定性、定量分析，測(cè)定樣本需求量少、操作簡(jiǎn)單、檢測(cè)結(jié)果準(zhǔn)確、快速，可實(shí)現(xiàn)大量臨床樣本的同時(shí)檢測(cè)，尤其對(duì)采血較為困難的嬰幼兒，可以實(shí)現(xiàn)少量血液樣本檢測(cè)多個(gè)項(xiàng)目，為臨床維生素的精準(zhǔn)檢測(cè)提供了技術(shù)支持。
參考文獻(xiàn)：
1 李雪梅， 吳慧慧， 陳競(jìng)， 等. 超高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法同時(shí)快速檢測(cè)微量血清中6種脂溶性維生素 ［J］. 現(xiàn)代預(yù)防醫(yī)學(xué)， 2022， 49（7）：1 297.
LI Xuemei， WU Huihui， CHEN Jing， et al. An ultra-performance liquid chromatography-tandem mass spectrometry for simultaneous and rapid detection of six fat-soluble vitamins in small volumes of serum ［J］. Modern Preventive Medicine， 2022， 49（7）：1 297.
2 劉海培， 姜小梅， 韓文念， 等. 人體血清中3種脂溶性維生素的液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜分析方法研究 ［J］. 分析測(cè)試學(xué)報(bào)， 2019， 38（6）：728.
LIU Haipei， JIANG Xiaomei， HAN Wennian， et al. Study on analysis methods of three fat-soluble vitamins in human serum liquid chromatography-tandem mass spectrometry ［J］. Journal of Instrumental Analysis， 2019， 38（6）：728.
3 李強(qiáng)， 金玉娥， 汪國(guó)權(quán). 超高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法測(cè)定干血點(diǎn)中25-羥基維生素D ［J］.現(xiàn)代預(yù)防醫(yī)學(xué)， 2017， 44（11）：2 050.
LI Qiang， JIN Yue， WANG Guoquan， et al. Detection of 25-hydroxyvitamin D in dried blood spot by ultra-performance liquid chromatography-tandem mass spectrometry［J］. Modern Preventive Medicine， 2017， 44（11）：2 050.
4 孟小征， 李幽然， 翟燕紅， 等. 人血清中維生素A/E高效液相色譜法與液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法的比對(duì) ［J］. 標(biāo)記免疫分析與臨床， 2022， 29（9）：1 579.
MENG Xiaozheng， LI Youran， ZHAI Yanhong， et al. A comparison between high performance liquid chromatography and liquid chromatography-tandem mass spectrometry for vitamin A/E in human serum ［J］. Labeled Immunoassays and Clinical Medicine， 2022， 29（9）：1 579.
5 莫日根， 辛慧， 張曉東， 等. 超高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法測(cè)定蛋白胨中6種脂溶性維生素 ［J］. 食品安全質(zhì)量檢測(cè)學(xué)報(bào)， 2020， 11（20）：7 436.
MO Rigen， XIN Hui， ZHANG Xiaodong， et al. Determine of 6 kinds of fat-soluble vitamins in peptone using ultra-performance liquid chromatography-tandem mass spectrometry ［J］. Journal of Food Safety & Quality， 2020， 11（20）：7 436.
6 ZHA L， LAW T， MACDONALD C， et al. Consolidation of vitamin A and E methods onto a multiplexing liquid chromato-graphy tandem mass spectrometry platform simplifies laboratory workflow ［J］. Clinica Chimica Acta， 2020， 505（3）：31.
7 陳曦， 宮照龍， 沈葹. 超高效液相色譜-三重四級(jí)桿串聯(lián)質(zhì)譜法測(cè)定血清中維生素A和維生素E［J］.衛(wèi)生研究，2021，50（2）：301.
CHEN Xi， GONG Xiaolong， SHEN Shi， et al. Determine vitamin A and vitamin E in human serum by ultra-performance liquid chromatography-triple quadrupole tandem mass spectro-metry［J］. Journal of Hygiene Research， 2021， 50（2）：301.
8 趙麗云，丁鋼強(qiáng)，趙文華，等. 2015—2017年中國(guó)居民營(yíng)養(yǎng)與健康狀況監(jiān)測(cè)報(bào)告 ［M］. 北京： 人民衛(wèi)生出版社， 2022， 317.
ZHAO Liyun， DING Gangqiang， ZHAO Wenhua， et al. 2015—2017 nutrition and health monitoring report of chinese residents ［M］. Beijing：People's Medical Publishing House， 2022， 317.
9 中國(guó)營(yíng)養(yǎng)學(xué)會(huì)健康管理分會(huì). 維生素A營(yíng)養(yǎng)狀況評(píng)價(jià)及改善專家共識(shí) ［J］. 中華健康管理學(xué)雜志. 2023， 17（3）：180.
Health Management Branch of Chinese Nutrition Society. Expert consensus on the evaluation and improvement of vitamin A nutritional status ［J］. Chinese Journal of Health Management. 2023， 17（3）：180.
10 ALBAHRANI A A， ROTAROU V， ROCHE J P， et al. A simultaneous quantitative method for vitamins A， D and E in human serum using liquid chromatography-tandem mass spectrometry ［J］. Journal of Steroid Biochemistry and Molecular Biology， 2016， 159：41.
11 王睿， 付志成， 胡貽椿， 等. 超高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法同時(shí)測(cè)定血清中維生素A、維生素E ［J］. 中國(guó)食物與營(yíng)養(yǎng)， 2020， 26（9）：40.
WANG Rui， FU Zhicheng， HU Yichun， et al. Simultaneous determination on vitamin A and vitamin E in serum by ultra-performance liquid chromatography-tandem mass spectrometry method ［J］. Food and Nutrition in China， 2020， 26（9）：40.
12 HUO Yumei， ZHANG Shangqing， WU Gaoping， et al. Rapid simultaneous determination of 7 fat-soluble vitamins in human serum by ultra high performance liquid chromatography tandem mass spectrometry ［J］. Analytical methods：advancing methods and applications， 2023，15（41）：5 535.
13 MA Yichen， YU Songlin， MU Danni， et al. Liquid chromato-graphy-tandem mass spectrometry in fat-soluble vitamin deficiency［J］. Clinica Chimica Acta， 2023， 548（1）：117 469.
14 宮竹君， 陳荷芬， 袁擁華， 等.干血斑法概述及其在器官移植免疫抑制藥治療藥物監(jiān)測(cè)中的研究進(jìn)展 ［J］.藥物分析雜志， 2023， 43（8）：1 277.
GONG Zhujun， CHEN Hefen， YUAN Yonghua， et al. Overview of the dried blood spot method and its application in therapeutic drug monitoring of immunosuppressants in organ transplantation ［J］. Chinese Journal of Pharmaceutical Analysis， 2023， 43（8）：1 277.
15 CHHONKER Y S， AHMED N， JOHNSTON CHRISTINE M， et al. A Simultaneous extraction/derivatization strategy for quantitation of vitamin D in dried blood spots using LC-MS/MS：application to biomarker study in subjects tested for SARS-CoV-2［J］. International Journal of Molecular Sciences， 2023， 24 （6）：5 489.
16 WANG Haibo， XIAO Xuan， DAI Wen， et al. Rapid LC-MS/MS detection of 25-hydroxyvitamin D in dried blood spots ［J］. Analytica Chimica Acta， 2023， 1283（1）：341 964.
17 國(guó)家藥典委員會(huì). 中華人民共和國(guó)藥典（2020年版）四部［M］. 北京： 中國(guó)醫(yī)藥科技出版社， 2020：466.
NATIONAL PHARMACOPOEIA COMMISSION. Pharmaco-poeia of the people's republic of China （2020 edition， part four） ［M］. Beijing：China Medical Technology Press， 2020：466.
引用本文： 權(quán)帆，詹珍旋，趙寧，等 . 超高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法同時(shí)測(cè)定干血斑中維生素A和維生素E［J］. 化學(xué)分析計(jì)量，2024，33（12）：17. (QUAN Fan, ZHAN Zhenxuan, ZHAO Ning, et al. Simultaneous determination of vitamin A and vitamin E in dried blood spots by ultra-high performance liquid chromatography tandem mass spectrometry[J]. Chemical Analysis and Meterage, 2024, 33(12): 17.)
來源：化學(xué)分析計(jì)量
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