中文字幕一级黄色A级片|免费特级毛片。性欧美日本|偷拍亚洲欧美1级片|成人黄色中文小说网|A级片视频在线观看|老司机网址在线观看|免费一级无码激情黄所|欧美三级片区精品网站999|日韩av超碰日本青青草成人|一区二区亚洲AV婷婷

醫(yī)美填充產(chǎn)品主流材料功效的細(xì)胞模型驗(yàn)證概述

1、細(xì)胞毒性驗(yàn)證

以HaCaT(人永生化角質(zhì)形成細(xì)胞)為受試細(xì)胞，采用ISO 10993-GB/T 16886標(biāo)準(zhǔn)制備材料浸提液，加入材料浸提液培養(yǎng)，采用CCK-8法檢測(cè)細(xì)胞存活率。

2、保濕性能驗(yàn)證

以HaCaT(人永生化角質(zhì)形成細(xì)胞)是一種人皮膚表皮角質(zhì)形成細(xì)胞，有一定分化能力，在體外培養(yǎng)條件下能夠模擬皮膚表皮的組織結(jié)構(gòu)，其主要功能是參與皮膚屏障的構(gòu)建和修復(fù)。以HaCaT細(xì)胞為受試細(xì)胞，采用安全濃度下材料浸提液（或材料本身）進(jìn)行干預(yù)處理，設(shè)置空白對(duì)照組。采用WB及PCR技術(shù)檢測(cè)水通道蛋白AQP3表達(dá)水平變化。

3、抗炎活性驗(yàn)證

RAW264.7（小鼠單核巨噬細(xì)胞細(xì)胞）細(xì)胞是炎癥研究最常用的，以RAW264.7細(xì)胞為受試細(xì)胞，加入LPS誘導(dǎo)驗(yàn)證模型，采用安全濃度下材料浸提液（或材料本身）進(jìn)行干預(yù)處理，設(shè)置空白對(duì)照組、模型對(duì)照組。通過(guò)ELISA法檢測(cè)細(xì)胞上清IL-6、TNF-α等炎癥因子的表達(dá)水平，采用流式細(xì)胞術(shù)或免疫熒光檢測(cè)M1/M2巨噬細(xì)胞極化比例。

4、美白功效驗(yàn)證

以小鼠黑色素瘤B16細(xì)胞或人表皮黑色素瘤A375細(xì)胞為受試細(xì)胞，該類(lèi)細(xì)胞培養(yǎng)要求低，生長(zhǎng)快，且具有黑色素形成能力，成為美白功效驗(yàn)證的首選細(xì)胞。黑色素誘導(dǎo)生成的方式包括物理刺激法和化學(xué)誘導(dǎo)法，其中物理刺激法采用UVB輻照（實(shí)驗(yàn)室證明100mJ/cm2以下劑量對(duì)細(xì)胞活性無(wú)明顯影響，常選擇50mJ/cm2）3d誘導(dǎo)黑色素生成；化學(xué)誘導(dǎo)法采用α-黑色素細(xì)胞刺激激素（α-MSH）培養(yǎng)48-72h誘導(dǎo)黑色素生成。采用安全濃度下材料浸提液（或材料本身）進(jìn)行干預(yù)處理，設(shè)置空白對(duì)照組、模型對(duì)照組。通過(guò)L-DOPA法檢測(cè)酪氨酸酶活性、NaOH溶解法檢測(cè)細(xì)胞黑素含量、WB及PCR檢測(cè)黑色素形成相關(guān)蛋白表達(dá)水平。

5、膠原再生驗(yàn)證

人真皮成纖維細(xì)胞（hDFs）是結(jié)締組織的主要細(xì)胞成分，能合成和分泌大量的型膠原和基質(zhì)成分，符合膠原再生能力驗(yàn)證的實(shí)驗(yàn)需求。將受試刺激性材料與人真皮成纖維細(xì)胞共培養(yǎng)，設(shè)置空白對(duì)照組。采用免疫熒光或WB檢測(cè)羥脯氨酸含量、Col1A1、Col3A1表達(dá)。

6、抗衰效果驗(yàn)證

采用人真皮成纖維細(xì)胞（hDFs）為受試細(xì)胞，采用光刺激或H2O2誘導(dǎo)光老化或氧化衰老細(xì)胞模型。采用安全濃度下材料浸提液（或材料本身）進(jìn)行干預(yù)處理，設(shè)置空白對(duì)照組、模型對(duì)照組。采用CCK-8法檢測(cè)細(xì)胞活力變化，采用生化試劑盒或流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)ROS等氧化應(yīng)激指標(biāo)表達(dá)水平，采用SA-β-gal染色檢測(cè)衰老表型變化，采用WB檢測(cè)自噬蛋白活性。