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嘉峪檢測(cè)網(wǎng) 2025-06-16 10:45
在液相色譜中,色譜峰峰型對(duì)峰面積、色譜峰分離度有重要的影響,實(shí)際工作中常發(fā)現(xiàn)色譜峰有各種不同的異?,F(xiàn)象,如前延峰、拖尾峰、分叉峰、峰展寬等。

圖1 色譜峰異常的類型
本文對(duì)色譜異常峰出現(xiàn)原因進(jìn)行簡單圖解,并詳細(xì)闡述前延峰的產(chǎn)生與解決方法。
一、異常色譜峰出現(xiàn)原因圖解
下圖中紅色部分表示樣品在色譜柱中分布的情形。

圖2 色譜峰產(chǎn)生原因圖解(紅色部分表示樣品在色譜柱中分布的情形)
圖示異常峰原因分析可以看出,色譜柱中樣品的濃度分布、譜帶的擴(kuò)散,直觀表現(xiàn)為色譜峰峰型。色譜譜帶的過度擴(kuò)散,可導(dǎo)致色譜峰展寬;樣品濃度非正態(tài)分布,分別導(dǎo)致前延峰、拖尾峰或分叉峰等異常峰。
二、前延峰的產(chǎn)生與解決方式
下面著重闡述前延峰的產(chǎn)生與避免的方法。
2.1. 色譜柱過載
色譜柱過載有2種類型:質(zhì)量過載、體積過載

圖3不同類型過載色譜圖對(duì)比(1→4代表樣品量增加對(duì)應(yīng)色譜峰情況)
判斷方法:減小樣品體積或濃度,峰型改善,說明是由過載引起的。
解決方式:根據(jù)色譜柱規(guī)格選擇合適的進(jìn)樣量;
色譜柱體積越小,進(jìn)樣體積越小。
不同規(guī)格色譜柱方法轉(zhuǎn)換時(shí),注意調(diào)整進(jìn)樣體積。
2.2 色譜柱溝流
產(chǎn)生原因:
凝聚的氣泡通過柱床,破壞了路徑中的硅膠顆粒,形成縱向通道。

圖4色譜柱溝流示意圖
避免方式:流動(dòng)相正確脫氣;
存放色譜柱時(shí)應(yīng)擰緊2端堵頭;
使用時(shí),連接色譜柱后緩慢增加色譜柱流量。
2.3 溶劑效應(yīng)
產(chǎn)生原因:溶劑洗脫能力比流動(dòng)相強(qiáng),導(dǎo)致部分組分先流出。
解決方式:
使用初始比例流動(dòng)相作為溶劑;
減少進(jìn)樣體積;
增加柱前體積;(關(guān)注色譜峰展寬的影響)……
三、前延峰解決方式小結(jié)


來源:藥知曉