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色譜異常峰出現(xiàn)原因圖解、前延峰的產(chǎn)生與解決方法

嘉峪檢測(cè)網(wǎng)        2025-06-16 10:45

在液相色譜中,色譜峰峰型對(duì)峰面積、色譜峰分離度有重要的影響,實(shí)際工作中常發(fā)現(xiàn)色譜峰有各種不同的異?,F(xiàn)象,如前延峰、拖尾峰、分叉峰、峰展寬等。

圖1 色譜峰異常的類型

本文對(duì)色譜異常峰出現(xiàn)原因進(jìn)行簡單圖解,并詳細(xì)闡述前延峰的產(chǎn)生與解決方法。

 

一、異常色譜峰出現(xiàn)原因圖解

 

下圖中紅色部分表示樣品在色譜柱中分布的情形。

圖2 色譜峰產(chǎn)生原因圖解(紅色部分表示樣品在色譜柱中分布的情形)

圖示異常峰原因分析可以看出,色譜柱中樣品的濃度分布、譜帶的擴(kuò)散,直觀表現(xiàn)為色譜峰峰型。色譜譜帶的過度擴(kuò)散,可導(dǎo)致色譜峰展寬;樣品濃度非正態(tài)分布,分別導(dǎo)致前延峰、拖尾峰或分叉峰等異常峰。

 

二、前延峰的產(chǎn)生與解決方式

 

下面著重闡述前延峰的產(chǎn)生與避免的方法。

2.1. 色譜柱過載

色譜柱過載有2種類型:質(zhì)量過載、體積過載

圖3不同類型過載色譜圖對(duì)比(1→4代表樣品量增加對(duì)應(yīng)色譜峰情況)

判斷方法:減小樣品體積或濃度,峰型改善,說明是由過載引起的。

解決方式:根據(jù)色譜柱規(guī)格選擇合適的進(jìn)樣量;

色譜柱體積越小,進(jìn)樣體積越小。

不同規(guī)格色譜柱方法轉(zhuǎn)換時(shí),注意調(diào)整進(jìn)樣體積。

2.2 色譜柱溝流

產(chǎn)生原因:

凝聚的氣泡通過柱床,破壞了路徑中的硅膠顆粒,形成縱向通道。

圖片

圖4色譜柱溝流示意圖

避免方式:流動(dòng)相正確脫氣;

存放色譜柱時(shí)應(yīng)擰緊2端堵頭;

使用時(shí),連接色譜柱后緩慢增加色譜柱流量。

2.3 溶劑效應(yīng)

產(chǎn)生原因:溶劑洗脫能力比流動(dòng)相強(qiáng),導(dǎo)致部分組分先流出。

解決方式:

使用初始比例流動(dòng)相作為溶劑;

減少進(jìn)樣體積;

增加柱前體積;(關(guān)注色譜峰展寬的影響)……

 

三、前延峰解決方式小結(jié)

 

圖片

 

 

 

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來源:藥知曉

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