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嘉峪檢測網(wǎng) 2025-08-01 08:51
一、無菌操作要求
1.接種細菌時必須穿工作服、戴工作帽。
2.進行接種食品樣品時,必須穿專用的工作服、帽及拖鞋,應(yīng)放在無菌室緩沖間,工作前經(jīng)紫外線消毒后使用。
3.接種食品樣品時,應(yīng)在進無菌室前用肥皂洗手,然后用75%酒精棉球?qū)⑹植粮蓛簟?/span>
4.進行接種所用的吸管,平皿及培養(yǎng)基等必須經(jīng)消毒滅菌,打開包裝未使用完的器皿,不能放置后再使用,金屬用具應(yīng)高壓滅菌或用95%酒精點燃燒灼三次后使用。
5.從包裝中取出吸管時,吸管尖部不能觸及外露部位,使用吸管接種于試管或平皿時,吸管尖不得觸及試管或平皿邊。
6.接種樣品、轉(zhuǎn)種細菌必須在酒精燈前操作,接種細菌或樣品時,吸管從包裝中取出后及打開試管塞都要通過火焰消毒。
7.接種環(huán)和針在接種細菌前應(yīng)經(jīng)火焰燒灼全部金屬絲,必要時還要燒到環(huán)和針與桿的連接處,接種結(jié)核菌和烈性菌的接種環(huán)應(yīng)在沸水中煮沸5min,再經(jīng)火焰燒灼。
8.吸管吸取菌液或樣品時,應(yīng)用相應(yīng)的橡皮頭吸取,不得直接用口吸。
二、無菌間使用要求
1、無菌間通向外面的窗戶應(yīng)為雙層玻璃,并要密封,不得隨意打開,并設(shè)有與無菌間大小相應(yīng)的緩沖間及推拉門,另設(shè)有0.5-0.7平方米的小窗,以備進入無菌間后傳遞物品。
2、無菌間內(nèi)應(yīng)保持清潔,工作后用2%-3%煤酚皂溶液消毒,擦拭工作臺面,不得存放與實驗無關(guān)的物品。
3、無菌間使用前后應(yīng)將門關(guān)緊,打開紫外燈,如采用室內(nèi)懸吊紫外燈消毒時,需30W紫外燈,距離在1.0m處,照射時間不少于30min,使用紫外燈,應(yīng)注意不得直接在紫外線下操作,以免引起損傷,燈管每隔兩周需用酒精棉球輕輕擦拭,除去上面灰塵和油垢,以減少紫外線穿透的影響。
4、處理和接種食品標本時,進入無菌間操作,不得隨意出入,如需要傳遞物品,可通過小窗傳遞。
5、在無菌間內(nèi)如需要安裝空調(diào)時,則應(yīng)有過濾裝置。
三、消毒滅菌要求
微生物檢測用的玻璃器皿、金屬用具及培養(yǎng)基、被污染和接種的培養(yǎng)物等,必須經(jīng)滅菌后方能使用。
(一)干熱和濕熱高壓蒸氣鍋滅菌方法
1、滅菌前準備
(1)所有需要滅菌的物品首先應(yīng)清洗晾干,玻璃器皿如吸管、平皿用紙包裝嚴密,如用金屬筒應(yīng)將上面通氣孔打開。
(2)裝培養(yǎng)基的三角瓶塞,用紙包好,試管蓋好蓋,注射器須將管芯抽出,用紗布包好。
2、裝放
(1)干熱滅菌器:裝放物品不可過擠,且不能接觸箱的四壁。
(2)大型高壓蒸氣鍋::放置滅菌物品分別包扎好,直接放入消毒筒內(nèi),物品之間不能過擠。
3、設(shè)備檢查
(1)檢查門的開關(guān)是否靈活,橡皮圈有無損壞,是否平整。
(2)檢查壓力表蒸氣排盡時是否停留在零位,關(guān)好門和蓋,通蒸氣或加熱后,觀察是式高壓鍋或立式壓力蒸氣滅菌器的使用應(yīng)按下列步驟進行:
①手提式高壓鍋在主體內(nèi)加入3L清水,立式高壓鍋加水16L(重復(fù)使用時應(yīng)將水量補足,水變混濁需更換).
②手提式壓力鍋將頂蓋上的排氣管插入消毒桶內(nèi)壁的方管中(無軟管或軟管銹蝕破裂的滅菌器不得使用)。
③蓋好頂蓋擰緊,勿使漏氣;置滅菌器于火源上加熱,立式壓力鍋通上電源,并打開頂蓋上的排氣閥放了冷氣(水沸騰后排氣10-15min)。
④關(guān)閉排氣閥,使蒸氣壓上升到規(guī)定要求,并維持規(guī)定時間(按滅菌物品性質(zhì)與有關(guān)情況而定)。
⑤達到規(guī)定時間后,對需干燥的物品,立即打開排氣閥排出蒸氣,待壓力恢復(fù)到零時,自然冷卻至60℃后開蓋取物,如為液體物品,不要打開排氣閥,而應(yīng)立即將鍋去除熱源,待自然冷卻,壓力恢復(fù)至零,溫度降到60℃以下再開蓋取物,以防突然減壓液體劇烈沸騰或容器爆破。
(3)臥式壓力鍋蒸氣滅菌器的使用按下列步驟進行:
①關(guān)緊鍋門,打開進氣閥,將蒸氣引入夾層進行預(yù)熱,夾層內(nèi)冷空氣經(jīng)阻氣器自動排出。
②夾層達到預(yù)定溫度后,打開鍋室進氣閥,將蒸氣引入鍋室,鍋室內(nèi)冷空氣經(jīng)鍋室阻氣器自動排出。

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