中文字幕一级黄色A级片|免费特级毛片。性欧美日本|偷拍亚洲欧美1级片|成人黄色中文小说网|A级片视频在线观看|老司机网址在线观看|免费一级无码激情黄所|欧美三级片区精品网站999|日韩av超碰日本青青草成人|一区二区亚洲AV婷婷

背景

隨著市場(chǎng)需求多樣化，用于中胚層美塑療法的透明質(zhì)酸鈉溶液產(chǎn)品開(kāi)始添加多種功效成分，其中氨基酸和維生素可提升注射效果。根據(jù)國(guó)家藥品監(jiān)督管理局醫(yī)療器械審評(píng)中心要求，生產(chǎn)企業(yè)和監(jiān)察機(jī)構(gòu)要對(duì)產(chǎn)品添加成分進(jìn)行質(zhì)量控制，確保醫(yī)美注射用透明質(zhì)酸鈉溶液的安全性、有效性。本文主要針對(duì)氨基酸成分展開(kāi)系統(tǒng)測(cè)定。

目前用于氨基酸含量分析的方法多種多樣，其中氨基酸分析儀和色譜儀可同時(shí)測(cè)定多種氨基酸且準(zhǔn)確度和靈敏度較高。氨基酸分析儀價(jià)格較高，專用性較強(qiáng)；高效液相色譜儀普適性較高，可被用于同時(shí)分析食品、藥品等樣品中的多種氨基酸，實(shí)驗(yàn)室常規(guī)高效液相色譜儀會(huì)配置紫外或熒光檢測(cè)器，多數(shù)氨基酸需衍生化處理后才能在紫外或熒光檢測(cè)器上獲得檢測(cè)信號(hào)。因此，開(kāi)發(fā)一種低成本、高靈敏度、強(qiáng)專屬性且操作簡(jiǎn)單的方法至關(guān)重要。

基于此，愛(ài)美客技術(shù)發(fā)展股份有限公司的王素慧、何雙江、徐青斌、王顏、陳雄偉等學(xué)者發(fā)表了一篇題為《醫(yī)美注射用透明質(zhì)酸鈉溶液中氨基酸含量測(cè)定》的研究論文，本文通過(guò)優(yōu)化前處理和儀器檢測(cè)條件，建立了一種用柱前衍生—高效液相色譜—紫外法測(cè)定醫(yī)美注射用透明質(zhì)酸鈉溶液中氨基酸含量的方法。該方法的專屬性、回收率、精密度和靈敏度均符合《中華人民共和國(guó)藥典》（2020 年版）第四部通則9101分析方法驗(yàn)證指導(dǎo)原則的相關(guān)檢測(cè)要求。

1、方法

1.1 檢測(cè)方法

1.1.1 色譜條件

    色譜柱為Eclipse Plus C18色譜柱（4.6mm×250mm，5μm），流動(dòng)相為0.1moL/L 醋酸鈉溶液（用稀醋酸將pH調(diào)至6.5，A液）—乙腈（B液），梯度洗脫，流速1.0mL/min，柱溫40℃，檢測(cè)波長(zhǎng)360nm。具體如表1所示。

1.1.2 溶液的制備

供試品溶液：取2mL供試品置于試管中。

對(duì)照品貯備液：分別精密稱取甘氨酸對(duì)照品10.97mg、丙氨酸對(duì)照品10.07mg、脯氨酸對(duì)照品20.84 mg、谷氨酸對(duì)照品10.45mg、羥脯氨酸對(duì)照品11.57mg、天冬酰胺對(duì)照品11.04 mg，置于10mL容量瓶，以純化水稀釋，定容搖勻。

對(duì)照品溶液：精密量取1mL對(duì)照品貯備液，置于10mL量瓶，用水稀釋定容搖勻后取2mL置于試管。

陰性對(duì)照溶液：依注射用透明質(zhì)酸鈉復(fù)合溶液處方及工藝制備不含氨基酸的樣品，取2mL置于試管。

空白溶液：取2mL純化水置于試管。

0.5mol/L NaHCO?溶液：稱8.40g NaHCO?，加純化水定容至200mL搖勻備用。

1%的2，4-二硝基氟苯乙腈溶液：量取1mL 2,4-二硝基氟苯，加99mL乙腈搖勻待用。

1.1.3 衍生方法

    向空白溶液、陰性對(duì)照溶液、對(duì)照品溶液、供試品溶液中，各加入2mL 0.5mol/L NaHCO?溶液與2mL 1%的2,4-二硝基氟苯乙腈溶液，混勻后于60℃水浴反應(yīng)50min，冷卻，轉(zhuǎn)移至25mL容量瓶，用磷酸鹽緩沖液（pH7.0）稀釋定容并搖勻。

1.2 方法學(xué)考察

1.2.1 系統(tǒng)適用性

取“1.1.2”對(duì)照品溶液，精密量取20μL，依“1.1.1”色譜條件，參照《中華人民共和國(guó)藥典》（2020版）四部通則0512高效液相色譜法試驗(yàn)，連續(xù)進(jìn)樣6次并記錄色譜圖，分別計(jì)算谷氨酸、羥脯氨酸、天冬酰胺、甘氨酸、脯氨酸、丙氨酸峰面積的SRSD（%）。

1.2.2 專屬性

取“1.1.2”制備的空白溶液、陰性對(duì)照溶液、對(duì)照品溶液、供試品溶液，其中，供試品1由注射用透明質(zhì)酸鈉復(fù)合溶液制得，供試品2由含6種氨基酸自配溶液制得，按“1.1.1”色譜條件進(jìn)樣測(cè)定。

1.2.3 線性與范圍

精密量取“1.1.2”對(duì)照品貯備液0.5、0.75、1、1.25、1.5mL，置于10ml量瓶中，用水稀釋至刻度搖勻；各取2mL置于試管中，按“1.1.3”衍生方法制備溶液，取上述對(duì)照組溶液各20μL按“1.1.1”色譜條件進(jìn)樣測(cè)定并繪制線性關(guān)系圖。

1.2.4 重復(fù)性

取含6種氨基酸自配溶液作供試品，按“1.1.2”方法平行制備6份，各取20μL按“1.1.1”色譜條件進(jìn)樣測(cè)定，并計(jì)算SRSD。

1.2.5 準(zhǔn)確度

按注射用透明質(zhì)酸鈉復(fù)合溶液處方及工藝制備不含氨基酸的樣品作為陰性對(duì)照溶液，取1.8mL分別加入“1.1.2”對(duì)照品貯備液0.2mL，充分混勻。平行制備6份，各取20μL按“1.1.1”色譜條件分別進(jìn)行進(jìn)樣測(cè)定，并計(jì)算SRSD。

1.3 氨基酸含量測(cè)定

精密量取1.8mL陰性透明質(zhì)酸鈉溶液，加入0.2mL 6種氨基酸混合溶液（甘氨酸1mg/mL、丙氨酸1mg/mL、脯氨酸2mg/mL、谷氨酸1mg/mL、羥脯氨酸1mg/mL、天冬酰胺1mg/mL），平行制備3份，得三批自配溶液（PG20230301、PG20230302、PG20230303）。取此3批次自配溶液與5批次注射用透明質(zhì)酸鈉復(fù)合溶液（PG20240109、PG20220101、PG20210301、PG20201209、PG20201002），依“1.1.2”供試品溶液的方法制備樣品溶液，按“1.1.1”色譜條件測(cè)定并計(jì)算氨基酸含量。

2、結(jié)果

2.1 系統(tǒng)適用性

谷氨酸、羥脯氨酸、天冬酰胺、甘氨酸、脯氨酸、丙氨酸的SRSD分別為0.85%、0.13%、0.12%、0.15%、0.42%、1.68%?？梢?jiàn)，各氨基酸的SRSD均小于2%，表明儀器進(jìn)樣重復(fù)性好。

2.2 專屬性

醫(yī)美注射用透明質(zhì)酸鈉溶液中，其他成分不干擾6種氨基酸的檢測(cè)，且各氨基酸與相鄰峰的分離度均大于1.5，分離度好，表明該方法專屬性良好。具體結(jié)果如圖1和表2所示。

2.3 線性與范圍

研究發(fā)現(xiàn)，谷氨酸、羥脯氨酸、天冬酰胺、甘氨酸、丙氨酸酸的質(zhì)量濃度為0.05～0.15mg/mL時(shí)，質(zhì)量濃度與峰面積線性關(guān)系良好；脯氨酸的質(zhì)量濃度為0.10～0.30mg/mL時(shí)，質(zhì)量濃度與峰面積線性關(guān)系良好。具體結(jié)果如圖2和表2所示。

2.4 重復(fù)性

所有氨基酸檢測(cè)結(jié)果SRSD均小于2%，表明該方法重復(fù)性良好。具體結(jié)果如表2所示。

2.5 準(zhǔn)確度

所有氨基酸檢測(cè)回收率在90%～110%范圍內(nèi)，結(jié)果表明方法準(zhǔn)確度良好。具體如表2所示。

2.6 氨基酸含量測(cè)定

醫(yī)美注射用透明質(zhì)酸鈉溶液的各氨基酸含量均在98%～108%范圍內(nèi)，如表3所示。

3、總結(jié)

實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，用本文的方法測(cè)定醫(yī)美注射用透明質(zhì)酸鈉溶液中谷氨酸、羥脯氨酸、天冬酰胺、甘氨酸、脯氨酸、丙氨酸這6種氨基酸的含量，具有操作簡(jiǎn)便、準(zhǔn)確度高、精密度佳的特點(diǎn)。在考察的氨基酸色譜峰與試樣中，其他組分的色譜峰峰可實(shí)現(xiàn)基線分離，且分離度與峰型良好，此方法可用于醫(yī)美注射用透明質(zhì)酸鈉溶液的氨基酸含量測(cè)定方法。