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雜質(zhì)是藥品的關(guān)鍵質(zhì)量屬性，是藥品的安全性、有效性、質(zhì)量可控性的重要保障。因此，雜質(zhì)研究是藥品研發(fā)的重點內(nèi)容，絕大部分發(fā)補意見中都包括雜質(zhì)研究問題。雜質(zhì)限度制定不合理、方法驗證不全面、分析方法的科學(xué)性等均是發(fā)補常見內(nèi)容，本文將重點闡述分析方法制定方面的常見發(fā)補意見及研究思路，供同行參考。

01 對照溶液濃度與雜質(zhì)限度不匹配 

發(fā)補意見：檢查方法的自身對照溶液濃度過高，與其他單個雜質(zhì)的限度不匹配，建議降低對照溶液濃度，或者增加靈敏度試驗。

解讀：

根據(jù)《中國藥典》2020年版9102《藥品雜質(zhì)分析指導(dǎo)原則》，對于化學(xué)藥品，制劑中未知雜質(zhì)的控制限度通常為0.2%或更低。藥典多數(shù)品種采用自身對照法計算雜質(zhì)含量，為保證檢測結(jié)果的準(zhǔn)確性，通常待測物濃度應(yīng)與對照濃度接近，當(dāng)對照溶液濃度與雜質(zhì)限度或檢出值差異過大時，易造成結(jié)果失準(zhǔn)?！秶宜幤窐?biāo)準(zhǔn)工作手冊》指出：對照溶液濃度應(yīng)當(dāng)使對照溶液主峰的峰面積與所關(guān)注主要雜質(zhì)的量正好為雜質(zhì)限度時的峰面積相當(dāng)。

然而，藥典中多數(shù)品種的對照溶液濃度為1%，即供試品溶液稀釋100倍，與其他單個雜質(zhì)限度相差較大，此時建議降低對照溶液濃度。當(dāng)特定雜質(zhì)限度與其他單個雜質(zhì)限度差異較大時，亦可設(shè)計多個不同濃度的對照溶液。例如，EP11頭孢西丁鈉質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)，分別配制對照溶液（a）（濃度為1%）和對照溶液（b）（濃度為0.05%，忽略限），其中對照溶液（a）用于計算特定雜質(zhì)的含量，對照溶液（b）則用于計算其他單個雜質(zhì)含量，同時可作為靈敏度溶液。

02 未對自擬方法與藥典方法進(jìn)行對比 

發(fā)補意見：請采用雜質(zhì)對照品或適度降解樣品，比較自擬方法與《中國藥典》2020年版方法對雜質(zhì)的檢出和分離能力，選擇更佳的有關(guān)物質(zhì)檢測方法。

解讀：

《化學(xué)藥品3類注冊申請藥學(xué)自評估報告（制劑）（征求意見稿）》指出：對于已有藥典標(biāo)準(zhǔn)收載的，應(yīng)分析藥典標(biāo)準(zhǔn)分析方法的適用性；如適用，列表對比自擬方法與藥典方法檢出能力（建議采用影響因素試驗樣品或加速、合理設(shè)計降解等），自擬方法的分離檢出能力應(yīng)不低于藥典標(biāo)準(zhǔn)。

03 物料不守恒 

發(fā)補意見：本品穩(wěn)定性試驗數(shù)據(jù)顯示，含量下降幅度與有關(guān)物質(zhì)增幅不匹配，請對本品的主要降解途徑和降解產(chǎn)物進(jìn)行文獻(xiàn)檢索和研究分析，并重新評估本品有關(guān)物質(zhì)檢查方法的分離和檢出能力。

解讀：

物料守恒是有關(guān)物質(zhì)研究中常見的棘手問題，穩(wěn)定性考察期間如雜質(zhì)增加與含量下降不匹配，應(yīng)基于主成分結(jié)構(gòu)特點、文獻(xiàn)資料以及研究數(shù)據(jù)分析潛在的降解途徑和降解產(chǎn)物，關(guān)注分析方法的專屬性、靈敏度、檢出能力、雜質(zhì)校正因子等的影響，必要時優(yōu)化分析方法。造成物料不守恒的主要原因如下，可圍繞這幾點開展研究。

（1）洗脫梯度不合理，雜質(zhì)仍殘留在色譜柱上未被洗脫，可通過延長運行時間或增強洗脫梯度等方法驗證。

（2）降解產(chǎn)物與主峰共洗脫，可采用DAD光譜純度或LC-MS法進(jìn)一步確證，或調(diào)整洗脫梯度觀察主峰前后是否出現(xiàn)新增雜質(zhì)。

（3）檢測器無法檢出所有降解產(chǎn)物，例如應(yīng)用紫外檢測器但降解物無紫外吸收，此時應(yīng)開發(fā)另一種方法對該類雜質(zhì)進(jìn)行控制，例如注射用鹽酸頭孢吡肟質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)中除有關(guān)物質(zhì)檢查外，還增加了N-甲基吡咯烷（無紫外吸收）檢查項。

（4）方法靈敏度不足或色譜體系不當(dāng)導(dǎo)致未能有效識別雜質(zhì)，這些雜質(zhì)被當(dāng)成基線波動、基線抬高等，可通過提高進(jìn)樣濃度、使用陡梯度HPLC法等進(jìn)行研究。

（5）雜質(zhì)響應(yīng)差異導(dǎo)致定量不準(zhǔn)確，當(dāng)降解產(chǎn)物的結(jié)構(gòu)與主成分差異較大時，其在色譜體系中的響應(yīng)可能與主成分存在較大差異，應(yīng)對主要降解雜質(zhì)的校正因子進(jìn)行研究，必要時代入校正因子計算雜質(zhì)含量。

04 雜質(zhì)定量方法選擇依據(jù)不足 

發(fā)補意見：請采用限度濃度加標(biāo)供試品溶液考察外標(biāo)法、主成分對照法、加校正因子的自身對照法的定量差異，合理制定雜質(zhì)的定量方法。

解讀：

雜質(zhì)含量計算方法的選擇作為分析方法開發(fā)的重要內(nèi)容，往往容易被忽略，發(fā)補意見要求申請人對不同的定量方法進(jìn)行比較，其主要目的是對校正因子的準(zhǔn)確性進(jìn)行驗證，確保擬定的定量方法準(zhǔn)確可靠。CDE電子刊物《HPLC法校正因子研究中的幾個問題》指出：研究數(shù)據(jù)應(yīng)包括雜質(zhì)對照品外標(biāo)法、加校正因子的主成分自身對照法、不加校正因子的主成分自身對照法對相同多批樣品雜質(zhì)定量測定結(jié)果的對比數(shù)據(jù)，作為是否需要校正或能否有效校正檢測結(jié)果的支持與依據(jù)。

一般地，雜質(zhì)定量方法主要包括峰面積歸一化法、雜質(zhì)外標(biāo)法、主成分外標(biāo)法、自身對照法，其中主成分外標(biāo)法和自身對照法又包括加校正因子與不加校正因子兩種方法。峰面積歸一化法由于誤差較大，其應(yīng)用范圍有限；雜質(zhì)外標(biāo)法檢測成本高，一般不作為優(yōu)選方法，除非雜質(zhì)的響應(yīng)與主成分差異過大，即校正因子超出0.2~5.0范圍；主成分外標(biāo)法和自身對照法兼顧了便利性和準(zhǔn)確性，是當(dāng)前主流的雜質(zhì)定量方法。在建立方法時，應(yīng)參考發(fā)補意見對不同的定量方法進(jìn)行比較，選擇與雜質(zhì)外標(biāo)法檢測結(jié)果基本一致的定量方法。

05 關(guān)注相對保留時間耐用性 

發(fā)補意見：本品特定雜質(zhì)定位均采用相對保留時間定位，請關(guān)注相對保留時間的耐用性，必要時考慮采用雜質(zhì)對照品定位。

解讀：基于便利性及成本考慮，有關(guān)物質(zhì)檢測中雜質(zhì)定位通常采用相對保留時間（RRT）法，流動相比例、柱溫、洗脫梯度等色譜條件的微小變化均可能影響雜質(zhì)的RRT，且不同品牌型號的色譜柱對RRT的影響可能尤為顯著，對于相鄰且限度差異大的雜質(zhì)，定位錯誤可能會影響對產(chǎn)品質(zhì)量合格與否的判斷，因此有必要對RRT的耐用性進(jìn)行系統(tǒng)考察。

因此，建議在分析方法耐用性考察時，采用加標(biāo)供試品溶液或富含雜質(zhì)的樣品同步對RRT的耐用性進(jìn)行評估。值得注意的是，雜質(zhì)RRT可能會受基質(zhì)效應(yīng)、高濃度主成分、輔料等因素的影響，供試品溶液與雜質(zhì)對照品溶液在HPLC中雜質(zhì)的保留時間可能會有所差異，因此需用供試品加標(biāo)進(jìn)行考察。當(dāng)RRT易受某因素影響時，應(yīng)嚴(yán)格控制影響較大的色譜條件，必要時在質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)中明確。同時，應(yīng)將典型色譜圖作為質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的附件，以提高定位的準(zhǔn)確性。

對于相對于主峰保留時間較難識別的雜質(zhì)，尤其是相對于主峰保留時間接近的雜質(zhì)，可考慮采用相對于雜質(zhì)的保留時間進(jìn)行定位，例如EP11鹽酸帕羅西汀有關(guān)物質(zhì)檢測，采用雜質(zhì)對照品定位雜質(zhì)C，采用相對于雜質(zhì)C的保留時間定位雜質(zhì)F（RRT=0.97）和雜質(zhì)J（RRT=1.02）。

06 穩(wěn)定性期間變化趨勢異常 

發(fā)補意見：穩(wěn)定性試驗數(shù)據(jù)顯示，本品雜質(zhì)H含量隨放置時間延長呈降低趨勢，請對此反常現(xiàn)象進(jìn)行分析和研究。

解讀：

穩(wěn)定性考察期間雜質(zhì)變化趨勢異常主要包括數(shù)據(jù)上下波動、隨時間呈下降趨勢、個別時間點異常偏高或偏低等。出現(xiàn)趨勢異常的可能原因是檢測問題、雜質(zhì)二次降解等。

檢測問題多數(shù)是溶液穩(wěn)定性差造成的。對于主成分在溶液狀態(tài)下易降解產(chǎn)生雜質(zhì)或雜質(zhì)本身在溶液狀態(tài)易降解的產(chǎn)品，應(yīng)嚴(yán)格控制配制后的進(jìn)樣時間，為保證穩(wěn)定性期間數(shù)據(jù)具有可比性，推薦各時間點從樣品配制至進(jìn)樣的時間盡量保持一致，同時應(yīng)在質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)中增加“臨用現(xiàn)制”等操作要求。例如，產(chǎn)品M供試品溶液配制后0h、2h和4h雜質(zhì)A的含量分別為0.15%、0.19%、0.24%，按照《藥品GMP指南：質(zhì)量控制實驗室與物料系統(tǒng)》，供試品溶液在2h內(nèi)溶液穩(wěn)定（絕對變化量<0.05%），但0h和2h雜質(zhì)A含量存在一定差異，若每批供試品從樣品配制至進(jìn)樣的時間不同，則可能會造成穩(wěn)定性期間變化趨勢異常。

部分產(chǎn)品中的雜質(zhì)在一定條件下會發(fā)生二次降解，因此在穩(wěn)定性期間呈現(xiàn)下降趨勢，此時應(yīng)在申報資料中予以解釋說明，基于文獻(xiàn)資料、結(jié)構(gòu)特點等闡明降解機理，必要時可采用雜質(zhì)對照品穩(wěn)定性試驗進(jìn)一步確證。例如，資料顯示磷酸奧司他韋干混懸劑中雜質(zhì)Ro 68-7010是奧司他韋與輔料中還原性糖反應(yīng)得到一級降解產(chǎn)物，Ro 69-4458則是Ro 68-7010的二次降解產(chǎn)物。因此，在較低的溫度下產(chǎn)品中雜質(zhì)Ro 68-7010可能呈先增長后而后趨于穩(wěn)定或下降的趨勢，在較高溫度下產(chǎn)品中雜質(zhì)Ro 68-7010則呈現(xiàn)明顯下降趨勢。

07 輔料扣除方法不合理 

發(fā)補意見：研究圖譜顯示輔料峰且可能干擾雜質(zhì)的檢出，請制定合理的輔料峰扣除方法，提供支持性研究資料。

解讀：

有關(guān)物質(zhì)檢測如有輔料出峰，首選采用RRT法扣除，同時推薦在典型色譜圖中注明輔料出峰情況，以更好地識別輔料峰；如采用單一RRT無法準(zhǔn)確扣除，或某一段RRT內(nèi)同時存在多個輔料峰且該位置無雜質(zhì)峰時，可采用RRT范圍進(jìn)行扣除，例如ChP 2020雷貝拉唑鈉腸溶片有關(guān)物質(zhì)檢查項下規(guī)定“除相對保留時間約為0.44之前的輔料峰外”，復(fù)方地芬諾酯片規(guī)定“扣除相對保留時間約2.0之后的輔料峰”。對于采用RRT扣除輔料峰，同樣需要對輔料峰的RRT進(jìn)行耐用性考察。

如輔料峰較難定位或與雜質(zhì)相鄰，或不同供應(yīng)商的輔料（常見于香精、表面活性劑、高分子輔料等）出峰情況不同時，可選用輔料定位溶液進(jìn)行扣除，根據(jù)情況可配制全輔料或個別輔料定位溶液，例如ChP 2020鹽酸雷尼替丁泡騰顆粒有關(guān)物質(zhì)檢查項輔料定位溶液為阿司帕坦溶液，其余輔料則采用RRT扣除，質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定“除相對保留時間0.15之前的輔料峰與阿司帕坦峰”。需要關(guān)注的是，受基質(zhì)效應(yīng)、高濃度主成分等因素影響，輔料定位溶液的保留時間可能與供試品溶液存在差異，此時可考慮采用在供試品溶液中進(jìn)行輔料加標(biāo)的方式配制定位溶液。

參考文獻(xiàn)：

[1]《中國藥典》2020年版9102《藥品雜質(zhì)分析指導(dǎo)原則》

[2]《國家藥品標(biāo)準(zhǔn)工作手冊》

[3]《化學(xué)藥品3類注冊申請藥學(xué)自評估報告（制劑）（征求意見稿）》

[4]Baertschi S, Alsante K M, Reed R. Pharmaceutical Stress Testing: Predicting Drug Degradation, Second Edition. 2016.

[5]CDE電子刊物：HPLC法校正因子研究中的幾個問題

[6]趙娜，石靖. 仿制藥一致性評價中雜質(zhì)研究的常見問題探討. 中國醫(yī)藥工業(yè)雜志. 2021, 52(05): 703-708.

[7]《藥品GMP指南：質(zhì)量控制實驗室與物料系統(tǒng)》