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摘要

目的：分析與評(píng)價(jià)尼可地爾片的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)可行性及質(zhì)量狀況。

方法：采用法定檢驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)對(duì)88批尼可地爾片進(jìn)行檢驗(yàn)和統(tǒng)計(jì)分析，并采用探索性研究的方式對(duì)國(guó)內(nèi)企業(yè)生產(chǎn)的尼可地爾片的有關(guān)物質(zhì)、溶出曲線、含量均勻度和含量測(cè)定等項(xiàng)目進(jìn)行了考察與評(píng)價(jià)。

結(jié)果：按法定檢驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)檢驗(yàn)了共88批尼可地爾片樣品，合格率100%。通過(guò)探索性研究發(fā)現(xiàn)相關(guān)法定檢驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)項(xiàng)目設(shè)置不完善，部分方法專屬性較差，存在不能準(zhǔn)確測(cè)定真實(shí)含量的問(wèn)題；部分輔料、生產(chǎn)工藝及包裝易導(dǎo)致樣品水分增加，影響穩(wěn)定性。

結(jié)論：收集到的尼可地爾片與原研制劑存在差距，建議相關(guān)企業(yè)選擇適宜的輔料加強(qiáng)原輔料的水分控制及工藝過(guò)程中水分、溫度等參數(shù)控制并改進(jìn)包裝，以降低雜質(zhì)產(chǎn)生量；采用區(qū)分度高的溶出度控制方法進(jìn)行質(zhì)量控制，進(jìn)行仿制藥質(zhì)量與療效一致性評(píng)價(jià)，提高產(chǎn)品質(zhì)量。目前相關(guān)質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)存在缺陷，建議針對(duì)鑒別、有關(guān)物質(zhì)、溶出度、含量均勻度和含量測(cè)定項(xiàng)目進(jìn)行完善。

關(guān)鍵詞

尼可地爾片；質(zhì)量分析；藥品監(jiān)管；仿制藥一致性評(píng)價(jià)

尼可地爾（Nicorandil），化學(xué)名為N-（2-羥乙基）煙酰胺硝酸酯，屬硝酸酯類化合物，是一種ATP敏感性鉀通道開放劑，一般由N-（2-羥乙基）煙酰胺經(jīng)硝酸酯化得到，或由氨基乙醇硝酸酯，再經(jīng)?；磻?yīng)生成。該品種由日本中外制藥株式會(huì)社于1978年首先試制成功，臨床上主要用于治療冠心病，心絞痛[1-6]。尼可地爾的國(guó)產(chǎn)仿制藥最早由江蘇省徐州醫(yī)藥科學(xué)研究所與豐縣制藥廠協(xié)作研制，1986年1月由江蘇省衛(wèi)生廳批準(zhǔn)豐縣制藥廠生產(chǎn)原料和片劑并上市[7]。為更好評(píng)價(jià)市售尼可地爾片的質(zhì)量，并對(duì)相關(guān)質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)和影響藥品質(zhì)量的關(guān)鍵參數(shù)進(jìn)行分析，本次研究依據(jù)保證藥品安全性和有效性的原則對(duì)市售的尼可地爾片開展按法定標(biāo)準(zhǔn)檢驗(yàn)和探索性研究，對(duì)質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)項(xiàng)目設(shè)置的全面性、合理性以及制劑中的有關(guān)物質(zhì)來(lái)源、影響因素，溶出曲線情況和樣品含量等進(jìn)行考察，根據(jù)研究結(jié)果對(duì)該品種相關(guān)質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)存在的問(wèn)題和品種質(zhì)量情況進(jìn)行了深入的分析，并提出相關(guān)評(píng)價(jià)和建議，以期為藥品監(jiān)管部門和相關(guān)生產(chǎn)企業(yè)提供參考。

1儀器與試藥

1.1 儀器

LC-20A高效液相色譜儀（日本島津公司），1200高效液相色譜儀（美國(guó)Agilent公司），2690高效液相色譜儀（美國(guó)Waters公司），SOTAX自動(dòng)溶出儀（瑞士SOTAX公司），RCZ-8M自動(dòng)溶出儀（天津天大天發(fā)科技有限公司），ZB-1E智能崩解儀（天津天大天發(fā)科技有限公司），TU-1901紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)（北京普析通用儀器有限公司），QE高分辨液質(zhì)聯(lián)用儀（美國(guó)Thermo公司），AVANCEⅢ400兆核磁共振譜儀（德國(guó)Bruker公司），µDissTM型光纖藥物溶解性測(cè)定儀和µFluxTM型光纖藥物滲透性測(cè)定儀（美國(guó)Pion公司），UltimaⅣ型粉末X射線衍射儀（日本Rigaku公司），Mastersizer2000激光衍射粒度分布儀（英國(guó)Malvern公司），Titrando890水分測(cè)定儀（瑞士Metrohm公司），KB240恒溫恒濕箱（德國(guó)Binder公司），XA205電子天平（美國(guó)Mettler Toledo公司）。三氟乙酸、三乙胺、四氫呋喃等流動(dòng)相用試劑均為色譜純，水為純化水。尼可地爾對(duì)照品由中國(guó)食品藥品檢定研究院提供，尼可地爾片樣品均來(lái)源于國(guó)家藥品計(jì)劃抽驗(yàn)。

1.2 樣品

通過(guò)查詢國(guó)家藥品監(jiān)督管理局網(wǎng)站數(shù)據(jù)庫(kù)，尼可地爾片國(guó)內(nèi)共有56家生產(chǎn)企業(yè)56個(gè)批準(zhǔn)文號(hào)，但僅有部分企業(yè)實(shí)際生產(chǎn)。本次研究共獲得兩家生產(chǎn)企業(yè)共88批樣品，經(jīng)調(diào)研，A企業(yè)采用濕法制粒壓片法，B企業(yè)和原研企業(yè)均采用粉末直接壓片法進(jìn)行生產(chǎn)。獲得的88批樣品覆蓋我國(guó)18個(gè)省、自治區(qū)、直轄市，樣品來(lái)源涉及生產(chǎn)企業(yè)、經(jīng)營(yíng)企業(yè)和醫(yī)療機(jī)構(gòu)，其中生產(chǎn)企業(yè)1批（1.1%）；醫(yī)療機(jī)構(gòu)21批（23.9%）；經(jīng)營(yíng)企業(yè)66批（75.0%）。樣品覆蓋地域范圍大，來(lái)源分布廣泛，涉及全國(guó)范圍內(nèi)藥品生產(chǎn)、經(jīng)營(yíng)和使用的各個(gè)環(huán)節(jié)，具有評(píng)價(jià)意義。

相關(guān)產(chǎn)品的藥品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)為WS-10001-（HD0151）-2002[8]，英國(guó)藥典亦有收載[9]。

2檢驗(yàn)結(jié)果及質(zhì)量分析

對(duì)獲得的88批尼可地爾片樣品按國(guó)家藥品標(biāo)準(zhǔn)WS-10001-（HD-0151）-2002（以下簡(jiǎn)稱國(guó)家藥品標(biāo)準(zhǔn)）檢驗(yàn)，檢驗(yàn)項(xiàng)目包括性狀、2項(xiàng)化學(xué)反應(yīng)鑒別、溶出度、含量均勻度和含量測(cè)定，結(jié)果均符合規(guī)定，合格率為100%。A企業(yè)樣品測(cè)定結(jié)果顯示，不同地域同批號(hào)樣品測(cè)定結(jié)果間有差異，B企業(yè)不同地域同批號(hào)樣品測(cè)定結(jié)果間無(wú)明顯差異，故地域因素會(huì)影響A企業(yè)藥品質(zhì)量，但未影響B(tài)企業(yè)藥品質(zhì)量。

2.1 鑒別

國(guó)家藥品標(biāo)準(zhǔn)鑒別方法為取本品細(xì)粉適量（約相當(dāng)于尼可地爾0.15g），加丙酮10mL，振搖使溶解，濾過(guò)，濾液置水浴上蒸干，取殘?jiān)障率龇椒ㄔ囼?yàn)。化學(xué)鑒別（1）：取殘?jiān)s0.1g，加水與氫氧化鈉試液各5mL，溶解后，緩緩煮沸，即產(chǎn)生刺激性氣味，繼續(xù)加熱至氣味完全除去，加酚酞指示液1~2滴，用稀硫酸中和后，加硫酸銅試液2mL，緩緩析出淡藍(lán)色沉淀，濾過(guò)，取沉淀灼燒，即產(chǎn)生吡啶臭氣。經(jīng)檢驗(yàn)所有批次樣品均呈正反應(yīng)，合格率100%?；瘜W(xué)鑒別（2）：取殘?jiān)s10mg，置試管中，加水1mL與硫酸2mL，振搖使溶解，放冷，沿管壁緩緩加硫酸亞鐵試液3mL，兩液層接界面顯棕色。經(jīng)檢驗(yàn)所有批次樣品均呈正反應(yīng)，合格率100%。

2.2 溶出度

國(guó)家藥品標(biāo)準(zhǔn)中溶出度采用小杯法，鹽酸（稀鹽酸24→1000）溶液250mL為溶出介質(zhì)，轉(zhuǎn)速50rpm，30min取樣，在261nm下用紫外E值法測(cè)定，限度為70%，經(jīng)測(cè)定，88批樣品均符合規(guī)定，合格率100%。A企業(yè)49批樣品的溶出度均值最小值為86%，最大值為108%，平均值為100%。B企業(yè)39批樣品的溶出度均值最小值為94%，最大值為106%，平均值為100%。結(jié)果表明，不同生產(chǎn)企業(yè)樣品的平均溶出量中位值均在100%附近，但平均溶出量結(jié)果差異較大，結(jié)果分布較為分散。其中A企業(yè)樣品最低與最高溶出度均值相差22%，最低與最高批內(nèi)RSD相差10.15%，B企業(yè)樣品最低與最高溶出度均值相差12%，最低與最高批內(nèi)RSD相差7.26%，兩家企業(yè)樣品批間與批內(nèi)溶出度差異均較大，其中A企業(yè)樣品批間與批內(nèi)溶出度差異相對(duì)更大。溶出度結(jié)果顯示，雖然兩家企業(yè)的樣品均合格，但結(jié)果離散性均較大。

2.3 含量均勻度

與溶出度相似，國(guó)家藥品標(biāo)準(zhǔn)中含量均勻度檢查也為在261nm下用紫外E值法測(cè)定，限度為A+2.2S≤15.0。測(cè)定結(jié)果顯示，兩家企業(yè)A+2.2S平均結(jié)果差異不大。但比較不同企業(yè)樣品的含量均勻度A值與S值，可以看出A企業(yè)各批樣品間S值差異相對(duì)較小且集中，說(shuō)明工藝相對(duì)穩(wěn)定，但A值差異較大，顯示其樣品批間差異相對(duì)較大，說(shuō)明投放原料不穩(wěn)定或樣品發(fā)生不同程度的降解；而B企業(yè)各批樣品間的S值差異相對(duì)較大，顯示其樣品批內(nèi)差異較大，說(shuō)明其壓片等工藝的穩(wěn)定性有待提高，而A值差異相對(duì)較小，說(shuō)明其質(zhì)控相對(duì)穩(wěn)定。綜上所述，88批樣品含量均勻度雖都合格，但A企業(yè)樣品批間差異較大，而B企業(yè)批內(nèi)差異較大，因此兩家企業(yè)有必要加強(qiáng)生產(chǎn)工藝，使樣品均一性更好。

2.4 含量測(cè)定

對(duì)獲得的共88批次尼可地爾片按國(guó)家藥品標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行測(cè)定，檢驗(yàn)結(jié)果均在限度90.0%~110.0%，均符合規(guī)定，合格率100%。結(jié)果顯示，A企業(yè)樣品含量測(cè)定均值略高于B企業(yè)樣品，不同生產(chǎn)企業(yè)樣品的含量測(cè)定結(jié)果差異較小，結(jié)果分布較集中。另外在對(duì)A企業(yè)同批號(hào)不同地域樣品的檢測(cè)中發(fā)現(xiàn)，其中41.3%的樣品含量測(cè)定結(jié)果超出104%的情況，且同批不同地域樣品含量測(cè)定差異極值大于6%。分析導(dǎo)致該結(jié)果的原因可能有三方面：①企業(yè)超100%投料；②樣品含量測(cè)定專屬性不佳，降解產(chǎn)物的紫外吸收大于主成分，干擾了測(cè)定結(jié)果；③包裝隔離不足，導(dǎo)致環(huán)境濕度等條件對(duì)樣品主成分產(chǎn)生了影響。綜上，兩家企業(yè)樣品含量均值均高于100%，但同批號(hào)樣品含量差異大，提示可能與企業(yè)制備工藝、包裝以及儲(chǔ)藏有關(guān)。

2.5 現(xiàn)行國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)存在的問(wèn)題

通過(guò)評(píng)估，現(xiàn)行國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)不能全面分析國(guó)內(nèi)尼可地爾片的產(chǎn)品質(zhì)量，其主要問(wèn)題有：①項(xiàng)目設(shè)置不完善，無(wú)有關(guān)物質(zhì)檢查項(xiàng)，缺乏對(duì)藥品安全性進(jìn)行有效控制的手段。②尼可地爾片鑒別項(xiàng)中有通過(guò)聞氮氧化物及吡啶的方式進(jìn)行鑒別的步驟，對(duì)檢驗(yàn)員身體健康有影響，且缺乏專屬性較高的鑒別項(xiàng)目。③現(xiàn)行國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)含量均勻度、含量測(cè)定均采用紫外E值法測(cè)定含量，專屬性差，不能準(zhǔn)確測(cè)定其真實(shí)含量。④現(xiàn)行國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)方法采用小杯法，使用鹽酸溶液作為溶出介質(zhì)，30min取樣，限度為70%，與原研制劑采用的大杯法有差異，不利于仿制藥一致性評(píng)價(jià)工作的進(jìn)行，且檢測(cè)方法為紫外E值法，專屬性差，不能準(zhǔn)確測(cè)定溶出液中的主成分含量。

3探索性研究結(jié)果及質(zhì)量分析

根據(jù)國(guó)家藥品標(biāo)準(zhǔn)檢驗(yàn)中發(fā)現(xiàn)的問(wèn)題，圍繞樣品的安全性和有效性進(jìn)行了探索性研究。

3.1 有關(guān)物質(zhì)

因現(xiàn)行國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)未收載有關(guān)物質(zhì)檢查項(xiàng)，且其含量測(cè)定等方法均為紫外E值法，專屬性較差，因此對(duì)尼可地爾片的有關(guān)物質(zhì)情況了解不深入。目前英國(guó)藥典雖有收載采用高效液相色譜法（HPLC）的尼可地爾片有關(guān)物質(zhì)檢查項(xiàng)，2017年版本對(duì)方法進(jìn)行了變更，但是其新舊方法均無(wú)法有效分離國(guó)內(nèi)尼可地爾片的有關(guān)物質(zhì)[10-12]。因此，本研究團(tuán)隊(duì)首先建立了一個(gè)能夠?qū)?guó)內(nèi)尼可地爾片樣品進(jìn)行有效分離的高效液相色譜有關(guān)物質(zhì)檢查方法對(duì)樣品的有關(guān)物質(zhì)進(jìn)行測(cè)定[13]。采用高效液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用（LC-MS）、核磁共振等技術(shù)對(duì)樣品中存在的雜質(zhì)進(jìn)行考察，明確雜質(zhì)結(jié)構(gòu)。通過(guò)ADMET Predictor軟件預(yù)測(cè)毒性和細(xì)胞毒性試驗(yàn)考察雜質(zhì)毒性，結(jié)果顯示雜質(zhì)毒性均較小，且均低于主成分尼可地爾。用建立的高效液相色譜有關(guān)物質(zhì)檢查方法對(duì)88批樣品進(jìn)行了檢驗(yàn)，樣品雜質(zhì)含量較高，平均雜質(zhì)總量為9.9%（圖1）。其中A企業(yè)樣品的雜質(zhì)總量和各單個(gè)雜質(zhì)量與離散值顯著高于B企業(yè)樣品，反映出樣品相對(duì)質(zhì)量較差。通過(guò)對(duì)原料藥及原研制劑的測(cè)定，發(fā)現(xiàn)各企業(yè)的原料藥雜質(zhì)量均較低（雜質(zhì)總量不超過(guò)0.1%）且原研制劑的雜質(zhì)總量明顯低于國(guó)內(nèi)企業(yè)。由結(jié)果可得：①采用粉末直接壓片樣品（原研和B企業(yè)）的有關(guān)物質(zhì)明顯少于濕法制粒壓片樣品（A企業(yè)），說(shuō)明水分控制是影響有關(guān)物質(zhì)產(chǎn)生的關(guān)鍵因素。②同樣采用粉末直接壓片工藝生產(chǎn)的樣品（原研與B企業(yè)），其有關(guān)物質(zhì)的量差異依然很大，說(shuō)明輔料及相關(guān)工藝也是影響產(chǎn)品穩(wěn)定性的關(guān)鍵因素。③制劑中的雜質(zhì)含量比原料藥中明顯增大，說(shuō)明主成分易受處方、制劑工藝、儲(chǔ)藏條件的影響。

圍繞以上問(wèn)題開展了5個(gè)方面的延伸性探索性研究。①在對(duì)A企業(yè)采用的濕法制粒壓片生產(chǎn)工藝研究中發(fā)現(xiàn)，樣品在制粒到壓片的過(guò)程中，每個(gè)步驟中雜質(zhì)都有所增長(zhǎng)，尤其是在制粒過(guò)程，雜質(zhì)總量增長(zhǎng)較快（3.1%），推測(cè)制粒中的濕熱條件是導(dǎo)致雜質(zhì)顯著增加的關(guān)鍵因素，該推論在后續(xù)進(jìn)行的探索性研究中得到了確證。此外，壓片后片劑的雜質(zhì)總量為3.8%，而獲得的A企業(yè)共49批次樣品有關(guān)物質(zhì)雜質(zhì)總量的均值明顯更高，說(shuō)明更多的雜質(zhì)是在長(zhǎng)期儲(chǔ)藏過(guò)程中產(chǎn)生的。②在穩(wěn)定性影響因素研究中發(fā)現(xiàn)在高溫條件下原料藥和制劑雜質(zhì)都隨時(shí)間延長(zhǎng)顯著增加，說(shuō)明尼可地爾不能耐受高溫。據(jù)調(diào)研，尼可地爾在40~70℃時(shí)會(huì)發(fā)生聚合反應(yīng)不斷生成多聚體[14]，使雜質(zhì)量不斷增加。高濕條件下，各廠家原料藥的雜質(zhì)均有增加，而制劑吸濕明顯，雜質(zhì)增加量明顯高于原料藥，表明尼可地爾片對(duì)濕度較為敏感，其制劑存在原輔料相容性問(wèn)題。在強(qiáng)光照射條件下，原料的雜質(zhì)量有所增加，制劑相對(duì)于原料藥更加穩(wěn)定，可能因尼可地爾被輔料包裹，較少被光照直射有關(guān)。③通過(guò)對(duì)原研和國(guó)內(nèi)企業(yè)樣品的水分進(jìn)行測(cè)定，結(jié)果顯示，A企業(yè)的樣品水分（均值7.9%）明顯高于B企業(yè)（均值5.4%），而原研藥水分均值僅為0.6%。通過(guò)相關(guān)性分析，樣品的水分值與所有雜質(zhì)的生成顯著正相關(guān)（P<0.01），與影響因素試驗(yàn)高濕試驗(yàn)結(jié)果吻合，說(shuō)明水分嚴(yán)重影響尼可地爾的穩(wěn)定性。④在原輔料相容性研究中發(fā)現(xiàn)，引濕性較強(qiáng)的輔料如羧甲基淀粉鈉、糊精等，均會(huì)導(dǎo)致雜質(zhì)顯著增加，說(shuō)明該類型輔料存在著原輔料相容性問(wèn)題，應(yīng)盡量避免使用。⑤在包裝影響研究中發(fā)現(xiàn)，在同樣溫度條件下，處于加干燥劑的包裝內(nèi)的樣品雜質(zhì)增加相比裸片更緩慢，說(shuō)明高濕度環(huán)境會(huì)加快尼可地爾的降解速度。在長(zhǎng)期的放置中鋁塑板內(nèi)的片劑的雜質(zhì)量會(huì)與裸片趨于等同，單純的鋁塑板不能有效起到保護(hù)制劑的作用，相比之下雙鋁箔板隔絕效果更佳。此外，雖然同樣采用了鋁塑板（或雙鋁箔板）加鋁箔袋內(nèi)附干燥劑的包裝形式，但原研制劑的雜質(zhì)量可維持在相對(duì)較低的水平，而B企業(yè)樣品的雜質(zhì)量逐漸上升。提示兩個(gè)企業(yè)的制劑可能存在著干燥劑效能方面的差異。通過(guò)干燥劑效能試驗(yàn)，結(jié)果表明，原研藥所用的干燥劑吸濕性能為B企業(yè)的10倍以上，可以更有效地控制鋁箔袋中濕度。

3.2 溶出度

口服制劑在人體中的生物利用度是評(píng)價(jià)藥物有效性的重要指標(biāo)，其中溶出度作為體外手段體現(xiàn)口服制劑的生物有效性，可通過(guò)考察不同pH值溶出介質(zhì)中的溶出曲線來(lái)評(píng)價(jià)制劑的生物有效性[15，16]。參照日本橙皮書條件[17]，按照溶出度與釋放度測(cè)定法（《中國(guó)藥典》2020年版通則0931第二法）[18]，分別以水、pH1.2、pH4.0、pH6.8緩沖溶液900mL為溶出介質(zhì)，轉(zhuǎn)速50rpm，經(jīng)2、4、6、10、15、20、30、45、60min時(shí)，取溶液5mL，濾過(guò)，取續(xù)濾液用探索性研究建立的含量測(cè)定HPLC色譜條件進(jìn)行溶出曲線研究。如圖2所示，原研制劑在4種溶出介質(zhì)中的溶出速率較快，在4種介質(zhì)2min時(shí)的平均溶出量已達(dá)40%，B企業(yè)溶出行為與原研制劑較為相似，而A企業(yè)的制劑在4種溶出介質(zhì)中15min前的溶出速率明顯慢于其他兩家企業(yè)的制劑。為考察溶出曲線差異是否由于原料藥性質(zhì)不同導(dǎo)致，本研究對(duì)各企業(yè)原料藥的溶解度，固有溶出速率，被動(dòng)轉(zhuǎn)運(yùn)的有效滲透性，LogP、LogD值、晶型、粒度等性質(zhì)進(jìn)行了測(cè)定與考察。結(jié)果顯示，原料藥不是造成溶出曲線差異的關(guān)鍵因素。通過(guò)崩解時(shí)限的考察，A企業(yè)樣品崩解時(shí)限（5.6min）要遠(yuǎn)遠(yuǎn)高過(guò)原研制劑（0.9min）。推測(cè)A企業(yè)溶出速率慢于其他兩家企業(yè)樣品的原因?yàn)槠洳捎脻穹ㄖ屏Ｒ胼^強(qiáng)粘合劑，造成片劑崩解較慢，考慮到藥品的抗心絞痛功效，提示企業(yè)應(yīng)調(diào)整工藝，提高藥品的溶出速率。參照日本“橙皮書”條件，建立了溶出度HPLC檢查方法，并用該方法測(cè)定了獲得的88批次樣品，結(jié)果顯示兩家企業(yè)樣品溶出度均值分布較為分散，且溶出度結(jié)果相較國(guó)家藥品標(biāo)準(zhǔn)測(cè)定結(jié)果均有不同程度降低，經(jīng)與探索性研究建立的HPLC方法含量測(cè)定檢測(cè)結(jié)果比對(duì)，溶出度低的主要原因?yàn)樵撆螛悠泛科汀?/span>

3.3 含量均勻度

取本品1片，置50mL量瓶中，加流動(dòng)相適量，超聲并振搖使尼可地爾溶解，用流動(dòng)相稀釋至刻度，搖勻，濾過(guò)，取續(xù)濾液作為供試品溶液，并用流動(dòng)相配制相同濃度的對(duì)照品溶液，按建立的HPLC色譜條件（同“4.4含量測(cè)定”）檢驗(yàn)88批樣品。比較不同企業(yè)產(chǎn)品的含量均勻度A值與S值，與按現(xiàn)行國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)檢驗(yàn)結(jié)果不盡相同，A企業(yè)各批樣品間的A值和S值均較大，顯示其樣品批間和批內(nèi)差異均較大。而B企業(yè)各批樣品間S值差異相對(duì)較大，A值差異相對(duì)較小，顯示其樣品批內(nèi)差異較大。兩企業(yè)樣品均存在一定的工藝問(wèn)題，建議相關(guān)企業(yè)加強(qiáng)生產(chǎn)工藝的研究，提高產(chǎn)品均一性。

4.4 含量測(cè)定

由于降解產(chǎn)物與主成分紫外最大吸收波長(zhǎng)相近，故采用紫外E值法測(cè)定專屬性較差。故建立HPLC方法，用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑（Inertsil ODS-3V C18，4.6×150mm，5µm），以甲醇-水（30∶70）為流動(dòng)相，流速1.0mL·min-1，柱溫30℃，以262nm作為檢測(cè)波長(zhǎng)，進(jìn)樣體積為20µL。精密稱取約相當(dāng)于尼可地爾10mg的樣品，置100mL量瓶中，加流動(dòng)相適量，超聲并振搖使尼可地爾溶解，用流動(dòng)相稀釋至刻度，搖勻，濾過(guò)，取續(xù)濾液作為供試品溶液，并用流動(dòng)相配制相同濃度的對(duì)照品溶液，共檢驗(yàn)88批樣品。兩家企業(yè)樣品測(cè)得的含量相較于紫外E值法測(cè)定的含量均有所降低，其中A企業(yè)降低更多，根據(jù)有關(guān)物質(zhì)研究結(jié)果，這主要是由于A企業(yè)采用濕法制粒壓片，制劑本身水分較高，同時(shí)其包裝不足以隔離外部溫濕度環(huán)境對(duì)樣品的影響，使樣品發(fā)生降解，進(jìn)而導(dǎo)致了上述結(jié)果的產(chǎn)生。

4建議

通過(guò)研究發(fā)現(xiàn)尼可地爾片目前的相關(guān)藥品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)及樣品的處方、生產(chǎn)工藝和包裝方面都存在若干問(wèn)題。在質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)方面本研究建議：①增訂有關(guān)物質(zhì)檢查方法，制定合理的雜質(zhì)限度；②修訂含量測(cè)定和含量均勻度檢查方法，將紫外E值法修訂為專屬性強(qiáng)的液相色譜法；③將溶出度檢查方法由小杯法（《中國(guó)藥典》2020年版附錄0931第三法）-紫外E值法修訂為槳法（《中國(guó)藥典》2020年版附錄0931第二法）-液相色譜法；④修訂對(duì)檢驗(yàn)員健康有風(fēng)險(xiǎn)的鑒別項(xiàng)，建立專屬性強(qiáng)的液相色譜鑒別方法。在處方和生產(chǎn)工藝方面建議該品種仿制藥生產(chǎn)企業(yè)按原研藥調(diào)整處方，采用區(qū)分度高的溶出度控制方法進(jìn)行質(zhì)量控制，進(jìn)行仿制藥質(zhì)量與療效一致性評(píng)價(jià)。同時(shí)在處方中盡可能減少或避免使用羧甲基淀粉鈉等具有引濕性的輔料，并盡量采用非濕法制粒工藝生產(chǎn)該品種，同時(shí)加強(qiáng)原輔料的水分控制及工藝過(guò)程中水分、溫度等參數(shù)控制，以降低雜質(zhì)產(chǎn)生量。在包裝方面建議企業(yè)使用雙鋁箔板與自封式鋁箔袋的包裝，于鋁箔袋中加入高效能干燥劑并在說(shuō)明書及外包裝中增加提醒患者在開封后保留干燥劑的說(shuō)明。