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在實驗室的日常工作中，移液器是我們最親密、最常用的“伙伴”之一。數(shù)據(jù)的準(zhǔn)確性與可靠性，很大程度上依賴于移液器的精確性和潔凈度。然而，許多實驗人員有一個常見的誤區(qū)：認(rèn)為移液器的清潔就是簡單地用酒精擦拭一下外部表面。

事實上，只清潔表面是遠(yuǎn)遠(yuǎn)不夠的，甚至是危險的。 真正的污染源和交叉污染風(fēng)險，往往隱藏在移液器的內(nèi)部。今天，我們就來徹底講透移液器清潔與內(nèi)部滅菌的正確方法。

為什么“只擦表面”是重大誤區(qū)

移液器的工作原理是通過活塞的上下運(yùn)動來吸液和放液。在這個過程中，氣溶膠、液體微滴甚至倒吸的液體，都會不可避免地進(jìn)入移液器內(nèi)部通道和活塞表面。

看不見的污染：即使外部擦拭得光亮如新，內(nèi)部通道可能已經(jīng)積累了樣品殘留、微生物或核酸酶。這些污染物會成為下一次移液的污染源，導(dǎo)致： 樣本間交叉污染：嚴(yán)重影響實驗結(jié)果的準(zhǔn)確性，尤其是對PCR、qPCR等超敏感實驗可能是毀滅性的。 

微生物污染：在細(xì)胞培養(yǎng)、微生物實驗中引入雜菌，導(dǎo)致實驗失敗。

 腐蝕活塞和密封圈：高鹽、酸性或有機(jī)溶劑殘留會加速內(nèi)部元件的腐蝕和老化，影響移液精度和使用壽命。因此，定期對移液器內(nèi)部進(jìn)行徹底的清潔和滅菌，不是“可選項”，而是“必選項”。

移液器內(nèi)部滅菌的正確步驟

在進(jìn)行任何操作前，請務(wù)必閱讀您所用移液器的廠家說明書，因為不同品牌、型號的移液器其耐受性和拆卸方式可能不同。

第一步：準(zhǔn)備工作與外部清潔

1、設(shè)置工作區(qū)：在潔凈的臺面上進(jìn)行操作，準(zhǔn)備好手套。

2、卸下吸頭推出器（如可拆卸）：許多移液器的下半部分套筒可以旋開。

3、外部清潔：用無絨布蘸取適量清水、肥皂水或70%乙醇，仔細(xì)擦拭移液器外壁，去除表面的污垢和微生物。避免讓液體滲入內(nèi)部。

第二步：拆卸移液器這是接觸內(nèi)部、進(jìn)行深度清潔的關(guān)鍵一步。

1、解鎖拆卸：參照說明書，通常通過旋轉(zhuǎn)或按壓特定卡扣，將移液器下半部（吸頭承接器部分）與上半部（機(jī)身）分離。

2、取出內(nèi)部組件：小心地取出活塞、密封圈（O-ring）等核心部件。有些移液器是一體式活塞桿，有些則是分體式。務(wù)必輕柔操作，避免劃傷精密活塞表面。

第三步：清潔與浸泡

1、清洗：用溫和的肥皂水或去離子水沖洗拆卸下來的所有部件（下半部套筒、活塞、密封圈等）。對于頑固污漬，可用軟毛刷輕輕刷洗。

2、浸泡滅菌（根據(jù)實驗需求選擇合適方法）：

化學(xué)浸泡滅菌（適用所有移液器部件）：

常用消毒劑：75%乙醇、異丙醇、稀漂白液（次氯酸鈉，需注意濃度，通常1:10稀釋，浸泡后需徹底沖洗以免腐蝕）、專業(yè)多酶清洗液。

操作：將拆卸下的所有非金屬部件完全浸沒在消毒液中，浸泡30分鐘以上（具體時間參考消毒劑說明和移液器說明書）。注意：確保所使用的消毒劑與移液器材料相容，避免腐蝕塑料部件。

高溫高壓滅菌（僅適用于有“autoclavable”標(biāo)識的移液器）：

準(zhǔn)備工作：將移液器拆卸。通常機(jī)身（上半部分）不能高溫滅菌。只有下半部套筒、活塞桿等部件可以滅菌。務(wù)必確認(rèn)所有要滅菌的部件都耐高溫。

包裝：將所有可滅菌部件用牛皮紙、滅菌袋或鋁箔紙包好，并標(biāo)注日期。

滅菌參數(shù)：通常采用121°C，1 bar (100 kPa)，滅菌20-30分鐘。請嚴(yán)格遵守移液器說明書推薦的滅菌時間和溫度。切勿過熱，否則會損壞部件。

冷卻與干燥：滅菌完成后，在無菌環(huán)境下取出部件，并務(wù)必讓其充分冷卻和干燥后再進(jìn)行組裝。熱部件立即組裝會產(chǎn)生水汽，影響密封性和精度。

第四步：重新組裝與校準(zhǔn)

1、徹底干燥：將所有清洗和滅菌后的部件放在無絨布上完全晾干。確保沒有任何液體殘留，特別是密封圈區(qū)域。

2、涂抹潤滑油：根據(jù)說明書建議，在活塞上涂抹少量專用的移液器硅脂潤滑油。這能保證活塞運(yùn)動順滑，保持密封性和延長壽命。切忌使用過多。

3、小心組裝：按照反向順序重新組裝所有部件。確保各部位安裝到位，卡扣鎖緊。

4、性能檢查（校準(zhǔn)）：經(jīng)過拆卸和滅菌后，強(qiáng)烈建議對移液器進(jìn)行精度和準(zhǔn)確度的檢查（ gravimetric 稱重法校準(zhǔn)）。這是確保其恢復(fù)最佳工作狀態(tài)的最后、也是最重要的一步。

不同場景下的維護(hù)頻率建議

日常：每次使用后，用70%乙醇擦拭表面。

常規(guī)：每月或每季度進(jìn)行一次內(nèi)部清潔（視使用頻率而定）。

強(qiáng)制性：

在轉(zhuǎn)換不同樣品，特別是涉及DNA、RNA、放射性或腐蝕性樣品時。

在進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng)、微生物實驗前。

當(dāng)移液器被液體完全污染或倒吸時（需立即處理！）。

根據(jù)實驗室質(zhì)量管理體系（如GLP/GMP）規(guī)定的周期。

總結(jié)與警示

忌：將整支未拆卸的移液器直接浸泡入消毒液中或進(jìn)行高溫滅菌。

忌：使用腐蝕性強(qiáng)的溶劑（如丙酮、強(qiáng)酸強(qiáng)堿）清洗部件。

忌：在部件未完全干燥時強(qiáng)行組裝。

忌：忽略潤滑和校準(zhǔn)步驟。

移液器是科學(xué)家手的延伸，它的“健康”直接關(guān)系到實驗數(shù)據(jù)的“生命”。摒棄“只擦表面”的僥幸心理，建立科學(xué)、規(guī)范的移液器清潔與滅菌流程，是對您實驗成果最基本、也是最關(guān)鍵的保障。