藥物研發(fā)進程中，非臨床藥理毒理評價是評估候選化合物安全性的基石，為首次人體試驗（FIH）提供至關(guān)重要的科學(xué)依據(jù)。該評價體系需遵循《藥物非臨床研究質(zhì)量管理規(guī)范》（GLP），其核心在于系統(tǒng)揭示藥物的吸收、分布、代謝、排泄（ADME）特性及潛在毒性風(fēng)險。不同類型藥物的研究策略雖有差異，但核心評價框架保持一致。
臨床前藥理毒理評價有哪些內(nèi)容？
•《藥物非臨床研究質(zhì)量管理規(guī)范》（國家食品藥品監(jiān)督管理總局令第34號） 指出非臨床安全性評價研究，指為評價藥物安全性，在實驗室條件下用實驗系統(tǒng)進行的試驗，包括：安全藥理學(xué)試驗、單次給藥毒性試驗、重復(fù)給藥毒性試驗、生殖毒性試驗、遺傳毒性試驗、致癌性試驗、局部毒性試驗、免疫原性試驗、依賴性試驗、毒代動力學(xué)試驗以及與評價藥物安全性有關(guān)的其他試驗。
單次給藥毒性試驗(急性毒性）
核心目標(biāo)： 明確單次或24小時內(nèi)多次給藥后產(chǎn)生的急性毒性反應(yīng)特征及其可逆性，識別主要毒性靶器官。
核心價值： 為重復(fù)給藥毒性試驗的劑量設(shè)計、臨床起始劑量選擇及急性中毒風(fēng)險評估提供關(guān)鍵參考。
實驗設(shè)計： 需采用兩種相關(guān)動物種屬（特定情況如部分中藥可用一種）、兩種性別、健康成年動物。劑量設(shè)計方法多樣（如最大耐受量法、固定劑量法、上下法等）。觀察期通常不少于14天，密切監(jiān)測臨床癥狀、死亡、體重變化，終末進行大體解剖和組織病理學(xué)檢查。
關(guān)鍵產(chǎn)出： 最大無毒性反應(yīng)劑量（MFD）、最大耐受劑量（MTD）、劑量-反應(yīng)關(guān)系、靶器官初步判斷。
重復(fù)給藥毒性試驗(長期毒性）
核心目標(biāo)： 全面描述動物長期重復(fù)暴露于受試物后的毒性反應(yīng)譜，確定毒性靶器官、劑量依賴性和時間進程。
核心價值： 預(yù)測人體潛在不良反應(yīng)、確定未觀察到有害作用水平（NOAEL）、推導(dǎo)FIH的起始安全劑量范圍。
實驗設(shè)計： 要求兩種相關(guān)種屬、兩種性別動物。設(shè)置低（通常接近或略高于預(yù)期有效暴露量）、中、高（應(yīng)能誘導(dǎo)明顯毒性反應(yīng)）劑量組及溶劑對照組。給藥頻率通常每日一次，試驗周期需覆蓋并支持擬開展臨床研究的期限。監(jiān)測指標(biāo)全面，包括行為學(xué)、攝食量、體重、眼科、體溫、心電圖（ECG）、臨床病理學(xué)（血液學(xué)、血生化、尿液分析）及詳盡的組織病理學(xué)檢查。
關(guān)鍵產(chǎn)出： 明確NOAEL、毒性靶器官、可逆性評估、安全范圍界定。需結(jié)合毒代動力學(xué)（TK）數(shù)據(jù)進行綜合評價。
核心目標(biāo)： 檢測受試物是否引起DNA損傷及其固定，評估潛在的致突變和致癌風(fēng)險。
適用范圍： 中藥、天然藥物、化學(xué)藥物基本要求。
標(biāo)準(zhǔn)策略： 通常采用以下組合之一：
組合一： 細菌回復(fù)突變試驗（Ames試驗） + 體外哺乳動物細胞遺傳損傷試驗（如染色體畸變試驗、微核試驗） + 一項體內(nèi)遺傳毒性試驗（通常為嚙齒類骨髓微核試驗）。
組合二： Ames試驗 + 兩項使用不同組織的體內(nèi)遺傳毒性試驗（如骨髓微核試驗 + 肝臟彗星試驗）。
關(guān)鍵產(chǎn)出： 綜合判斷受試物是否具有遺傳毒性潛力。
核心目標(biāo)： 評估藥物對親代生殖功能（配子發(fā)生、交配行為、受孕、妊娠、分娩、哺乳）及子代發(fā)育（胚胎-胎兒發(fā)育、出生后生長發(fā)育直至性成熟）的潛在不良影響。
核心價值： 是評估藥物生殖發(fā)育安全性的關(guān)鍵環(huán)節(jié)，對臨床用藥人群（尤其是育齡人群）的風(fēng)險管理至關(guān)重要。
試驗分期： 通常按生育力與早期胚胎發(fā)育（I段）、胚胎-胎仔發(fā)育（II段）、圍產(chǎn)期發(fā)育（III段）分階段進行，覆蓋完整生殖發(fā)育周期。
關(guān)鍵考量： 需根據(jù)藥物特點、臨床適應(yīng)癥和擬用人群確定試驗策略和時機（參見ICH S5(R3)等指南）。常伴隨TK研究（母體、胚胎/胎仔、乳汁暴露）。
安全藥理學(xué)
核心目標(biāo)： 識別藥物在治療劑量及以上范圍內(nèi)，對生理功能（特別是生命體征相關(guān)系統(tǒng)）產(chǎn)生的非預(yù)期藥效學(xué)作用（不良反應(yīng)）。
適用范圍： 普遍適用于所有藥物（含生物制品）。
核心組合： 重點關(guān)注中樞神經(jīng)系統(tǒng)（FOB）、心血管系統(tǒng)（清醒動物血壓、心率、ECG，體外hERG）和呼吸系統(tǒng)（頻率、潮氣量等）的功能評價。
實驗設(shè)計： 通常在清醒動物上進行，單次給藥，劑量需涵蓋并超出治療劑量范圍以達到充分暴露。根據(jù)核心組合結(jié)果或化合物特性，可能需進行追加或補充試驗（如對泌尿、胃腸系統(tǒng)的影響）。
關(guān)鍵產(chǎn)出： 評估藥物對重要生命功能系統(tǒng)的潛在風(fēng)險。
核心目標(biāo)： 識別受試物在動物中的潛在致癌性，并評估其對人體的相關(guān)風(fēng)險。
啟動依據(jù)： 通?；陂L期用藥（≥6個月或頻繁間歇性長期使用）、特定擔(dān)憂因素（如陽性遺傳毒性結(jié)果、明確免疫抑制或激素活性、特定患者人群、高全身暴露、結(jié)構(gòu)警示、光致癌潛力等）進行評估。
實驗系統(tǒng)： 首選大鼠，通常需第二種嚙齒類（小鼠）。特殊情況下可使用替代模型。
關(guān)鍵產(chǎn)出： 評估腫瘤發(fā)生率、類型、潛伏期、劑量-反應(yīng)關(guān)系，并與人體藥代動力學(xué)特征進行關(guān)聯(lián)性分析，判斷人體風(fēng)險。
局部毒性試驗
核心目標(biāo)： 評估非口服給藥途徑（如注射、皮膚、粘膜、眼、吸入等）對用藥局部組織產(chǎn)生的刺激性、腐蝕性、過敏性反應(yīng)，以及對全身產(chǎn)生的過敏性、溶血性等不良反應(yīng)。
關(guān)鍵內(nèi)容： 局部刺激性/過敏性試驗、全身過敏性試驗、溶血性試驗。
關(guān)鍵產(chǎn)出： 明確給藥途徑相關(guān)的局部和全身安全性風(fēng)險。
免疫原性試驗
核心目標(biāo)： 評估治療性蛋白、多肽及其衍生物（如抗體偶聯(lián)藥物ADC）誘發(fā)抗藥抗體（ADA）的能力及其潛在后果（如中和活性、過敏反應(yīng)、影響藥效/清除）。
研究重點： ADA的檢測與表征（發(fā)生率、滴度、持續(xù)時間、中和能力）。
檢測策略： 采用層級化的分析方法（篩選、確證、滴度測定、中和活性分析），常用方法包括橋聯(lián)法、直接法等。
關(guān)鍵產(chǎn)出： 評估免疫原性風(fēng)險及其對臨床安全性和有效性的潛在影響。
依賴性試驗
核心目標(biāo)： 評估藥物產(chǎn)生精神依賴（渴求）和軀體依賴（戒斷癥狀）的潛力，警示潛在濫用傾向。適用范圍： 主要針對作用于中樞神經(jīng)系統(tǒng)（CNS）的藥物。
評估策略： 早期評估（結(jié)構(gòu)分析、靶點預(yù)測、PK特性）結(jié)合依賴性行為學(xué)試驗（藥物辨別、自身給藥、戒斷評價），常用大鼠模型。
實驗設(shè)計： 通常設(shè)陽性/陰性對照，在最高預(yù)期人體治療劑量Cmax附近設(shè)置劑量，在藥物達峰時間（Tmax）附近觀察行為學(xué)變化。關(guān)鍵產(chǎn)出： 判斷藥物的依賴性潛力等級。
毒代動力學(xué)
核心目標(biāo)： 在毒性試驗中同步測定受試物在動物體內(nèi)的全身暴露水平（AUC, Cmax等）及其持續(xù)時間，建立暴露量與毒性效應(yīng)的關(guān)系。
核心價值： 解釋毒性反應(yīng)、支持種屬選擇合理性、優(yōu)化給藥方案、量化靶器官暴露、橋接動物與人體安全性（為FIH劑量選擇提供依據(jù)）、指導(dǎo)臨床安全監(jiān)測。
實施要點： 伴隨主要毒性試驗（尤其是重復(fù)給藥毒性試驗）進行，關(guān)注關(guān)鍵參數(shù)（AUC0-t, Cmax, C(time)），確保分析方法可靠。
關(guān)鍵產(chǎn)出： 暴露量-毒性關(guān)系分析，支持非臨床到臨床的安全性轉(zhuǎn)化。
支持IND申報所需的試驗
支持IND申報的關(guān)鍵非臨床研究概覽
為成功提交IND申請，需整合并提供以下關(guān)鍵非臨床研究數(shù)據(jù)：
藥理學(xué)： 體內(nèi)外主要藥效學(xué)（作用機制驗證、概念驗證POC）。
分析學(xué)： 經(jīng)過驗證的藥物制劑分析方法和生物樣品分析方法。
藥代動力學(xué)： 全面的體內(nèi)ADME研究及體外代謝/相互作用研究。
毒理學(xué)（安全性評價核心）：
安全藥理學(xué)（核心組合：CNS、心血管、呼吸系統(tǒng)）。
一般毒性試驗：劑量范圍探索試驗（DRF）及符合GLP規(guī)范的單次和重復(fù)給藥毒性試驗（試驗期限不短于擬開展的臨床研究給藥期）。
遺傳毒性試驗（標(biāo)準(zhǔn)核心組合）。根據(jù)藥物特性和臨床計劃，可能需要的其他試驗（生殖毒性早期試驗、局部耐受性、免疫原性、依賴性潛力初步評估等）。
制劑安全性： 根據(jù)給藥途徑和制劑類型，完成相應(yīng)的局部耐受性/刺激性/過敏性等試驗。
總結(jié)
非臨床藥理毒理評價是一個系統(tǒng)、嚴(yán)謹且高度法規(guī)化的過程。通過精心設(shè)計和執(zhí)行上述關(guān)鍵研究，旨在全面闡明候選藥物的安全性特征，識別潛在風(fēng)險點（毒性靶器官、安全范圍、特殊毒性如遺傳、生殖、致癌、依賴風(fēng)險等），并利用毒代動力學(xué)數(shù)據(jù)建立動物與人體暴露關(guān)聯(lián)，為首次人體臨床試驗的安全啟動奠定堅實的科學(xué)基礎(chǔ)，最終保障受試者安全。各項研究的具體實施需嚴(yán)格遵循國內(nèi)外相關(guān)技術(shù)指導(dǎo)原則的要求。
支持IND申報的非臨床研究主要清單
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研究類別 |
核心目的/內(nèi)容 |
關(guān)鍵產(chǎn)出/目標(biāo) |
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體內(nèi)外藥理學(xué) |
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分析方法開發(fā)與驗證 |
藥物制劑分析、生物樣本(如血漿)中藥物及代謝物定量分析方法 |
確保數(shù)據(jù)準(zhǔn)確可靠的關(guān)鍵前提 |
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藥代動力學(xué)(PK) |
體內(nèi)ADME過程、體外代謝(酶抑制/誘導(dǎo))及轉(zhuǎn)運體研究 |
闡明藥物體內(nèi)過程，預(yù)測潛在相互作用 |
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安全藥理學(xué)(核心組合) |
中樞神經(jīng)系統(tǒng)、心血管系統(tǒng)、呼吸系統(tǒng)功能影響 |
評估對生命維持關(guān)鍵系統(tǒng)的潛在風(fēng)險 |
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單次給藥毒性試驗(急性) |
單次或24小時內(nèi)多次給藥的急性毒性反應(yīng) |
確定MTD/MFD，識別急性靶器官，支持起始劑量設(shè)計 |
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重復(fù)給藥毒性試驗(長期) |
重復(fù)給藥的毒性特征(符合GLP，期限≥臨床擬用期限) |
確定NOAEL/靶器官/可逆性，推導(dǎo)臨床安全起始劑量及范圍 |
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遺傳毒性試驗(核心組合) |
評估致突變和染色體損傷潛力(通常：2個體外 + 1個體內(nèi)試驗) |
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制劑安全性試驗 |
根據(jù)給藥途徑(如注射、外用、眼用等)評估局部耐受性 |
確保特定劑型和給藥方式下的局部與全身安全性(如刺激性等) |
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（酌情增加） |
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生殖毒性試驗(早期階段) |
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評估對早期生殖過程的潛在風(fēng)險(根據(jù)臨床計劃) |
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免疫原性試驗(生物制品) |
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評估免疫反應(yīng)風(fēng)險及對療效/安全性的影響 |
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依賴性潛力評估 |
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附表：試驗清單
京公網(wǎng)安備11010802046783號
