新藥非臨床研究一般考慮及案例分析
來(lái)源
《中國(guó)新藥雜志》 2025年 第34卷第20期
作者
徐陽(yáng)美，萬(wàn)江帆，倪穗穎，賀敬龍，謝磊，成斌
國(guó)家藥品監(jiān)督管理局藥品審評(píng)檢查大灣區(qū)分中心
摘要
非臨床研究是藥物研發(fā)注冊(cè)過(guò)程中至關(guān)重要的環(huán)節(jié)，貫穿于新藥研發(fā)的全過(guò)程。本文將根據(jù)國(guó)內(nèi)藥品注冊(cè)相關(guān)法律法規(guī)和技術(shù)指導(dǎo)原則、ICH指導(dǎo)原則，基于藥品審評(píng)實(shí)踐，闡述新藥非臨床研究過(guò)程中的一般考慮和關(guān)注點(diǎn)，并通過(guò)案例分析探討非臨床研究中的常見(jiàn)問(wèn)題，以期為新藥研發(fā)企業(yè)或機(jī)構(gòu)提供非臨床研究參考。
關(guān)鍵詞
新藥研發(fā); 非臨床研究; 一般考慮; 案例分析
正文
新藥研發(fā)是一個(gè)充滿風(fēng)險(xiǎn)、不斷剔除候選藥物的螺旋上升式過(guò)程，需要藥學(xué)、非臨床、臨床等專業(yè)學(xué)科的系統(tǒng)協(xié)作，其中非臨床研究所涉及安全性和藥理學(xué)活性是候選藥物剔除的主要原因。藥物非臨床研究貫穿于新藥研發(fā)的全過(guò)程，從藥物早期開(kāi)發(fā)階段到臨床試驗(yàn)、上市許可申報(bào)階段，所需非臨床研究信息逐步增多。我國(guó)自2017年加入ICH以來(lái)，已基本全面轉(zhuǎn)化實(shí)施ICH各級(jí)指導(dǎo)原則。本文將根據(jù)國(guó)內(nèi)藥品注冊(cè)相關(guān)法律法規(guī)和技術(shù)指導(dǎo)原則、ICH指導(dǎo)原則，基于藥品審評(píng)實(shí)踐，闡述新藥非臨床研究過(guò)程中的一般考慮和關(guān)注點(diǎn)，并結(jié)合審評(píng)工作中的具體案例對(duì)常見(jiàn)問(wèn)題進(jìn)行分析，以期為新藥研發(fā)企業(yè)或機(jī)構(gòu)提供非臨床研究參考。本文闡述的新藥非臨床研究一般考慮適用于藥物研發(fā)注冊(cè)過(guò)程中的一般性原則，對(duì)于生物制品及中藥的某些特殊考慮須參考相應(yīng)的法律法規(guī)或指導(dǎo)原則。
1非臨床研究的總體原則
非臨床研究主要圍繞探索藥物的有效性和安全性開(kāi)展，包括藥理學(xué)、藥動(dòng)學(xué)和毒理學(xué)研究，三者密不可分，擬為臨床研究和上市應(yīng)用提供支持，降低用藥風(fēng)險(xiǎn)[1]。非臨床研究應(yīng)以臨床試驗(yàn)方案和臨床用藥為評(píng)價(jià)終點(diǎn)目標(biāo)，一方面應(yīng)充分評(píng)估藥物的有效性、立題依據(jù)和臨床價(jià)值; 另一方面應(yīng)充分預(yù)測(cè)可能的人體毒性，以制定臨床研究風(fēng)險(xiǎn)防控措施，并推算臨床研究的首次人體劑量和安全范圍，以利弊權(quán)衡為原則，根據(jù)擬定適應(yīng)證的潛在有效性和安全性風(fēng)險(xiǎn)，進(jìn)行綜合評(píng)價(jià)和獲益/風(fēng)險(xiǎn)權(quán)衡，為藥物進(jìn)入臨床試驗(yàn)提供支持或?yàn)樗幬镒?cè)上市的說(shuō)明書撰寫提供信息，幫助醫(yī)生和患者了解藥物的有效性和安全性信息。開(kāi)展藥物非臨床研究應(yīng)當(dāng)符合國(guó)家有關(guān)規(guī)定，具有與研究項(xiàng)目相適應(yīng)的人員、場(chǎng)地、設(shè)備、儀器和管理制度，保證有關(guān)數(shù)據(jù)、資料和樣品的真實(shí)性，保證藥品研制全過(guò)程持續(xù)符合法定要求[2]。
2非臨床研究的主要內(nèi)容和一般考慮
2.1 藥理學(xué)
藥理學(xué)研究包括主要藥效學(xué)、次要藥效學(xué)和安全藥理學(xué)研究，應(yīng)在藥物開(kāi)發(fā)過(guò)程中不斷深入和完善。主要藥效學(xué)研究受試物與其預(yù)期治療靶點(diǎn)相關(guān)的作用機(jī)制和/或效應(yīng)，一般采用公認(rèn)或經(jīng)過(guò)驗(yàn)證的試驗(yàn)方法，以提示受試物的有效性特點(diǎn)，為受試物進(jìn)入臨床提供有效性支持，并為安全性評(píng)價(jià)提供信息。次要藥效學(xué)研究與預(yù)期治療目標(biāo)不相關(guān)的作用和/或作用模式。在某些情況下，主要藥效學(xué)和次要藥效學(xué)特征信息有助于對(duì)受試物在人體中的潛在不良反應(yīng)進(jìn)行安全性評(píng)價(jià)[3]。主要藥效學(xué)研究涉及體外和體內(nèi)試驗(yàn)，研究過(guò)程中應(yīng)注重闡述受試物的作用機(jī)制、在不同系統(tǒng)/模型中的有效性、量效/時(shí)效關(guān)系、最佳給藥周期、與陽(yáng)性藥比較等[4]。
安全藥理學(xué)是研究受試物在治療劑量及以上的暴露水平時(shí)對(duì)生理機(jī)能潛在的非預(yù)期的藥效學(xué)作用，是藥物安全性評(píng)價(jià)的一個(gè)重要組成部分。在藥物進(jìn)入臨床試驗(yàn)前，一般應(yīng)完成安全藥理學(xué)核心組合試驗(yàn)(core battery)，即對(duì)中樞神經(jīng)系統(tǒng)、心血管系統(tǒng)和呼吸系統(tǒng)等重要生命器官系統(tǒng)的研究。當(dāng)核心組合試驗(yàn)、臨床試驗(yàn)、流行病學(xué)、體內(nèi)外試驗(yàn)以及文獻(xiàn)報(bào)道提示受試物存在潛在的與人體安全性有關(guān)的不良反應(yīng)時(shí)，應(yīng)進(jìn)行追加和/或補(bǔ)充的安全藥理學(xué)研究，可在后續(xù)臨床開(kāi)發(fā)期間完成[5]。追加的安全藥理學(xué)研究將對(duì)中樞神經(jīng)系統(tǒng)、心血管系統(tǒng)或呼吸系統(tǒng)進(jìn)行更深入的研究，以獲得更多信息; 補(bǔ)充的安全藥理學(xué)研究將評(píng)價(jià)受試物對(duì)核心組合試驗(yàn)或重復(fù)給藥毒性試驗(yàn)未能闡明但存在安全性擔(dān)憂的器官系統(tǒng)不良藥效作用，如腎臟/泌尿系統(tǒng)、自主神經(jīng)系統(tǒng)、胃腸道系統(tǒng)及其他器官系統(tǒng)。需要特別注意，安全藥理學(xué)體內(nèi)試驗(yàn)應(yīng)結(jié)合受試物的藥效學(xué)和藥動(dòng)學(xué)特性、受試動(dòng)物、臨床研究方案等因素選擇觀察時(shí)間點(diǎn)和觀察時(shí)間，原則上應(yīng)多點(diǎn)采樣，以對(duì)不良反應(yīng)的時(shí)間進(jìn)程進(jìn)行研究，采樣時(shí)間應(yīng)至少涵蓋血藥濃度峰值(Cmax)，以充分暴露安全性風(fēng)險(xiǎn); 伴隨重復(fù)給藥毒性試驗(yàn)開(kāi)展時(shí)，須單獨(dú)設(shè)計(jì)符合安全藥理學(xué)評(píng)價(jià)的指標(biāo)，原則上應(yīng)遵循《藥物非臨床研究質(zhì)量管理規(guī)范》[3，6-8]。
【案例1】某單克隆抗體，按治療用生物制品注冊(cè)分類1申請(qǐng)適應(yīng)證為“晚期實(shí)體瘤”的首次人體Ⅰ/Ⅱ期臨床試驗(yàn)，非臨床體內(nèi)腫瘤模型中大部分動(dòng)物未見(jiàn)腫瘤明顯生長(zhǎng)，藥效評(píng)價(jià)指標(biāo)未包含腫瘤生長(zhǎng)或轉(zhuǎn)移情況，認(rèn)為未成功建立動(dòng)物腫瘤模型，非臨床有效性研究數(shù)據(jù)不足。
【案例2】某化學(xué)合成小分子肽，按化學(xué)藥品注冊(cè)分類1申請(qǐng)適應(yīng)證為“睡眠障礙”的首次人體Ⅰ期臨床試驗(yàn)，提出的作用機(jī)制與擬申請(qǐng)適應(yīng)證之間的相關(guān)性不明確，且未開(kāi)展任何體外機(jī)制研究，體內(nèi)藥效學(xué)試驗(yàn)也不符合一般治療失眠藥物的藥效學(xué)要求，不足以支持?jǐn)M定的作用機(jī)制和提示其有效性。
【案例3】某化學(xué)小分子抑制劑，按化學(xué)藥品注冊(cè)分類1申請(qǐng)適應(yīng)證為“晚期實(shí)體瘤”的首次人體臨床試驗(yàn)，心血管系統(tǒng)及呼吸系統(tǒng)安全藥理學(xué)試驗(yàn)伴隨重復(fù)給藥毒性試驗(yàn)開(kāi)展，但各項(xiàng)指標(biāo)數(shù)據(jù)檢測(cè)均采用單一時(shí)間點(diǎn)設(shè)計(jì)，檢測(cè)指標(biāo)也不全面，試驗(yàn)設(shè)計(jì)存在缺陷，心電圖檢查時(shí)間點(diǎn)不在Cmax附近，對(duì)心血管系統(tǒng)及呼吸系統(tǒng)的影響可能未充分暴露。
2.2 藥動(dòng)學(xué)
藥動(dòng)學(xué)研究主要通過(guò)體外和體內(nèi)試驗(yàn)揭示受試物在體內(nèi)的動(dòng)態(tài)變化規(guī)律，獲得其基本藥動(dòng)學(xué)參數(shù)，是藥物研發(fā)與評(píng)價(jià)的主線和重要決策依據(jù)之一。藥動(dòng)學(xué)研究除可以為給藥途徑、劑型篩選提供信息外，還可以幫助進(jìn)一步闡明藥物的作用機(jī)制，同時(shí)也是藥效學(xué)和毒理學(xué)研究動(dòng)物選擇依據(jù)之一，并能提供人體藥動(dòng)學(xué)研究無(wú)法反映的信息(如組織分布)，為設(shè)計(jì)和優(yōu)化臨床試驗(yàn)給藥方案提供有關(guān)參考信息[5，9]。藥動(dòng)學(xué)研究?jī)?nèi)容主要包括吸收、分布、代謝、排泄、藥物相互作用、分析方法建立與驗(yàn)證等，其試驗(yàn)設(shè)計(jì)須特別關(guān)注選擇合適的動(dòng)物種屬; 采樣時(shí)間點(diǎn)應(yīng)兼顧藥物的吸收相、平衡相(Cmax附近)和消除相，通常測(cè)定原形藥和/或主要代謝產(chǎn)物，應(yīng)至少設(shè)置3個(gè)劑量組; 選擇合適的檢測(cè)方法并進(jìn)行方法學(xué)驗(yàn)證等[9-10]。
【案例4】某化學(xué)小分子抑制劑，按化學(xué)藥品注冊(cè)分類1申請(qǐng)適應(yīng)證為“晚期實(shí)體瘤”的首次人體Ⅰ期臨床試驗(yàn)，組織分布研究?jī)H檢測(cè)單一時(shí)間點(diǎn)的組織濃度，未考察組織分布-時(shí)間關(guān)系及暴露量情況，且未考察心臟組織的藥物分布情況，未提供藥動(dòng)學(xué)檢測(cè)方法的方法學(xué)驗(yàn)證報(bào)告，未能充分反映該品種的體內(nèi)分布特征。
【案例5】某化學(xué)藥，按化學(xué)藥品注冊(cè)分類1申請(qǐng)適應(yīng)證為“類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎”的首次人體Ⅰ期臨床試驗(yàn)，未提交不同種屬體外代謝產(chǎn)物鑒定試驗(yàn)資料及毒理研究相關(guān)動(dòng)物種屬選擇的合理性依據(jù)，基于已有數(shù)據(jù)尚無(wú)法支持用于安全性評(píng)價(jià)的相關(guān)動(dòng)物種屬的合理性，尚不能確定已有的毒理學(xué)數(shù)據(jù)是否可以充分提示該品種的毒性特征。
2.3 毒理學(xué)
毒理學(xué)研究是新藥非臨床研究中最重要的安全性評(píng)價(jià)內(nèi)容，可闡明靶器官的毒性反應(yīng)、劑量依賴性、毒性與藥物暴露的關(guān)系以及毒性的可逆性等，以估算人體臨床試驗(yàn)的安全起始劑量和劑量范圍，確定潛在不良反應(yīng)的臨床監(jiān)測(cè)指標(biāo)，以最大限度地降低臨床試驗(yàn)和上市后患者用藥的安全性風(fēng)險(xiǎn)[5]。根據(jù)《藥品注冊(cè)管理辦法》，用于支持藥品注冊(cè)的藥物非臨床安全性評(píng)價(jià)研究應(yīng)當(dāng)在通過(guò)藥物非臨床研究質(zhì)量管理規(guī)范認(rèn)證的機(jī)構(gòu)開(kāi)展，并遵循《藥物非臨床研究質(zhì)量管理規(guī)范》[1]。毒理學(xué)研究主要包括一般毒理學(xué)研究(安全藥理學(xué)、單次給藥毒性、重復(fù)給藥毒性等)、特殊毒理學(xué)研究(遺傳毒性、生殖毒性、致癌性等)、制劑安全性研究、其他毒性研究(免疫毒性、光安全性、依賴性、幼齡動(dòng)物毒性、雜質(zhì)毒性、代謝產(chǎn)物安全性等)。毒理研究用樣品工藝應(yīng)相對(duì)穩(wěn)定，能充分代表臨床試驗(yàn)擬用樣品和/或上市樣品的質(zhì)量和安全性，在藥物開(kāi)發(fā)過(guò)程中，若受試物產(chǎn)地、工藝、質(zhì)量等發(fā)生可能影響安全性的變化，應(yīng)進(jìn)行適當(dāng)?shù)臉蚪友芯炕蛑匦逻M(jìn)行毒理研究。
單次給藥毒性試驗(yàn)是考察受試物單次或24h內(nèi)多次給予后在一定時(shí)間內(nèi)產(chǎn)生的毒性反應(yīng)，以初步闡明受試物的毒性作用和了解其毒性靶器官，對(duì)重復(fù)給藥毒性試驗(yàn)的劑量設(shè)計(jì)和某些藥物臨床試驗(yàn)起始劑量的選擇具有重要參考價(jià)值，并能夠提供與人類藥物過(guò)量所致急性中毒相關(guān)的信息[11]。當(dāng)急性毒性信息可從其他規(guī)范試驗(yàn)中獲得時(shí)，不推薦再開(kāi)展單獨(dú)的單次給藥試驗(yàn)[5，12]。
重復(fù)給藥毒性試驗(yàn)主要是通過(guò)重復(fù)給藥的動(dòng)物試驗(yàn)表征受試物的毒性作用，是非臨床安全性評(píng)價(jià)的核心內(nèi)容，可預(yù)測(cè)受試物可能引起的臨床不良反應(yīng)，包括毒性靶器官或靶組織、不良反應(yīng)的性質(zhì)和程度、量效和時(shí)效關(guān)系以及可逆性等，確定未觀察到臨床不良反應(yīng)的劑量水平(no observed adverse effect level，NOAEL)，推測(cè)首次臨床試驗(yàn)(first-in-human，F(xiàn)IH)的起始劑量，為后續(xù)臨床試驗(yàn)提供安全劑量范圍及風(fēng)險(xiǎn)防控信息提示等[5，13-14]。重復(fù)給藥毒性試驗(yàn)設(shè)計(jì)須特別關(guān)注以下方面: 應(yīng)采用相關(guān)動(dòng)物種屬，化學(xué)藥品一般根據(jù)體外代謝數(shù)據(jù)等采用嚙齒類和非嚙齒類2種動(dòng)物，生物制品一般根據(jù)作用靶點(diǎn)及親和力、功能活性等選擇相關(guān)動(dòng)物種屬; 須考察毒性的劑量-反應(yīng)關(guān)系及可逆性，高劑量受試物原則上應(yīng)使動(dòng)物產(chǎn)生明顯的毒性反應(yīng); 給藥途徑原則上應(yīng)與臨床擬用途徑一致; 給藥頻率原則上應(yīng)能反映臨床擬用給藥頻率，具體根據(jù)藥物特點(diǎn)而定; 原則上重復(fù)給藥毒性試驗(yàn)期限應(yīng)不短于臨床擬用期限，化學(xué)藥品一般參考ICH M3(R2)執(zhí)行(詳見(jiàn)表1和表2)，生物制品、抗腫瘤藥的特殊要求參考ICH S6或ICH S9等相關(guān)指導(dǎo)原則執(zhí)行[15-16]。
【案例6】某雙特異性抗體，按治療用生物制品注冊(cè)分類1申請(qǐng)適應(yīng)證為“晚期實(shí)體瘤”的首次人體Ⅰ期臨床試驗(yàn)，申報(bào)資料缺少不同種屬親和力研究和抗體藥物評(píng)價(jià)相關(guān)的體外藥效學(xué)/生物活性研究數(shù)據(jù)，僅依據(jù)同源性序列比對(duì)結(jié)果確定相關(guān)動(dòng)物種屬，其毒理學(xué)種屬選擇依據(jù)尚不充分，且尚不足以評(píng)價(jià)包括作用機(jī)制、生物學(xué)功能和免疫學(xué)活性等在內(nèi)的藥效學(xué)特征，不符合ICH S6(R1)及相關(guān)指導(dǎo)原則的要求。
【案例7】某激酶抑制劑，已在國(guó)內(nèi)獲批“中度至重度活動(dòng)性類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎”適應(yīng)證臨床試驗(yàn)，現(xiàn)按化學(xué)藥品注冊(cè)分類1申請(qǐng)新增適應(yīng)證為“中重度特應(yīng)性皮炎(atopic dermatitis，AD)”的Ⅱ期臨床試驗(yàn)，提交的臨床試驗(yàn)方案給藥周期為16周，但該品種已完成的動(dòng)物重復(fù)給藥毒性試驗(yàn)周期為13周，尚不能支持其開(kāi)展給藥16周的臨床試驗(yàn)。
【案例8】由抗體偶聯(lián)藥物(antibody-drug conjugate，ADC)與裸抗以一定含量比制成的某混合制劑，按治療用生物制品注冊(cè)分類1申請(qǐng)適應(yīng)證為“晚期惡性腫瘤”的首次人體Ⅰ期臨床試驗(yàn)，非嚙齒類動(dòng)物重復(fù)給藥毒性試驗(yàn)中，在低劑量下可見(jiàn)無(wú)法排除與受試物相關(guān)性的動(dòng)物死亡，無(wú)法獲得最高非嚴(yán)重毒性劑量(highest non-severely toxic dose，HNSTD)，無(wú)法擬定首次臨床試驗(yàn)起始劑量，臨床試驗(yàn)安全性風(fēng)險(xiǎn)具有不可控性。
【案例9】某化學(xué)小分子抑制劑，按化學(xué)藥品注冊(cè)分類1申請(qǐng)適應(yīng)證為“晚期實(shí)體瘤”的首次人體Ⅰ期臨床試驗(yàn)，非嚙齒類動(dòng)物重復(fù)給藥毒性試驗(yàn)中，僅在溶媒對(duì)照組和高劑量組設(shè)置了恢復(fù)期動(dòng)物，恢復(fù)期內(nèi)高劑量組動(dòng)物可見(jiàn)瀕死，且部分病變未見(jiàn)恢復(fù)趨勢(shì)，未在更低劑量組設(shè)置恢復(fù)期，無(wú)法判斷藥物相關(guān)毒性的可逆性，不能為臨床試驗(yàn)提供充分的安全性信息及風(fēng)險(xiǎn)提示。
遺傳毒性試驗(yàn)是用于檢測(cè)通過(guò)不同機(jī)制直接或間接誘導(dǎo)遺傳學(xué)損傷的受試物體外和體內(nèi)試驗(yàn)，可檢出DNA損傷及其損傷的固定，主要用于預(yù)測(cè)受試物致癌性。藥品注冊(cè)申報(bào)時(shí)，要求對(duì)其遺傳毒性的可能性進(jìn)行全面評(píng)價(jià)，推薦的標(biāo)準(zhǔn)試驗(yàn)組合有2種，一般應(yīng)包含細(xì)菌回復(fù)突變?cè)囼?yàn)(Ames試驗(yàn))、哺乳動(dòng)物細(xì)胞體外和/或體內(nèi)試驗(yàn)[17-18]。對(duì)于化學(xué)藥，基因突變?cè)囼?yàn)可支持單次給藥臨床試驗(yàn); 為支持多次給藥臨床試驗(yàn)，還需完成哺乳動(dòng)物系統(tǒng)染色體損傷檢測(cè)試驗(yàn); 在Ⅱ期臨床試驗(yàn)開(kāi)始前應(yīng)完成完整的遺傳毒性標(biāo)準(zhǔn)試驗(yàn)組合[5]。為了減少藥物開(kāi)發(fā)風(fēng)險(xiǎn)、保護(hù)受試者安全，建議在臨床試驗(yàn)開(kāi)始前完成遺傳毒性標(biāo)準(zhǔn)試驗(yàn)組合。常規(guī)遺傳毒性試驗(yàn)并不適用于生物制品，晚期抗腫瘤藥應(yīng)于上市前完成遺傳毒性研究[15-16]。
【案例10】某小分子化學(xué)藥申報(bào)非腫瘤適應(yīng)證，已在境內(nèi)完成Ⅰ期臨床試驗(yàn)，因發(fā)生藥學(xué)變更，按化學(xué)藥品注冊(cè)分類1申請(qǐng)Ⅱ期臨床試驗(yàn)。但該品種僅完成體外Ames試驗(yàn)和人外周血淋巴細(xì)胞(human peripheral blood lymphocytes，HPBL)微核試驗(yàn)，根據(jù)ICH M3(R2)指導(dǎo)原則的要求，完整的遺傳毒性試驗(yàn)組合應(yīng)在Ⅱ期臨床試驗(yàn)開(kāi)始前完成。
生殖毒性試驗(yàn)旨在反映受試物對(duì)哺乳動(dòng)物生殖功能和發(fā)育過(guò)程的影響，預(yù)測(cè)其可能產(chǎn)生的對(duì)生殖細(xì)胞、受孕、妊娠、分娩、哺乳等親代生殖機(jī)能的不良影響以及對(duì)子代胚胎-胎仔發(fā)育、出生后發(fā)育的不良影響。生殖毒性研究在限定臨床試驗(yàn)受試者范圍、降低臨床試驗(yàn)受試者和藥品上市后使用人群的用藥風(fēng)險(xiǎn)方面發(fā)揮重要作用。生殖毒性試驗(yàn)設(shè)計(jì)通常采用三段法或其他試驗(yàn)設(shè)計(jì)法，其中三段法主要包括以下內(nèi)容。Ⅰ段: 生育力和早期胚胎發(fā)育毒性(fertility and early embryonic development，F(xiàn)EED); Ⅱ段: 胚胎-胎仔發(fā)育毒性(embryo-fetal development，EFD); Ⅲ段: 圍產(chǎn)期毒性(pre-and postnatal development，PPND)[19-20]。若在重復(fù)給藥毒性試驗(yàn)中對(duì)雄性和雌性動(dòng)物生殖器官進(jìn)行了詳細(xì)檢查(包括全面的組織病理學(xué)檢查)，雄性或雌性生育力試驗(yàn)完成前男性或有生育可能的婦女(women of child bearing potential，WOCBP)受試者可納入Ⅰ，Ⅱ期臨床試驗(yàn)中，并應(yīng)在大規(guī)?；蜷L(zhǎng)期臨床試驗(yàn)開(kāi)始前完成專門的雄性或雌性生育力試驗(yàn)。大規(guī)?；蜷L(zhǎng)期臨床試驗(yàn)包括但不限于Ⅲ期臨床試驗(yàn)，視臨床方案而定，如人數(shù)>150或時(shí)間超過(guò)3個(gè)月，無(wú)生育可能的婦女在缺少動(dòng)物生殖毒性試驗(yàn)的情況下可納入臨床試驗(yàn)中。對(duì)于WOCBP，一般應(yīng)在Ⅰ期臨床試驗(yàn)前完成Ⅱ段生殖毒性試驗(yàn)，否則若在小規(guī)模、短期臨床試驗(yàn)(試驗(yàn)組WOCBP人數(shù)<150并不超過(guò)3個(gè)月)中納入WOCBP，通常至少需要獲得2種動(dòng)物種屬的Ⅱ段生殖毒性初步試驗(yàn)結(jié)果，并在臨床試驗(yàn)中采取嚴(yán)格風(fēng)險(xiǎn)控制措施，通常應(yīng)在大規(guī)?；蜷L(zhǎng)期臨床試驗(yàn)前完成Ⅱ段生殖毒性試驗(yàn)(2種動(dòng)物種屬); Ⅲ段生殖毒性試驗(yàn)應(yīng)在申請(qǐng)上市前完成。妊娠期婦女進(jìn)入臨床試驗(yàn)前，各項(xiàng)生殖毒性試驗(yàn)和遺傳毒性標(biāo)準(zhǔn)試驗(yàn)組合均應(yīng)完成，另外還應(yīng)對(duì)藥物以往人體暴露的安全性數(shù)據(jù)進(jìn)行評(píng)價(jià)[5，21]。晚期抗腫瘤藥應(yīng)于上市前完成Ⅱ段生殖毒性試驗(yàn)，一般不必進(jìn)行Ⅰ和Ⅲ段生殖毒性試驗(yàn)支持臨床試驗(yàn)或上市[16]。生物制品的相關(guān)動(dòng)物種屬是非人靈長(zhǎng)類動(dòng)物(non-human primates，NHPs)時(shí)，其生殖毒性試驗(yàn)時(shí)間安排參考ICH S6(R1)相關(guān)要求[15]。
【案例11】某小分子多肽化合物申報(bào)非腫瘤適應(yīng)證，已在境內(nèi)外完成Ⅰ期臨床試驗(yàn)，因發(fā)生藥學(xué)變更，按化學(xué)藥品注冊(cè)分類1申請(qǐng)Ⅱ期臨床試驗(yàn)，提交的臨床試驗(yàn)方案給藥周期為48周。但該品種僅完成1種動(dòng)物種屬Ⅱ段生殖毒性試驗(yàn)，尚未完成第2種動(dòng)物種屬的Ⅱ段生殖毒性試驗(yàn)。根據(jù)ICH M3(R2)指導(dǎo)原則的要求，應(yīng)在大規(guī)?；蜷L(zhǎng)期臨床試驗(yàn)(如試驗(yàn)組WOCBP人數(shù)>150或時(shí)間超過(guò)3個(gè)月)前完成Ⅱ段生殖毒性試驗(yàn)(2種動(dòng)物種屬)。
致癌性試驗(yàn)主要通過(guò)長(zhǎng)期/終生給藥，在動(dòng)物模型中識(shí)別受試物的潛在致癌作用，以評(píng)價(jià)其在人體中的相關(guān)風(fēng)險(xiǎn)[22]。通常采用大鼠2年致癌性試驗(yàn)+小鼠2年致癌性試驗(yàn)/短期或中期體內(nèi)試驗(yàn)，同時(shí)ICH S1B(R1)提出可通過(guò)證據(jù)權(quán)重法(weight of evidence，WoE)評(píng)估能否豁免大鼠2年致癌性試驗(yàn)[23-24]。需要開(kāi)展致癌性試驗(yàn)的情況一般包括: ①臨床連續(xù)用藥達(dá)6個(gè)月及以上。②臨床以間歇方式重復(fù)用藥，如治療易復(fù)發(fā)的慢性疾病的藥物。③規(guī)定連續(xù)用藥3個(gè)月的藥物，也可能連續(xù)用藥達(dá)6個(gè)月。④存在潛在致癌性擔(dān)憂。但當(dāng)特定適應(yīng)證人群的預(yù)期壽命較短時(shí)(如2~3年之內(nèi))或用于晚期全身腫瘤的抗腫瘤藥物，可考慮免除致癌性試驗(yàn)。當(dāng)抗腫瘤藥可明顯延長(zhǎng)生命、有繼發(fā)性腫瘤的擔(dān)憂時(shí)或當(dāng)這些藥物擬用于非帶瘤患者的輔助治療、非腫瘤適應(yīng)證長(zhǎng)期使用時(shí)，仍需考慮開(kāi)展致癌性試驗(yàn)[23]。若需要，一般應(yīng)在上市申請(qǐng)前完成致癌性試驗(yàn); 只有存在明顯的致癌性風(fēng)險(xiǎn)擔(dān)憂時(shí)，才需要在臨床試驗(yàn)前提交致癌性試驗(yàn)結(jié)果[5]。標(biāo)準(zhǔn)致癌性試驗(yàn)一般不適用于生物制品，應(yīng)結(jié)合產(chǎn)品具體情況進(jìn)行評(píng)估[15]。
【案例12】某單克隆抗體，按治療用生物制品注冊(cè)分類1申請(qǐng)適應(yīng)證為“高膽固醇血癥”的上市許可，因未開(kāi)展致癌性試驗(yàn)，且藥品注冊(cè)申請(qǐng)人(以下簡(jiǎn)稱“申請(qǐng)人”)提供的豁免致癌性試驗(yàn)的證據(jù)權(quán)重分析較為簡(jiǎn)單、不夠充分，提交的圍產(chǎn)期發(fā)育毒性試驗(yàn)報(bào)告內(nèi)容不完整，所以需要補(bǔ)充資料。
制劑安全性試驗(yàn)主要研究藥物制劑經(jīng)非口服途徑給藥時(shí)對(duì)用藥局部和/或全身產(chǎn)生的毒性，一般包括刺激性、過(guò)敏性、溶血性試驗(yàn)等[25]，部分試驗(yàn)可伴隨在一般毒理試驗(yàn)中進(jìn)行，但應(yīng)滿足相關(guān)評(píng)價(jià)要求[5，26]。
【案例13】某單克隆抗體注射用粉針劑，已在境外完成首例受試者入組(尚未獲得人體臨床試驗(yàn)數(shù)據(jù))，按治療用生物制品注冊(cè)分類1申請(qǐng)適應(yīng)證為“晚期或轉(zhuǎn)移性實(shí)體瘤”的我國(guó)境內(nèi)人體Ⅰa/Ⅰb期臨床試驗(yàn)，因未按照指導(dǎo)原則要求開(kāi)展臨床擬用樣品溶血性研究，認(rèn)為對(duì)其臨床擬用樣品溶血性風(fēng)險(xiǎn)未知。
3非臨床研究申報(bào)資料要求
目前化學(xué)藥品和生物制品注冊(cè)申報(bào)資料已全面適用ICH《M4: 人用藥物注冊(cè)申請(qǐng)通用技術(shù)文檔(CTD)》[27]。CTD中涉及非臨床研究的有M2.4非臨床綜述、M2.6非臨床文字總結(jié)和列表總結(jié)及M4非臨床試驗(yàn)報(bào)告。M2.4非臨床綜述是對(duì)藥理學(xué)、藥動(dòng)學(xué)、毒理學(xué)研究的全面綜合性分析和重要評(píng)價(jià)，基于臨床試驗(yàn)方案介紹非臨床試驗(yàn)策略，包含對(duì)數(shù)據(jù)的解讀、試驗(yàn)結(jié)果的臨床相關(guān)性、與藥品質(zhì)量方面的關(guān)聯(lián)以及非臨床試驗(yàn)結(jié)果對(duì)藥物安全使用的提示(如用于說(shuō)明書)等，篇幅通常不超過(guò)30頁(yè)。M2.6非臨床總結(jié)是對(duì)非臨床藥理學(xué)、藥動(dòng)學(xué)、毒理學(xué)試驗(yàn)內(nèi)容和結(jié)果的逐項(xiàng)總結(jié)，應(yīng)提供非臨床數(shù)據(jù)的全面真實(shí)概況，篇幅建議一般不超過(guò)100~150頁(yè)。綜述基于總結(jié)，但其目的和內(nèi)容不同，綜述是對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行解讀和綜合評(píng)價(jià)，總結(jié)是概要且全面地展示數(shù)據(jù)[28]。
良好規(guī)范的申報(bào)資料將有助于提高審評(píng)質(zhì)量和效率，主要包括以下方面提請(qǐng)關(guān)注: ①M(fèi)2.4，M2.6等綜述性和總結(jié)性資料的撰寫應(yīng)言簡(jiǎn)意賅、專業(yè)規(guī)范、邏輯清晰、條理分明、依據(jù)充分，應(yīng)落腳于臨床試驗(yàn)方案和受試者保護(hù)。②M4非臨床試驗(yàn)報(bào)告應(yīng)詳細(xì)完整，應(yīng)包含受試物、試驗(yàn)設(shè)計(jì)/方法、結(jié)果數(shù)據(jù)、分析評(píng)價(jià)、試驗(yàn)機(jī)構(gòu)印章、試驗(yàn)人員簽名等信息，試驗(yàn)報(bào)告附件如個(gè)體數(shù)據(jù)、病理學(xué)檢查報(bào)告、毒代動(dòng)力學(xué)報(bào)告等均應(yīng)附上，外文報(bào)告翻譯應(yīng)規(guī)范。③非臨床研究資料內(nèi)容繁多，建議每個(gè)試驗(yàn)報(bào)告均分開(kāi)整理，并設(shè)置目錄、索引、有效鏈接，確保格式正確、內(nèi)容可讀。④溝通交流會(huì)議的演示文稿、申請(qǐng)資料應(yīng)規(guī)范詳細(xì)，建議附上已完成的試驗(yàn)報(bào)告(若有)，同時(shí)申請(qǐng)人應(yīng)提出值得關(guān)注的明確問(wèn)題，并進(jìn)行科學(xué)全面的自我評(píng)估和論證，認(rèn)真對(duì)待審評(píng)機(jī)構(gòu)的回復(fù)意見(jiàn)，正式申報(bào)時(shí)予以完善。
【案例14】某化學(xué)小分子拮抗劑，已在境外開(kāi)展Ⅰ/Ⅱ期臨床試驗(yàn)，現(xiàn)按化學(xué)藥品注冊(cè)分類1申請(qǐng)我國(guó)境內(nèi)Ⅰ期臨床試驗(yàn)，因未提交重復(fù)給藥毒性研究的最終完整試驗(yàn)報(bào)告，僅提交了試驗(yàn)報(bào)告草案，申請(qǐng)人需撤回重新申報(bào)。
【案例15】某中藥復(fù)方制劑，按中藥注冊(cè)分類3.1申請(qǐng)上市許可，因提交的單次給藥毒性試驗(yàn)和重復(fù)給藥毒性試驗(yàn)報(bào)告不完整，缺乏各項(xiàng)檢測(cè)指標(biāo)的具體結(jié)果數(shù)據(jù)，需要補(bǔ)充提交完整的試驗(yàn)報(bào)告。
【案例16】某CAR-T細(xì)胞，按治療用生物制品注冊(cè)分類1申請(qǐng)適應(yīng)證為“血液瘤”的Ⅰa期臨床試驗(yàn)，提交的藥理學(xué)、藥動(dòng)學(xué)及毒理學(xué)試驗(yàn)報(bào)告均無(wú)專題負(fù)責(zé)人、質(zhì)量保證負(fù)責(zé)人的簽名及日期，不符合《藥品注冊(cè)管理辦法》第十條及《藥物非臨床研究質(zhì)量管理規(guī)范》第三十二條、第三十三條關(guān)于藥品注冊(cè)申報(bào)資料的要求[1，29]。
4結(jié)語(yǔ)
藥物非臨床研究是支持藥物臨床試驗(yàn)和上市注冊(cè)申請(qǐng)的重要內(nèi)容，貫穿于新藥研發(fā)的全過(guò)程，具有可持續(xù)性和階段性的特點(diǎn)[30]。在藥物早期開(kāi)發(fā)階段，主要通過(guò)非臨床研究揭示候選分子的初步作用機(jī)制、藥物代謝及毒性特征; 在臨床試驗(yàn)申報(bào)階段，通過(guò)較為全面且規(guī)范的藥理毒理研究，以支持臨床試驗(yàn)申報(bào)和臨床試驗(yàn)設(shè)計(jì); 在支持大規(guī)模臨床試驗(yàn)階段，須進(jìn)一步完善藥理毒理研究，為后續(xù)臨床試驗(yàn)策略的制定提供證據(jù); 在上市申報(bào)階段，則需要進(jìn)行更全面的藥理毒理學(xué)評(píng)價(jià)，以闡明臨床試驗(yàn)中發(fā)現(xiàn)的安全性問(wèn)題發(fā)生機(jī)制或干預(yù)措施。安全性研究是新藥開(kāi)發(fā)和技術(shù)審評(píng)的重點(diǎn)，但非臨床有效性也不容忽視，應(yīng)權(quán)衡利弊，兼顧獲益和風(fēng)險(xiǎn)。非臨床研究應(yīng)基于科學(xué)，具體問(wèn)題具體分析，在藥物研發(fā)注冊(cè)過(guò)程中，鼓勵(lì)申請(qǐng)人與藥品監(jiān)管機(jī)構(gòu)保持高效溝通交流以盡早解決相關(guān)問(wèn)題。
綜上所述，在新藥研發(fā)注冊(cè)過(guò)程中，申請(qǐng)人需要根據(jù)相關(guān)法律法規(guī)及技術(shù)指導(dǎo)原則要求，基于非臨床研究的階段性，遵循藥物自身特點(diǎn)和臨床定位，逐步開(kāi)展和完善非臨床研究，整理和提交符合注冊(cè)申報(bào)要求的非臨床研究資料，以推動(dòng)藥物盡早進(jìn)入臨床研究和/或上市應(yīng)用。近年來(lái)，各類非臨床研究新技術(shù)不斷涌現(xiàn)，醫(yī)藥學(xué)術(shù)界、產(chǎn)業(yè)界及監(jiān)管機(jī)構(gòu)應(yīng)積極探索如人工智能、類器官、器官芯片等新技術(shù)、新方法在新藥非臨床研究與評(píng)價(jià)中的應(yīng)用前景，以不斷推動(dòng)新藥開(kāi)發(fā)與評(píng)價(jià)的高質(zhì)量發(fā)展。
參考文獻(xiàn)
詳見(jiàn) 《中國(guó)新藥雜志》 2025年 第34卷第20期
京公網(wǎng)安備11010802046783號(hào)
