關(guān)于分析方法驗(yàn)證線性考察是定量分析的基礎(chǔ)和必要條件，定量是基于呈一元一次方程的線性關(guān)系進(jìn)行的，除了需要考察相關(guān)系數(shù)以確定是否成線性，還必須考察回歸方程的截距問題，通常使用兩種方法，一種為Y軸截距絕對(duì)值與標(biāo)準(zhǔn)（100%）之比法，另一種為剩余標(biāo)準(zhǔn)差標(biāo)準(zhǔn)（100%）之比法，二種方法均能反應(yīng)截距的大小，對(duì)于含量應(yīng)該不大于2%，對(duì)于有關(guān)物質(zhì)和殘留溶劑應(yīng)該不大于25%（建議不大于15%更科學(xué)）。
有人對(duì)于截距的要求不是很理解，認(rèn)為只要測量線性的幾個(gè)點(diǎn)之間相關(guān)系數(shù)達(dá)到要求及成線性了，那在這范圍內(nèi)的檢測都應(yīng)該是準(zhǔn)確的，為什么要求截距呢？首先對(duì)于主物質(zhì)的含量，一般是做80%~120%之間的線性，要求截距不大于2%，這是因?yàn)楹康幕厥章蕵?biāo)準(zhǔn)一般是98%~102%，我們一般檢測的時(shí)候都用的是單點(diǎn)法，也就是默認(rèn)線性過原點(diǎn)，截距是0，峰面積與濃度成正比，例如標(biāo)準(zhǔn)品濃度是1mg/ml，峰面積是1000，那峰面積是1000的時(shí)候可以得出樣品的真實(shí)濃度是1.0mg/ml（如圖1的測定曲線），但如果真實(shí)的線性曲線截距不等于0而是100，標(biāo)準(zhǔn)品濃度是1mg/ml，峰面積是1100，那樣品峰面積1100的時(shí)候，如果用外標(biāo)法即單點(diǎn)法計(jì)算的時(shí)候濃度激素1.1mg/ml了（如圖1的真實(shí)曲線），但實(shí)際上樣品的濃度是1.0mg/ml（即用標(biāo)準(zhǔn)曲線法計(jì)算所得），誤差也就在1%左右，相對(duì)應(yīng)的截距占標(biāo)準(zhǔn)峰面積的1%，因此也就得出截距在2%之內(nèi)，那誤差也就在±2%之間，在含量標(biāo)準(zhǔn)要求范圍內(nèi)，回收率也是合格的，如果截距超過2%，則誤差就超過范圍了，那在檢測樣品的時(shí)候可能就會(huì)出現(xiàn)含量不合格、回收率達(dá)不到要求的現(xiàn)象，而實(shí)際上含量是合格的。如果截距不符合要求，不說明方法不能定量，只是不能采用常用的一個(gè)對(duì)照濃度進(jìn)行測定，需要采用多個(gè)濃度的標(biāo)準(zhǔn)曲線法進(jìn)行。同理對(duì)于有關(guān)物質(zhì)和殘留溶劑，也是同樣的道理。
圖1
一般情況下，我們都想要含量的線性的截距在2%范圍之內(nèi)，有關(guān)物質(zhì)和殘留溶劑的線性的截距在25%范圍之內(nèi)，那為什么有些方法中的截距會(huì)超呢？可能原因有兩種：首先是系統(tǒng)誤差比較大，基質(zhì)背景比較高或者儀器有污染導(dǎo)致，這時(shí)候可以把線性最低點(diǎn)加入線性中，一般可以把定量限這個(gè)點(diǎn)加入線性中，正常情況下可以把截距拉小；另一種可能是濃度太高，高濃度的時(shí)候峰面積已經(jīng)有過載的跡象，這時(shí)候需要將樣品濃度調(diào)小一些。
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