剛剛，國(guó)家藥品監(jiān)督管理局醫(yī)療器械技術(shù)審評(píng)中心發(fā)布《葡萄糖-6-磷酸脫氫酶檢測(cè)試劑注冊(cè)審查指導(dǎo)原則（征求意見稿）》，全文如下：
葡萄糖-6-磷酸脫氫酶檢測(cè)試劑注冊(cè)審查指導(dǎo)原則（征求意見稿）
本指導(dǎo)原則旨在指導(dǎo)注冊(cè)申請(qǐng)人對(duì)葡萄糖-6-磷酸脫氫酶檢測(cè)試劑注冊(cè)申報(bào)資料的準(zhǔn)備及撰寫，同時(shí)也為技術(shù)審評(píng)部門提供參考。
本指導(dǎo)原則是葡萄糖-6-磷酸脫氫酶檢測(cè)試劑的一般要求，申請(qǐng)人應(yīng)依據(jù)產(chǎn)品的具體特性確定其中內(nèi)容是否適用，若不適用，需具體闡述理由及相應(yīng)的科學(xué)依據(jù)，并依據(jù)產(chǎn)品的具體特性對(duì)注冊(cè)申報(bào)資料的內(nèi)容進(jìn)行充實(shí)和細(xì)化。
本指導(dǎo)原則是供注冊(cè)申請(qǐng)人和技術(shù)審評(píng)人員使用的指導(dǎo)性文件，但不包括審評(píng)審批所涉及的行政事項(xiàng)，亦不作為法規(guī)強(qiáng)制執(zhí)行，應(yīng)在遵循相關(guān)法規(guī)的前提下使用本指導(dǎo)原則。如果有能夠滿足相關(guān)法規(guī)要求的其他方法，也可以采用，但是需要提供詳細(xì)的研究資料和驗(yàn)證資料。
本指導(dǎo)原則是在現(xiàn)行法規(guī)和標(biāo)準(zhǔn)體系以及當(dāng)前認(rèn)知水平下制定的，隨著法規(guī)和標(biāo)準(zhǔn)的不斷完善，以及科學(xué)技術(shù)的不斷發(fā)展，本指導(dǎo)原則相關(guān)內(nèi)容也將適時(shí)進(jìn)行調(diào)整。
一、適用范圍
本指導(dǎo)原則適用于采用葡萄糖-6-磷酸底物法/速率法，對(duì)人靜脈全血樣本中的葡萄糖-6-磷酸脫氫酶（Glucose-6-Phosphate Dehydrogenase, G6PD）活性進(jìn)行體外定量檢測(cè)的試劑，用于遺傳性紅細(xì)胞葡萄糖-6-磷酸脫氫酶缺乏癥的輔助診斷。定性檢測(cè)方法可參照本指導(dǎo)原則，但應(yīng)根據(jù)產(chǎn)品特性確定其中具體內(nèi)容是否適用，如不適用，應(yīng)另行選擇符合自身方法學(xué)特性的技術(shù)要求或評(píng)價(jià)方法。
本指導(dǎo)原則適用于葡萄糖-6-磷酸脫氫酶活性檢測(cè)試劑注冊(cè)申請(qǐng)和變更注冊(cè)申請(qǐng)的情形。本指導(dǎo)原則針對(duì)相關(guān)產(chǎn)品注冊(cè)申報(bào)資料中的部分內(nèi)容進(jìn)行撰寫，其他未盡事宜應(yīng)當(dāng)符合《關(guān)于公布體外診斷試劑注冊(cè)申報(bào)資料要求和批準(zhǔn)證明文件格式的公告》等相關(guān)法規(guī)要求。
二、注冊(cè)審查要點(diǎn)
（一）監(jiān)管信息
1.產(chǎn)品名稱
產(chǎn)品名稱應(yīng)符合《體外診斷試劑注冊(cè)與備案管理辦法》及相關(guān)法規(guī)的要求，如葡萄糖-6-磷酸脫氫酶檢測(cè)試劑盒（葡萄糖-6-磷酸底物法）。
2.分類編碼
根據(jù)《體外診斷試劑分類規(guī)則》，該產(chǎn)品按照第三類體外診斷試劑管理，分類編碼為6480。
3.其他信息還包括產(chǎn)品列表、關(guān)聯(lián)文件、申報(bào)前與監(jiān)管機(jī)構(gòu)的聯(lián)系情況和溝通記錄以及符合性聲明等文件。
（二）綜述資料
綜述資料主要包括概述、產(chǎn)品描述、預(yù)期用途、申報(bào)產(chǎn)品上市歷史及其他需說明的內(nèi)容。建議申請(qǐng)人對(duì)以下幾方面內(nèi)容進(jìn)行著重介紹：
1.概述
明確葡萄糖-6-磷酸脫氫酶檢測(cè)試劑的通用名稱及確認(rèn)依據(jù)，明確產(chǎn)品的管理類別及分類編碼。
2.產(chǎn)品描述
詳述技術(shù)原理、產(chǎn)品主要研究結(jié)果的總結(jié)和評(píng)價(jià)、與同類和/或前代產(chǎn)品的比較等。與同類和/或前代產(chǎn)品的比較應(yīng)著重從技術(shù)原理、酶和底物等主要組成成分、預(yù)期用途、性能指標(biāo)、臨床應(yīng)用情況等方面明確申報(bào)產(chǎn)品與目前市場(chǎng)上已獲批準(zhǔn)的同類產(chǎn)品之間的主要區(qū)別。
3.預(yù)期用途
結(jié)合該類產(chǎn)品臨床使用的實(shí)際情況，預(yù)期用途可以表述為：用于體外定量檢測(cè)人靜脈全血樣本中的葡萄糖-6-磷酸脫氫酶活性，用于遺傳性紅細(xì)胞葡萄糖-6-磷酸脫氫酶缺乏癥的輔助診斷。具體預(yù)期用途應(yīng)與產(chǎn)品性能研究資料及臨床試驗(yàn)資料相對(duì)應(yīng)。
簡(jiǎn)述相關(guān)背景信息，如臨床適應(yīng)證及其發(fā)生率、分布情況，分析物的詳細(xì)介紹及其與臨床適應(yīng)證的關(guān)系，相關(guān)的臨床或?qū)嶒?yàn)室診斷方法等。
簡(jiǎn)述適用人群信息，如目標(biāo)患者/人群的信息。
（三）非臨床資料
1.產(chǎn)品技術(shù)要求及檢驗(yàn)報(bào)告
1.1產(chǎn)品技術(shù)要求
注冊(cè)申請(qǐng)人應(yīng)當(dāng)在原材料質(zhì)量和生產(chǎn)工藝穩(wěn)定的前提下，根據(jù)產(chǎn)品研制、前期評(píng)價(jià)等結(jié)果，依據(jù)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)、行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)及有關(guān)文獻(xiàn)資料，結(jié)合產(chǎn)品特性按照《醫(yī)療器械產(chǎn)品技術(shù)要求編寫指導(dǎo)原則》的要求編寫。如已有相應(yīng)的國(guó)家/行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)發(fā)布，則產(chǎn)品技術(shù)要求的相關(guān)要求不得低于上述標(biāo)準(zhǔn)要求。該類產(chǎn)品作為第三類體外診斷試劑，應(yīng)當(dāng)以附錄形式明確主要原材料以及生產(chǎn)工藝要求。
1.2檢驗(yàn)報(bào)告
如該類產(chǎn)品已有國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)品，技術(shù)要求中應(yīng)體現(xiàn)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)品的相關(guān)要求，并使用國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)品進(jìn)行檢驗(yàn)。
第三類體外診斷試劑應(yīng)當(dāng)提供三個(gè)不同生產(chǎn)批次產(chǎn)品的檢驗(yàn)報(bào)告。
可提交以下任一形式的檢驗(yàn)報(bào)告：
（1）申請(qǐng)人出具的自檢報(bào)告。
（2）委托有資質(zhì)的醫(yī)療器械檢驗(yàn)機(jī)構(gòu)出具的檢驗(yàn)報(bào)告。
2.分析性能評(píng)估資料
注冊(cè)申請(qǐng)人應(yīng)提交在符合質(zhì)量管理體系的環(huán)境下生產(chǎn)的試劑盒進(jìn)行的所有分析性能評(píng)估資料，包括具體研究方法、試驗(yàn)方案、試驗(yàn)數(shù)據(jù)、統(tǒng)計(jì)分析等詳細(xì)資料。應(yīng)在申報(bào)資料中描述分析性能評(píng)估相關(guān)背景信息，包括試驗(yàn)地點(diǎn)，采用的試劑名稱、規(guī)格和批號(hào)，儀器名稱和型號(hào)，試驗(yàn)樣本（樣本類型、來源、數(shù)量、處理方法、活性及確認(rèn)方式）等。
分析性能評(píng)估的試驗(yàn)方法可以參考國(guó)際或國(guó)內(nèi)有關(guān)體外診斷試劑性能評(píng)估的指導(dǎo)原則進(jìn)行，對(duì)于本類產(chǎn)品建議著重對(duì)以下分析性能進(jìn)行研究。
2.1樣本穩(wěn)定性
樣本穩(wěn)定性一般包括樣本各種實(shí)際運(yùn)輸及儲(chǔ)存（常溫、冷藏和冷凍）條件下的保存期限驗(yàn)證，以確認(rèn)樣本的保存條件及保存時(shí)間?？衫鋬霰４娴臉颖緫?yīng)對(duì)凍融次數(shù)進(jìn)行合理驗(yàn)證。
2.2適用樣本類型
如試劑適用多種抗凝劑，可采用一定數(shù)量同源樣本，通過比對(duì)試驗(yàn)的方法，驗(yàn)證各種抗凝劑的適用性。
2.3校準(zhǔn)品的量值溯源和質(zhì)控品的賦值（如適用）
應(yīng)明確申報(bào)產(chǎn)品適用的校準(zhǔn)品和質(zhì)控品。
如申報(bào)產(chǎn)品包含校準(zhǔn)品，需提供校準(zhǔn)品的量值溯源研究資料。詳述申報(bào)產(chǎn)品的校準(zhǔn)方法。
如申報(bào)產(chǎn)品包括質(zhì)控品，應(yīng)當(dāng)提交在所有適用機(jī)型上進(jìn)行質(zhì)控品賦值和驗(yàn)證的資料。
2.4正確度
正確度的評(píng)價(jià)包括使用參考物質(zhì)的方法學(xué)比對(duì)、回收試驗(yàn)、使用參考物質(zhì)的正確度評(píng)價(jià)，企業(yè)可根據(jù)實(shí)際情況選擇合理方法進(jìn)行研究。
2.4.1方法學(xué)比對(duì)
采用參考測(cè)量程序或國(guó)內(nèi)/國(guó)際普遍認(rèn)為質(zhì)量較好的同類試劑作為對(duì)比方法，與擬申報(bào)試劑同時(shí)檢測(cè)一批臨床樣本，通過兩者的比對(duì)研究和偏倚估計(jì)，進(jìn)行申報(bào)試劑的正確度評(píng)價(jià)。
臨床樣本的濃度水平應(yīng)覆蓋申報(bào)試劑的測(cè)量區(qū)間。在性能建立時(shí)，建議對(duì)每個(gè)樣本重復(fù)檢測(cè)，以平均值或中位數(shù)進(jìn)行回歸分析，并評(píng)價(jià)醫(yī)學(xué)決定水平或參考區(qū)間下限濃度的偏倚。
2.4.2回收試驗(yàn)
如可獲得標(biāo)準(zhǔn)溶液、標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)或分析物純品，可采用回收試驗(yàn)進(jìn)行正確度評(píng)價(jià)。
將標(biāo)準(zhǔn)溶液、標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)或分析物純品加入臨床樣本中，配制成回收樣品，進(jìn)行檢測(cè)。標(biāo)準(zhǔn)溶液、標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)的體積與臨床樣本的體積比應(yīng)不會(huì)產(chǎn)生基質(zhì)的變化，一般加入體積不超過總體積的10%。
檢測(cè)至少3個(gè)水平的回收樣品，代表試劑測(cè)量區(qū)間內(nèi)的高、中、低濃度，其中應(yīng)包括醫(yī)學(xué)決定水平或參考區(qū)間下限附近的濃度。每個(gè)濃度應(yīng)進(jìn)行多次重復(fù)檢測(cè)，采用檢測(cè)結(jié)果平均值計(jì)算回收率。
2.4.3使用參考物質(zhì)的正確度評(píng)價(jià)
推薦的參考物質(zhì)包括：具有互換性的有證參考物質(zhì)，公認(rèn)的參考品、標(biāo)準(zhǔn)品，參考測(cè)量程序賦值的臨床樣本。不可采用產(chǎn)品校準(zhǔn)品、申報(bào)試劑檢測(cè)系統(tǒng)定值的質(zhì)控品進(jìn)行正確度評(píng)價(jià)。
建議采用2～3個(gè)水平的參考物質(zhì)，代表試劑測(cè)量區(qū)間內(nèi)的不同濃度，其中應(yīng)包括醫(yī)學(xué)決定水平或參考區(qū)間下限附近的濃度。進(jìn)行多次重復(fù)檢測(cè)，采用檢測(cè)結(jié)果平均值與參考量值計(jì)算偏倚。
2.5精密度
應(yīng)根據(jù)各測(cè)量條件對(duì)檢測(cè)結(jié)果影響程度的分析，設(shè)計(jì)合理的精密度試驗(yàn)方案進(jìn)行評(píng)價(jià)，包括重復(fù)性、實(shí)驗(yàn)室內(nèi)精密度、實(shí)驗(yàn)室間精密度和批間精密度，應(yīng)制定合理的精密度評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)，如標(biāo)準(zhǔn)差或變異系數(shù)等。
精密度研究用樣本應(yīng)為臨床樣本或其混合物，設(shè)置多個(gè)樣本濃度。
檢出限水平樣本，檢出率應(yīng)≥95%（n≥20）。
中/高濃度水平樣本，檢出率應(yīng)為100%（n≥20），CV≤5%。
2.6試劑空白
2.6.1試劑空白吸光度
檢測(cè)空白樣本（如純化水、生理鹽水、零值校準(zhǔn)液），重復(fù)多次測(cè)定，取均值作為試劑空白吸光度值。
2.6.2試劑空白吸光度變化率
檢測(cè)空白樣本，重復(fù)多次測(cè)定，計(jì)算每分鐘吸光度變化值，取均值作為試劑空白吸光度變化率。
2.7空白限、檢出限、定量限
試劑對(duì)樣本濃度下限的檢出能力指標(biāo)包括空白限（LoB）、檢出限（LoD）及定量限（LoQ）。申請(qǐng)人應(yīng)根據(jù)產(chǎn)品的具體情況選擇適用的方法進(jìn)行檢出能力的研究，可
參考《定量檢測(cè)體外診斷試劑分析性能評(píng)估注冊(cè)審查指導(dǎo)原則》進(jìn)行空白限、檢出限以及定量限的建立及驗(yàn)證研究。
2.8分析特異性
2.8.1交叉反應(yīng)
交叉反應(yīng)應(yīng)當(dāng)考慮結(jié)構(gòu)類似物、合并用藥及主要代謝物的情況，對(duì)患者樣本中常見的底物葡萄糖-6-磷酸的結(jié)構(gòu)類似物進(jìn)行交叉反應(yīng)研究，如葡萄糖、果糖。
2.8.2干擾研究
應(yīng)根據(jù)所采集樣本類型，選擇適用的干擾物質(zhì)進(jìn)行研究。說明樣本的制備方法及干擾研究的評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)，確定可接受的干擾物質(zhì)的極限濃度。
采用至少兩個(gè)分析物濃度水平的樣本進(jìn)行試驗(yàn)，應(yīng)包括檢出限附近濃度、醫(yī)學(xué)決定水平或參考區(qū)間下限附近濃度。建議在每種干擾物質(zhì)的潛在最大濃度（“最差條件”）下進(jìn)行試驗(yàn)，應(yīng)至少包括下列可能的干擾物質(zhì)。
內(nèi)源性干擾物質(zhì)：血紅蛋白，甘油三酯，含銅化合物如氯化銅、硫酸銅等。
外源性干擾物質(zhì)：維生素K、谷胱甘肽、抗壞血酸鈉等。
2.9線性區(qū)間及測(cè)量區(qū)間
2.9.1線性區(qū)間
線性區(qū)間的研究，需采用高值和零濃度/低值樣本配制一系列不同濃度的樣本。當(dāng)建立試劑的線性區(qū)間時(shí)，需配制較預(yù)期線性區(qū)間更寬的9個(gè)左右不同濃度的樣本（不包括零濃度樣本），每個(gè)樣本進(jìn)行多次重復(fù)檢測(cè)，根據(jù)可接受線性偏差和各濃度的重復(fù)性，確定檢測(cè)次數(shù)。采用重復(fù)檢測(cè)均值和預(yù)期值進(jìn)行直線回歸分析，建議采用加權(quán)最小二乘回歸等分析方法，提供散點(diǎn)圖、線性回歸方程、線性相關(guān)系數(shù)（r）及線性偏差，判斷結(jié)果是否滿足可接受標(biāo)準(zhǔn)。
當(dāng)驗(yàn)證試劑的線性區(qū)間時(shí)，需配制覆蓋整個(gè)線性區(qū)間的至少5個(gè)不同濃度的樣本，每個(gè)樣本至少重復(fù)檢測(cè)2次。
2.9.2測(cè)量區(qū)間
在測(cè)量區(qū)間內(nèi)，臨床樣本在未經(jīng)稀釋、濃縮，或非常規(guī)測(cè)量程序中步驟的其他前處理情況下，檢測(cè)結(jié)果的線性偏差、不精密度和偏倚均在可接受范圍內(nèi)。
如對(duì)超出測(cè)量區(qū)間濃度的樣本可進(jìn)行稀釋后檢測(cè)，應(yīng)研究合適的稀釋液和稀釋倍數(shù)，從而確定試劑的可報(bào)告區(qū)間。
2.10企業(yè)參考品驗(yàn)證
根據(jù)主要原材料研究資料中的企業(yè)參考品設(shè)置情況，采用三批產(chǎn)品對(duì)企業(yè)參考品進(jìn)行檢測(cè)并提供詳細(xì)的實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)。
2.11反應(yīng)體系研究
2.11.1反應(yīng)條件確定
申請(qǐng)人應(yīng)考慮反應(yīng)溫度、反應(yīng)時(shí)間、終止反應(yīng)時(shí)間、信號(hào)采集時(shí)間、儀器型號(hào)等條件對(duì)產(chǎn)品性能的影響，通過試驗(yàn)確定上述條件的最佳組合。
2.11.2反應(yīng)體系中試劑及樣品加樣方式、加樣量確定
申請(qǐng)人應(yīng)考慮試劑及樣品加樣方式、加樣量對(duì)產(chǎn)品檢測(cè)結(jié)果的影響，通過試驗(yàn)確定最佳的加樣方式及加樣量。
如靜脈全血樣本需其他必要方法進(jìn)行處理后方可用于最終檢測(cè)，申請(qǐng)人應(yīng)對(duì)處理方法進(jìn)行研究，通過試驗(yàn)確定最終選擇的處理方法。
3.穩(wěn)定性研究資料
申請(qǐng)人可根據(jù)實(shí)際需要選擇合理的穩(wěn)定性研究方案。穩(wěn)定性研究資料應(yīng)包括研究方法的確定依據(jù)、具體的實(shí)施方案、詳細(xì)的研究數(shù)據(jù)以及結(jié)論。
3.1實(shí)時(shí)穩(wěn)定性研究
提交至少三批申報(bào)產(chǎn)品在實(shí)際儲(chǔ)存條件下保存至成品有效期后的研究資料。明確儲(chǔ)存的環(huán)境條件及有效期。
3.2使用穩(wěn)定性
提交申報(bào)產(chǎn)品實(shí)際使用期間穩(wěn)定性的研究資料，應(yīng)包括所有組成成分的開封穩(wěn)定性。適用時(shí)應(yīng)提交復(fù)溶穩(wěn)定性、機(jī)載穩(wěn)定性及凍融次數(shù)研究資料等。明確產(chǎn)品使用的溫度、濕度條件等。
3.3運(yùn)輸穩(wěn)定性
提交申報(bào)產(chǎn)品可在特定或者預(yù)期的條件下運(yùn)輸?shù)难芯抠Y料，明確產(chǎn)品的包裝方式以及暴露的最差運(yùn)輸條件，明確產(chǎn)品正確運(yùn)輸?shù)沫h(huán)境條件（如溫度、濕度、光照和機(jī)械保護(hù)等）。
4.參考區(qū)間
詳述研究方法或依據(jù)，明確研究采用的樣本類型、來源及信息、詳細(xì)的試驗(yàn)資料、統(tǒng)計(jì)方法等。使用適用的統(tǒng)計(jì)學(xué)方法確定擬申報(bào)試劑的參考區(qū)間，可參考《體外診斷試劑參考區(qū)間確定注冊(cè)審查指導(dǎo)原則》進(jìn)行研究。
靜脈全血樣本的選擇應(yīng)考慮納入不同人群，考慮不同年齡（新生兒、兒童、成人）、性別、地域等因素的影響，盡可能考慮樣本來源的多樣性、代表性。
5.其他資料
5.1主要原材料研究資料
此類產(chǎn)品的主要原材料包括葡萄糖-6-磷酸脫氫酶（G6PD）、葡萄糖-6-磷酸(Glucose-6-Phosphate,G6P)、煙酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸(Nicotinamide Adenine Dinucletide Phosphate，NADP)、校準(zhǔn)品、質(zhì)控品、企業(yè)參考品等。
應(yīng)提供主要原材料的選擇與來源、制備過程、質(zhì)量控制標(biāo)準(zhǔn)等相關(guān)研究資料。如主要原材料為企業(yè)自制，應(yīng)提供其詳細(xì)的制備、鑒定和質(zhì)量控制過程；如主要原材料源于外購(gòu)，應(yīng)提供資料包括：選擇該原材料的依據(jù)及對(duì)比篩選試驗(yàn)資料、供應(yīng)商提供的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)、出廠檢測(cè)報(bào)告以及該原材料到貨后的入廠檢驗(yàn)報(bào)告。
5.1.1葡萄糖-6-磷酸脫氫酶
應(yīng)提交原材料的選擇過程，包括外觀、酶活性、純度以及功能性試驗(yàn)等資料，明確供應(yīng)商及質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)。
5.1.2葡萄糖-6-磷酸和煙酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸
應(yīng)提交原材料的選擇過程，包括外觀、純度、濃度以及功能性試驗(yàn)等資料，明確供應(yīng)商及質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)。
5.1.3其他主要原材料
固相載體（如微孔板）、銅試劑等其他主要原材料，應(yīng)提交選擇后的驗(yàn)證資料。
5.1.4校準(zhǔn)品和質(zhì)控品
詳述校準(zhǔn)品、質(zhì)控品的制備過程，明確校準(zhǔn)品、質(zhì)控品的成分、基質(zhì)及各水平濃度。校準(zhǔn)品、質(zhì)控品基質(zhì)應(yīng)與適用樣本類型相同或相似。質(zhì)控品建議至少包括低值和高值兩個(gè)濃度水平。
5.1.5企業(yè)參考品
應(yīng)提交企業(yè)參考品的原料來源、選擇、制備、濃度確認(rèn)方法/試劑等相關(guān)研究資料并對(duì)企業(yè)參考品進(jìn)行充分驗(yàn)證。企業(yè)參考品建議采用真實(shí)樣本，如使用其他類型樣本，應(yīng)證明其合理性，基質(zhì)應(yīng)與待測(cè)樣本相同或相似。
該類產(chǎn)品的企業(yè)參考品一般包括：靈敏度參考品、特異性參考品、檢出限參考品、重復(fù)性參考品、線性參考品等，申請(qǐng)人應(yīng)根據(jù)產(chǎn)品特性及適用情況科學(xué)設(shè)置。
靈敏度參考品：選擇不同來源的樣本，并設(shè)置不同濃度水平。
特異性參考品：設(shè)置不含被測(cè)物的樣本及可能的干擾（如溶血、脂血、黃疸）和交叉樣本。
檢出限參考品：設(shè)置系列稀釋樣本，其中應(yīng)包含檢出限水平。
重復(fù)性參考品：設(shè)置至少兩個(gè)水平的樣本，應(yīng)包括正常值、異常低值，建議包含檢出限水平。
線性參考品：建議設(shè)置多個(gè)濃度水平，應(yīng)盡量覆蓋線性區(qū)間，濃度間隔均勻。
5.2生產(chǎn)工藝研究資料
5.2.1產(chǎn)品基本反應(yīng)原理介紹。
5.2.2介紹產(chǎn)品主要生產(chǎn)工藝，可用流程圖結(jié)合文字的方式表述并標(biāo)明關(guān)鍵工藝及質(zhì)控步驟。
5.2.3提交主要生產(chǎn)工藝的確定及優(yōu)化研究資料。主要生產(chǎn)工藝包括：工作液配制、半成品檢定、分裝和包裝等。配制工作液的各種原材料及其配比應(yīng)符合要求，原材料應(yīng)混合均勻，配制過程應(yīng)對(duì)關(guān)鍵參數(shù)進(jìn)行有效控制。
（四）臨床評(píng)價(jià)資料
臨床試驗(yàn)應(yīng)滿足《體外診斷試劑臨床試驗(yàn)技術(shù)指導(dǎo)原則》的要求，如相關(guān)法規(guī)、文件有更新，臨床試驗(yàn)應(yīng)符合更新后的要求。下文針對(duì)“G6PD缺乏癥的輔助診斷”預(yù)期用途臨床試驗(yàn)中關(guān)注的重點(diǎn)問題進(jìn)行闡述。
1. 臨床試驗(yàn)機(jī)構(gòu)
申請(qǐng)人應(yīng)根據(jù)產(chǎn)品特點(diǎn)及預(yù)期用途，綜合不同地區(qū)人種和流行病學(xué)背景等因素，選擇不少于3家（含3家）符合法規(guī)要求的經(jīng)備案的臨床試驗(yàn)機(jī)構(gòu)開展臨床試驗(yàn)。
2. 臨床試驗(yàn)適用人群和樣本類型
根據(jù)產(chǎn)品預(yù)期用途，臨床試驗(yàn)適用人群包括成人、兒童和新生兒患者。臨床試驗(yàn)應(yīng)入組具有G6PD缺乏癥癥狀和/或體征等的疑似患者，以及其他需要進(jìn)行相關(guān)檢測(cè)的人群，如：急性溶血性貧血患者和新生兒高膽紅素血癥患者，同時(shí)，納入一定數(shù)量的需要進(jìn)行鑒別診斷的其他疾病的患者，如：新生兒期常見ABO溶血癥患者和其他自身免疫性溶血性貧血患者等。
臨床試驗(yàn)所用樣本一般為靜脈全血。臨床樣本的采集、處理和保存等應(yīng)分別滿足申報(bào)產(chǎn)品和對(duì)比試劑說明書的相關(guān)要求。
3. 臨床試驗(yàn)對(duì)比方法
該類產(chǎn)品已有同類產(chǎn)品上市，應(yīng)選擇已上市同類產(chǎn)品作為對(duì)比試劑，對(duì)比試劑在預(yù)期用途、適用人群、樣本類型、檢測(cè)方法學(xué)和檢測(cè)性能等方面應(yīng)與申報(bào)產(chǎn)品具有較好的可比性。
4. 最低樣本量
臨床試驗(yàn)樣本量應(yīng)采用適當(dāng)?shù)慕y(tǒng)計(jì)學(xué)方法進(jìn)行估算，并詳細(xì)描述所使用統(tǒng)計(jì)方法及各參數(shù)的確定依據(jù)。
建議采用單組目標(biāo)值法分別估算異常范圍樣本（陽性）和正常范圍樣本（陰性）的例數(shù)，同時(shí)考慮脫落情況，估算最低樣本總量。陽性符合率和陰性符合率的目標(biāo)值（臨床可接受的最低標(biāo)準(zhǔn)）建議均不低于90%。
同時(shí)，線性范圍內(nèi)的樣本應(yīng)具有足夠例數(shù)，并覆蓋各濃度范圍，以便對(duì)申報(bào)產(chǎn)品的定量檢測(cè)性能進(jìn)行充分驗(yàn)證。
如果不同人群的參考區(qū)間具有顯著差異，在總樣本量滿足要求的前提下，不同參考區(qū)間的人群應(yīng)分別滿足統(tǒng)計(jì)學(xué)要求，可采用抽樣調(diào)查的方法進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)估算。
5.統(tǒng)計(jì)分析和數(shù)據(jù)匯總表
5.1應(yīng)選擇合適的統(tǒng)計(jì)方法對(duì)臨床試驗(yàn)結(jié)果進(jìn)行分析。針對(duì)定量分析，一般應(yīng)進(jìn)行回歸分析、相關(guān)分析和Bland-Altman分析等，分析結(jié)果應(yīng)滿足臨床可接受標(biāo)準(zhǔn)。針對(duì)定性統(tǒng)計(jì)分析，一般以2×2表的形式對(duì)結(jié)果進(jìn)行總結(jié)，并據(jù)此計(jì)算陰性符合率、陽性符合率、總符合率及其95%置信區(qū)間。如果不同人群的參考區(qū)間存在差異，應(yīng)分別進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。
5.2結(jié)果差異樣本的驗(yàn)證
在數(shù)據(jù)收集過程中，對(duì)于兩種試劑檢測(cè)結(jié)果不一致的樣本，可采用合理方法進(jìn)行復(fù)核，并結(jié)合臨床診斷和實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)結(jié)果等對(duì)差異原因進(jìn)行分析。
5.3 臨床試驗(yàn)數(shù)據(jù)匯總表應(yīng)以列表方式表示，包括申報(bào)產(chǎn)品的結(jié)果、對(duì)比試劑的檢測(cè)結(jié)果、年齡、性別和臨床背景信息等。
6. 臨床試驗(yàn)方案
各臨床試驗(yàn)機(jī)構(gòu)的方案應(yīng)基本一致，且保證在整個(gè)臨床試驗(yàn)過程中遵循預(yù)定的方案，不可隨意改動(dòng)。整個(gè)試驗(yàn)過程應(yīng)在臨床試驗(yàn)機(jī)構(gòu)的實(shí)驗(yàn)室內(nèi)并由該實(shí)驗(yàn)室的技術(shù)人員操作完成，申報(bào)單位的技術(shù)人員除進(jìn)行必要的技術(shù)指導(dǎo)外，不得隨意干涉實(shí)驗(yàn)進(jìn)程。
試驗(yàn)方案應(yīng)確定嚴(yán)格的入選/排除標(biāo)準(zhǔn)，任何已入選的樣本被排除出臨床試驗(yàn)都應(yīng)記錄在案并明確說明原因。在試驗(yàn)操作過程和結(jié)果判定時(shí)，應(yīng)采用盲法以保證試驗(yàn)結(jié)果的客觀性。各臨床試驗(yàn)機(jī)構(gòu)選用的對(duì)比試劑應(yīng)保持一致，以便進(jìn)行合理的統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。
7. 臨床試驗(yàn)小結(jié)和報(bào)告
臨床試驗(yàn)小結(jié)和報(bào)告中應(yīng)對(duì)試驗(yàn)的整體設(shè)計(jì)及各個(gè)關(guān)鍵點(diǎn)給予清晰、完整的闡述，應(yīng)該對(duì)整個(gè)臨床試驗(yàn)實(shí)施過程、結(jié)果分析、結(jié)論等進(jìn)行條理分明的描述，并應(yīng)包括必要的數(shù)據(jù)和統(tǒng)計(jì)分析方法。
（五）產(chǎn)品說明書和標(biāo)簽樣稿
產(chǎn)品說明書應(yīng)滿足《體外診斷試劑說明書編寫指導(dǎo)原則》的要求，產(chǎn)品說明書的所有內(nèi)容均應(yīng)與申請(qǐng)人提交的注冊(cè)申報(bào)資料的相關(guān)研究結(jié)果保持一致。下面對(duì)該類產(chǎn)品說明書的重點(diǎn)內(nèi)容進(jìn)行闡述。
1.【預(yù)期用途】應(yīng)至少包括以下幾部分內(nèi)容：
1.1本產(chǎn)品用于體外定量檢測(cè)人靜脈全血樣本中G6PD的活性。
1.2本產(chǎn)品用于遺傳性紅細(xì)胞G6PD缺乏癥的輔助診斷。檢測(cè)結(jié)果僅代表對(duì)患者G6PD活性的檢測(cè)，僅供臨床醫(yī)生參考，不能作為G6PD缺乏癥的唯一依據(jù)，臨床醫(yī)生應(yīng)結(jié)合患者其他診斷信息對(duì)檢測(cè)結(jié)果進(jìn)行綜合判斷。
1.3介紹G6PD缺乏癥相關(guān)的臨床背景信息及實(shí)驗(yàn)室診斷方法等，介紹被測(cè)物的相關(guān)情況。
2.【檢驗(yàn)原理】
詳細(xì)說明檢驗(yàn)原理、方法，必要時(shí)可采用公式或圖示方法描述。
3.【主要組成成分】
3.1說明試劑盒所含組分的名稱、數(shù)量、裝量、各組分主要成分的比例或濃度等信息。
3.2明確說明不同批號(hào)試劑盒中各組分是否可以互換。
3.3如試劑盒內(nèi)包含校準(zhǔn)品和/或質(zhì)控品，應(yīng)明確其主要組成成分。校準(zhǔn)品應(yīng)注明定值及其溯源性，質(zhì)控品應(yīng)注明靶值和靶值范圍，如靶值范圍為批特異，可注明批特異，并附單獨(dú)的靶值。
3.4如試劑盒中包含耗材，應(yīng)列明耗材名稱、數(shù)量等信息，如微孔反應(yīng)板等。
3.5對(duì)于試劑盒中不包含，但對(duì)檢測(cè)必需的試劑如單獨(dú)注冊(cè)的校準(zhǔn)品/質(zhì)控品、清洗液等，應(yīng)列明各試劑的產(chǎn)品名稱、注冊(cè)人（備案人）、貨號(hào)及其注冊(cè)證編號(hào)（備案編號(hào)）。
4.【適用儀器】
明確可適用的生化分析儀及其型號(hào)。
5.【樣本要求】
重點(diǎn)明確以下內(nèi)容：
5.1明確適用的樣本類型。
5.2詳述樣本的采集方法，應(yīng)結(jié)合臨床需要并參照相關(guān)共識(shí)/規(guī)程推薦的采樣要求。明確樣本收集過程中的注意事項(xiàng)，如采樣部位、采樣時(shí)間等。明確采血管或抗凝劑要求。
5.3詳述樣本的保存方法，明確保存條件及保存期限。明確冷藏/冷凍樣本檢測(cè)前是否需恢復(fù)室溫。明確冷凍樣本的凍融次數(shù)。
5.4若特定樣本需進(jìn)一步處理后使用，需明確。
6.【檢驗(yàn)方法】
詳細(xì)說明試驗(yàn)操作的各個(gè)步驟，包括：
6.1明確試劑準(zhǔn)備及配制方法、注意事項(xiàng)。
6.2詳述樣本加樣方式。
6.3明確樣本和試劑各組分的用量體積。
6.4明確反應(yīng)步驟、反應(yīng)體系和參數(shù)設(shè)置。根據(jù)方法學(xué)，詳細(xì)描述反應(yīng)步驟和各反應(yīng)步驟所需試驗(yàn)條件，如反應(yīng)溫度、反應(yīng)時(shí)間、測(cè)定主/副波長(zhǎng)、測(cè)定方法、反應(yīng)類型、反應(yīng)方向等以及試驗(yàn)過程中的注意事項(xiàng)。
6.5校準(zhǔn)：明確校準(zhǔn)品的使用方法、注意事項(xiàng)、校準(zhǔn)曲線的繪制（如適用）。
6.6質(zhì)量控制：明確質(zhì)控品的使用方法、對(duì)質(zhì)控結(jié)果的必要解釋以及推薦的質(zhì)控周期等；建議在本部分注明以下字樣：如果質(zhì)控結(jié)果與預(yù)期不符，提示檢測(cè)結(jié)果不可靠，不應(yīng)出具檢測(cè)報(bào)告。如質(zhì)控不合格應(yīng)提供相關(guān)的解決方案。
6.7檢驗(yàn)結(jié)果的計(jì)算：詳述檢驗(yàn)結(jié)果的計(jì)算方法，明確檢測(cè)結(jié)果的單位。
7.【參考區(qū)間】
明確所有適用樣本類型的參考區(qū)間，簡(jiǎn)要說明建立和驗(yàn)證參考區(qū)間的基本信息，包括：樣本量、人群特征（如性別、年齡、種族等）和采用的統(tǒng)計(jì)學(xué)方法。建議注明以下字樣“由于地理、人種、性別及年齡等差異，建議各實(shí)驗(yàn)室建立自己的參考區(qū)間”。
8.【檢驗(yàn)結(jié)果的解釋】
8.1依據(jù)參考區(qū)間對(duì)檢測(cè)結(jié)果進(jìn)行解釋說明。說明在何種情況下需要進(jìn)行復(fù)測(cè)或確認(rèn)試驗(yàn)。說明可能對(duì)試驗(yàn)結(jié)果產(chǎn)生影響的因素。
8.2如需對(duì)超出線性上限的樣本進(jìn)行稀釋檢測(cè)，應(yīng)明確稀釋方法、稀釋液、最大稀釋倍數(shù)。
9.【檢驗(yàn)方法局限性】
9.1本產(chǎn)品檢測(cè)結(jié)果僅供臨床參考，不應(yīng)作為臨床診治的唯一依據(jù)，對(duì)患者的臨床診斷應(yīng)結(jié)合其癥狀/體征、病史、家族遺傳史、流行病學(xué)、其他實(shí)驗(yàn)室檢查等信息綜合考慮。
9.2有關(guān)假陰性結(jié)果的可能性分析
9.2.1葡萄糖-6-磷酸脫氫酶缺乏癥是X連鎖不完全顯性遺傳疾病，女性雜合子檢出率低，檢測(cè)結(jié)果位于切值附近時(shí)，女性雜合子檢測(cè)結(jié)果可能不準(zhǔn)確。
9.2.2內(nèi)源性熒光可能影響葡萄糖-6-磷酸脫氫酶活性檢測(cè)。
9.2.3如患者輸血后立即測(cè)定葡萄糖-6-磷酸脫氫酶酶活性，可能無法真實(shí)反映個(gè)人情況，建議2周后采血復(fù)查。
9.3有關(guān)假陽性結(jié)果的可能性分析
標(biāo)本儲(chǔ)存環(huán)境溫度升高將增大葡萄糖-6-磷酸脫氫酶假陽性檢測(cè)結(jié)果的風(fēng)險(xiǎn)，應(yīng)在說明書要求的溫度條件下進(jìn)行檢測(cè)。
9.4部分強(qiáng)陽性（葡萄糖-6-磷酸脫氫酶嚴(yán)重缺乏者）的樣本，可能超出儀器及試劑的可檢測(cè)的最低檢出限，檢測(cè)結(jié)果可能出現(xiàn)0或負(fù)數(shù)。
10.【產(chǎn)品性能指標(biāo)】
10.1重點(diǎn)概述下列指標(biāo)：準(zhǔn)確度，試劑空白吸光度，空白限、檢出限、定量限，精密度，線性區(qū)間，特異性（交叉反應(yīng)、干擾試驗(yàn)）等。依據(jù)研究資料詳述性能指標(biāo)，簡(jiǎn)述研究方法、研究結(jié)論。
10.2特異性研究結(jié)果應(yīng)量化表示，明確可接受的交叉物質(zhì)、干擾物質(zhì)的最高限值，禁用輕度、嚴(yán)重等模糊表述。如未進(jìn)行相關(guān)研究也應(yīng)提供相關(guān)警示說明。
10.3概括描述臨床評(píng)價(jià)的方法和結(jié)果。
11.【注意事項(xiàng)】應(yīng)至少包括以下內(nèi)容：
11.1本產(chǎn)品僅用于體外診斷。
11.2采用不同方法學(xué)的試劑檢測(cè)所得結(jié)果不應(yīng)直接相互比較，以免造成錯(cuò)誤的醫(yī)學(xué)解釋。
11.3有關(guān)人源組分的警告（如適用），如：試劑盒內(nèi)的質(zhì)控品、校準(zhǔn)品或其他人源組分，雖已經(jīng)通過了HBs-Ag、HIV1/2-Ab、HCV-Ab等項(xiàng)目的檢測(cè)，但截至目前，沒有任何一項(xiàng)檢測(cè)可以確保絕對(duì)安全，故仍應(yīng)將這些組分作為潛在傳染源對(duì)待。
11.4其他有關(guān)葡萄糖-6-磷酸脫氫酶活性檢測(cè)的注意事項(xiàng)。
三、參考文獻(xiàn)
[1] 國(guó)家市場(chǎng)監(jiān)督管理局.體外診斷試劑注冊(cè)與備案管理辦法:國(guó)家市場(chǎng)監(jiān)督管理總局令第48號(hào)[Z].
[2] 國(guó)家藥品監(jiān)督管理局.關(guān)于公布體外診斷試劑注冊(cè)申報(bào)資料要求和批準(zhǔn)證明文件格式的公告:國(guó)家藥品監(jiān)督管理局公告2021年第122號(hào)[Z].
[3] 國(guó)家藥品監(jiān)督管理局醫(yī)療器械技術(shù)審評(píng)中心.定量檢測(cè)體外診斷試劑分析性能評(píng)估注冊(cè)審查指導(dǎo)原則:國(guó)家藥品監(jiān)督管理局醫(yī)療器械技術(shù)審評(píng)中心通告2022年第32號(hào)[Z].
[4] 國(guó)家藥品監(jiān)督管理局.體外診斷試劑臨床試驗(yàn)技術(shù)指導(dǎo)原則:國(guó)家藥品監(jiān)督管理局通告2021年第72號(hào)[Z].
[5] 國(guó)家藥品監(jiān)督管理局醫(yī)療器械技術(shù)審評(píng)中心.體外診斷試劑參考區(qū)間確定注冊(cè)審查指導(dǎo)原則:國(guó)家藥品監(jiān)督管理局醫(yī)療器械技術(shù)審評(píng)中心通告2022年第36號(hào)[Z].
京公網(wǎng)安備11010802046783號(hào)
