目的：闡述無(wú)菌生產(chǎn)環(huán)境監(jiān)測(cè)重點(diǎn)關(guān)注內(nèi)容，分析常見(jiàn)檢查缺陷，以期為無(wú)菌藥品生產(chǎn)企業(yè)提升環(huán)境監(jiān)測(cè)能力提供參考，同時(shí)為藥品生產(chǎn)質(zhì)量管理規(guī)范（GMP）無(wú)菌檢查環(huán)境監(jiān)測(cè)提供檢查思路。方法：對(duì)無(wú)菌藥品生產(chǎn)環(huán)境監(jiān)測(cè)法規(guī)及其內(nèi)容進(jìn)行概述，對(duì)無(wú)菌檢查時(shí)環(huán)境控制、空調(diào)凈化系統(tǒng)確認(rèn)常見(jiàn)易混淆檢查點(diǎn)進(jìn)行分析與闡述，提出全生命周期環(huán)境監(jiān)測(cè)程序的建立和實(shí)施重點(diǎn)，并基于 GMP 無(wú)菌檢查視角歸納環(huán)境監(jiān)測(cè)典型缺陷項(xiàng)目。結(jié)果：環(huán)境監(jiān)測(cè)與環(huán)境控制、空調(diào)凈化系統(tǒng)確認(rèn)對(duì)應(yīng)著不同的法規(guī)要求且均有各自監(jiān)測(cè)重點(diǎn)，從檢查視角看，環(huán)境監(jiān)測(cè)典型缺陷涵蓋環(huán)境監(jiān)測(cè)程序建立不完善、風(fēng)險(xiǎn)點(diǎn)評(píng)估不準(zhǔn)確、監(jiān)測(cè)數(shù)據(jù)的真實(shí)性存疑、未能有效利用監(jiān)測(cè)數(shù)據(jù)等方面，基于全生命周期理念建立并實(shí)施環(huán)境監(jiān)測(cè)程序，是確保無(wú)菌藥品生產(chǎn)質(zhì)量的關(guān)鍵環(huán)節(jié)。結(jié)論：無(wú)菌藥品生產(chǎn)企業(yè)需對(duì)環(huán)境監(jiān)測(cè)的實(shí)施情況進(jìn)行全面評(píng)估，通過(guò)進(jìn)一步完善相關(guān)程序內(nèi)容，確保無(wú)菌藥品質(zhì)量。無(wú)菌藥品生產(chǎn)環(huán)境監(jiān)測(cè)是 GMP 無(wú)菌檢查重點(diǎn)關(guān)注內(nèi)容，作為藥品監(jiān)管部門(mén)，檢查過(guò)程秉持全生命周期管理檢查思路，是客觀評(píng)價(jià)無(wú)菌藥品生產(chǎn)企業(yè)無(wú)菌保障能力的重要檢查技巧。
無(wú)菌藥品生產(chǎn)過(guò)程主要污染源有微粒、微生物和細(xì)菌內(nèi)毒素三大類(lèi)。通常無(wú)菌制劑生產(chǎn)企業(yè)會(huì)從對(duì)當(dāng)前產(chǎn)品和工藝的理解中得出一套有計(jì)劃的針對(duì)微生物、細(xì)菌內(nèi)毒素和微粒的污染控制策略 [1]，以確保工藝性能和產(chǎn)品質(zhì)量。查閱文獻(xiàn) [2-3] 發(fā)現(xiàn)，近年來(lái)中國(guó)、美國(guó)、日本等 5 國(guó)召回報(bào)告數(shù)據(jù)顯示，受微生物污染的無(wú)菌藥品召回有 51 次，占無(wú)菌藥品召回次數(shù)的 77.27%。因此，在無(wú)菌生產(chǎn)過(guò)程建立有效的污染控制策略是減少無(wú)菌藥品污染的重要手段。
無(wú)菌藥品生產(chǎn)環(huán)境監(jiān)測(cè)是生產(chǎn)過(guò)程中污染控制策略的重要組成部分 [4]，是對(duì)無(wú)菌制劑生產(chǎn)過(guò)程控制措施有效性的直觀監(jiān)測(cè)評(píng)價(jià)。相關(guān)文獻(xiàn) [5-8] 顯示，國(guó)內(nèi)外開(kāi)展無(wú)菌藥品檢查時(shí)，與無(wú)菌藥品生產(chǎn)環(huán)境監(jiān)測(cè)相關(guān)缺陷出現(xiàn)頻次較高，這凸顯相關(guān)企業(yè)在潔凈環(huán)境監(jiān)測(cè)方面存在不足。為此，本文基于 GMP 檢查視角分析無(wú)菌藥品生產(chǎn)環(huán)境監(jiān)測(cè)的重點(diǎn)內(nèi)容，同時(shí)對(duì)無(wú)菌檢查環(huán)境監(jiān)測(cè)典型缺陷進(jìn)行分析，并提出建立完善的環(huán)境監(jiān)測(cè)程序相關(guān)建議。
Part.01無(wú)菌藥品生產(chǎn)環(huán)境監(jiān)測(cè)的法規(guī)概述及其監(jiān)測(cè)內(nèi)容
藥品生產(chǎn)根據(jù)所生產(chǎn)藥品屬性的不同，會(huì)對(duì)生產(chǎn)環(huán)境進(jìn)行不同潔凈級(jí)別劃分。我國(guó) GMP 附錄無(wú)菌藥品 [9] 中規(guī)定生產(chǎn)所需的潔凈區(qū)可分為 A、B、C、D 4 個(gè)級(jí)別進(jìn)行環(huán)境控制，其中 A 級(jí)指高風(fēng)險(xiǎn)操作區(qū)；B 級(jí)指無(wú)菌配制和灌裝等高風(fēng)險(xiǎn)操作 A 級(jí)潔凈區(qū)所處的背景區(qū)域；C 級(jí)和 D 級(jí)指無(wú)菌藥品生產(chǎn)過(guò)程中重要程度較低操作步驟的潔凈區(qū)。監(jiān)測(cè)項(xiàng)目包括懸浮粒子、微生物（沉降菌、浮游菌和表面微生物），并設(shè)置不同控制標(biāo)準(zhǔn)對(duì)應(yīng)相應(yīng)潔凈級(jí)別。
環(huán)境監(jiān)測(cè)目的是基于風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估原則設(shè)置不同潔凈級(jí)別的取樣點(diǎn)，從而獲得代表性數(shù)據(jù)來(lái)評(píng)價(jià)不同潔凈級(jí)別環(huán)境中的懸浮粒子及微生物分布狀況。環(huán)境監(jiān)測(cè)方案不僅要能對(duì)清潔消毒、物料處理、設(shè)備運(yùn)行、更衣過(guò)程以及人員的無(wú)菌行為規(guī)范等污染控制策略作出合理評(píng)價(jià)，而且所獲得的監(jiān)測(cè)數(shù)據(jù)可以證明潔凈區(qū)環(huán)境是否在良好的受控狀態(tài)下運(yùn)行。值得注意的是，實(shí)施環(huán)境監(jiān)測(cè)的過(guò)程應(yīng)避免對(duì)生產(chǎn)引入污染，且環(huán)境監(jiān)測(cè)本身并不能改變潔凈區(qū)環(huán)境狀況。
Part.02、無(wú)菌藥品生產(chǎn)環(huán)境監(jiān)測(cè)與環(huán)境控制
我國(guó) GMP 中對(duì)無(wú)菌藥品的生產(chǎn)操作環(huán)境進(jìn)行規(guī)定。無(wú)菌藥品在生產(chǎn)過(guò)程中，根據(jù)滅菌處理的不同，可以將無(wú)菌藥品分為最終滅菌產(chǎn)品和非最終滅菌產(chǎn)品，其對(duì)應(yīng)的生產(chǎn)操作環(huán)境也有著一定差異（見(jiàn)表 1）。
表 1 無(wú)菌藥品常見(jiàn)生產(chǎn)操作及其對(duì)應(yīng)潔凈級(jí)別
針對(duì)不同潔凈級(jí)別環(huán)境控制的需求，通常會(huì)采用相應(yīng)控制手段降低外界空氣或物品進(jìn)入潔凈區(qū)時(shí)引發(fā)污染的可能性：一是基于已確認(rèn)的空調(diào)系統(tǒng)對(duì)進(jìn)入潔凈區(qū)的空氣通過(guò)初、中、高效過(guò)濾方式達(dá)到對(duì)應(yīng)級(jí)別懸浮粒子及微生物限度的限度標(biāo)準(zhǔn)；二是采用已驗(yàn)證的清潔、消毒和滅菌方法對(duì)進(jìn)入不同潔凈區(qū)的物料及該區(qū)域內(nèi)廠房設(shè)施設(shè)備表面進(jìn)行相應(yīng)處理。此外，對(duì)于人員進(jìn)入潔凈區(qū)，需盡可能地降低微生物負(fù)荷和微粒水平，通常采取外層包裹即進(jìn)行更衣操作以減少自身帶來(lái)的潛在污染。
Part.03、環(huán)境監(jiān)測(cè)與空調(diào)凈化系統(tǒng)確認(rèn)實(shí)施要點(diǎn)對(duì)比
如前文所述，通過(guò)空調(diào)凈化系統(tǒng)凈化潔凈區(qū)引入的外界空氣，以清潔、消毒和滅菌方式清除進(jìn)入潔凈區(qū)物品可能附帶的污染物，以期實(shí)現(xiàn)無(wú)菌藥品生產(chǎn)環(huán)境可控。為證實(shí)上述控制手段是否能滿足不同級(jí)別環(huán)境標(biāo)準(zhǔn)要求，需對(duì)其控制方式的有效性進(jìn)行監(jiān)測(cè)評(píng)價(jià)?？照{(diào)凈化系統(tǒng)確認(rèn)與環(huán)境監(jiān)測(cè)在監(jiān)測(cè)目的、監(jiān)測(cè)項(xiàng)目及其頻次、實(shí)施階段上均有一定的不同（見(jiàn)表 2），但二者又互為補(bǔ)充，前者是“過(guò)程驗(yàn)證”，后者是“結(jié)果監(jiān)控”。當(dāng)前一些無(wú)菌藥品生產(chǎn)企業(yè)對(duì)于環(huán)境監(jiān)測(cè)與空調(diào)凈化系統(tǒng)確認(rèn)間存在不同程度的混淆，通常按空調(diào)凈化系統(tǒng)確認(rèn)要求執(zhí)行日常環(huán)境監(jiān)測(cè)，加大日常監(jiān)測(cè)任務(wù)的同時(shí)由于監(jiān)測(cè)重點(diǎn)把握不準(zhǔn)確反而造成日常監(jiān)測(cè)靶向性不足。
表 2 環(huán)境監(jiān)測(cè)與空調(diào)凈化系統(tǒng)確認(rèn)的區(qū)別
Part.04、全生命周期環(huán)境監(jiān)測(cè)程序的建立及實(shí)施
無(wú)菌藥品生產(chǎn)過(guò)程采取全生命周期的方法創(chuàng)建和維護(hù)環(huán)境監(jiān)測(cè)程序，是確保無(wú)菌藥品生產(chǎn)質(zhì)量的關(guān)鍵環(huán)節(jié)。這種全生命周期方法包括在建立新生產(chǎn)線、引入新劑型及新品種之前，基于風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估原則確立微生物監(jiān)測(cè)所需的合適取樣點(diǎn)、取樣頻率及監(jiān)測(cè)方法。根據(jù)環(huán)境監(jiān)測(cè)性能確認(rèn)結(jié)果，在為日常環(huán)境監(jiān)測(cè)和批次相關(guān)環(huán)境監(jiān)測(cè)制定取樣計(jì)劃之前，可能需要對(duì)取樣點(diǎn)進(jìn)行調(diào)整（主要是減少或增加）。另外，需要評(píng)估變更（如改擴(kuò)建生產(chǎn)車(chē)間、工藝變更或設(shè)備搬遷）的影響，若評(píng)估結(jié)論為變更前后對(duì)目前所執(zhí)行的環(huán)境監(jiān)測(cè)程序的有效性有著明顯影響，則需要對(duì)生產(chǎn)工藝、設(shè)備進(jìn)行重新確認(rèn)。值得注意的是，環(huán)境監(jiān)測(cè)程序的設(shè)置原則應(yīng)基于生產(chǎn)線或所生產(chǎn)品種可能潛在的風(fēng)險(xiǎn)，而非企業(yè)通常墨守成規(guī)的做法（如固定的取樣頻次、固定的警戒限和糾偏限限度值）。
4.1 完善的環(huán)境監(jiān)測(cè)程序的制定
建立完善的環(huán)境監(jiān)測(cè)程序是開(kāi)展藥品生產(chǎn)潔凈環(huán)境監(jiān)測(cè)工作的先決條件。首先，應(yīng)明確不同潔凈級(jí)別環(huán)境監(jiān)測(cè)的壓差、溫濕度、懸浮粒子、沉降菌、浮游菌、表面微生物等標(biāo)準(zhǔn)；其次，需確定環(huán)境監(jiān)測(cè)實(shí)施計(jì)劃中取樣點(diǎn)及頻率、監(jiān)測(cè)方法和培養(yǎng)方法、趨勢(shì)分析及異常情況處理、記錄和報(bào)告等規(guī)定程序。
4.1.1 監(jiān)測(cè)項(xiàng)目的設(shè)置
懸浮粒子監(jiān)測(cè)是對(duì)環(huán)境中微粒數(shù)量進(jìn)行監(jiān)測(cè)。通常采用計(jì)數(shù)濃度法，即通過(guò)測(cè)定潔凈環(huán)境內(nèi)單位體積空氣中含大于或等于某粒徑的懸浮粒子數(shù)，來(lái)評(píng)定潔凈室（區(qū)域）的懸浮粒子潔凈度等級(jí)。ISO14644-1 具體描述了懸浮粒子濃度對(duì)于潔凈室和潔凈區(qū)域的空氣潔凈度的分級(jí)。基于傳統(tǒng)的粒子尺寸范圍（如 0.5 μm和5 μm）規(guī)定了確認(rèn)空氣潔凈度的方法。
空氣微生物監(jiān)測(cè)是對(duì)環(huán)境中沉降菌和浮游菌的水平進(jìn)行監(jiān)測(cè)。其中對(duì)空氣中沉降菌取樣是一種被動(dòng)取樣方法，而浮游菌取樣是一種主動(dòng)取樣方法。藥品潔凈區(qū)沉降菌的監(jiān)測(cè)按照《醫(yī)藥工業(yè)潔凈室（區(qū)）沉降菌的測(cè)試方法》的現(xiàn)行國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行，浮游菌的監(jiān)測(cè)按照《醫(yī)藥工業(yè)潔凈室（區(qū)）浮游菌的測(cè)試方法》的現(xiàn)行國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行，浮游菌采樣器可選擇撞擊式采樣器或?yàn)V膜式采樣器等。
表面微生物監(jiān)測(cè)是對(duì)環(huán)境、設(shè)備和人員的表面微生物進(jìn)行監(jiān)測(cè)，方法包括接觸碟法、擦拭法、表面淋洗法和柔性薄膜法。接觸碟法是將充滿規(guī)定的瓊脂培養(yǎng)基的接觸碟對(duì)規(guī)則表面或平面進(jìn)行取樣，然后置合適的溫度下培養(yǎng)一定時(shí)間并計(jì)數(shù)，該方法適用于地面、墻面、操作者手套等規(guī)則平面的取樣。擦拭法是接觸碟法的補(bǔ)充，適用于不規(guī)則表面的微生物監(jiān)測(cè)，特別是設(shè)備的不規(guī)則表面，擦拭法的擦拭面積應(yīng)采用合適尺寸的無(wú)菌模板或標(biāo)尺確定，取樣后，將拭子置合適的緩沖液或培養(yǎng)基中，充分振蕩，然后采用適宜的方法計(jì)數(shù)。表面淋洗法適用于對(duì)內(nèi)表面有微生物污染的大面積的區(qū)域，通常使用無(wú)菌水與內(nèi)表面進(jìn)行接觸后對(duì)其進(jìn)行收集和測(cè)試。柔性薄膜法是使用含有培養(yǎng)基的柔性薄膜，將其表面以旋轉(zhuǎn)滾動(dòng)方式按壓接觸待取樣表面進(jìn)行取樣。
4.1.2 取樣點(diǎn)的設(shè)置
取樣位置的選擇需考慮潔凈室設(shè)計(jì)和生產(chǎn)工藝過(guò)程。在取樣點(diǎn)位置選擇時(shí)需要考慮一些風(fēng)險(xiǎn)因素，如在實(shí)際生產(chǎn)過(guò)程中，微生物最有可能大量繁殖的位點(diǎn)；日常生產(chǎn)中最難清潔和消毒的位點(diǎn)；日常監(jiān)測(cè)取樣點(diǎn)必要的輪換；謹(jǐn)慎選擇與產(chǎn)品暴露于環(huán)境中工序相鄰的取樣點(diǎn)等。取樣點(diǎn)位數(shù)量取決于被監(jiān)測(cè)的潔凈級(jí)別、實(shí)際生產(chǎn)操作風(fēng)險(xiǎn)程度、監(jiān)測(cè)區(qū)域面積等因素。關(guān)鍵點(diǎn)位的確定應(yīng)結(jié)合產(chǎn)品自身屬性、生產(chǎn)環(huán)境和人員操作等多方面因素，考慮包括工藝需求、產(chǎn)品直接接觸或暴露情況以及操作人員人工干預(yù)的程度。以無(wú)菌藥品生產(chǎn)的 A 級(jí)區(qū)為例，常見(jiàn)環(huán)境監(jiān)測(cè)點(diǎn)位設(shè)置有灌裝線上臨近開(kāi)放或灌裝的容器、灌裝操作所用限制進(jìn)出屏障系統(tǒng)（RABS）或隔離器的手套、灌裝線上層流罩下操作人員活動(dòng)頻繁的區(qū)域等。
4.1.3 取樣頻率的確定
GMP 無(wú)菌藥品附錄中對(duì)于取樣頻率和時(shí)間作出規(guī)定，如 A 級(jí)區(qū)關(guān)鍵操作（含設(shè)備組裝階段）應(yīng)全過(guò)程監(jiān)測(cè)懸浮粒子和空氣微生物；B 級(jí)區(qū)可采取與 A 級(jí)區(qū)相似的監(jiān)測(cè)系統(tǒng)，可根據(jù) B 級(jí)潔凈區(qū)對(duì)相鄰 A 級(jí)潔凈區(qū)的影響程度，調(diào)整采樣頻率和采樣量。選擇監(jiān)測(cè)頻率的一個(gè)關(guān)鍵目標(biāo)是能夠識(shí)別潛在的對(duì)產(chǎn)品造成污染風(fēng)險(xiǎn)的系統(tǒng)缺陷。對(duì)于某個(gè)取樣點(diǎn)的測(cè)試頻率或許可以小于對(duì)這個(gè)系統(tǒng)或區(qū)域的監(jiān)測(cè)頻率（如對(duì)取樣點(diǎn)可以進(jìn)行逐個(gè)輪換）。另外，取樣頻率的設(shè)定需結(jié)合法律法規(guī)、產(chǎn)品工藝、歷史監(jiān)測(cè)數(shù)據(jù)等因素，當(dāng)取樣頻率改變時(shí)則必須進(jìn)行風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估，內(nèi)容包括對(duì)歷史和現(xiàn)有的改變?nèi)宇l率取樣點(diǎn)的數(shù)據(jù)總結(jié)，且在改變頻率后需定期復(fù)核環(huán)境監(jiān)測(cè)數(shù)據(jù)以證明改變后的取樣頻率的合理性。
4.1.4 培養(yǎng)方法的確定
對(duì)于環(huán)境監(jiān)測(cè)的培養(yǎng)條件選擇，國(guó)內(nèi)外的法規(guī)或指南有所不同?！吨腥A人民共和國(guó)藥典》藥品潔凈實(shí)驗(yàn)室微生物監(jiān)測(cè)和控制指導(dǎo)原則 [10] 規(guī)定，培養(yǎng)基一般采用胰酪蛋白胨瓊脂培養(yǎng)基，培養(yǎng)溫度為 30~35 ℃，時(shí)間為 3~5 天，當(dāng)監(jiān)測(cè)結(jié)果有疑似真菌或考慮季節(jié)因素影響時(shí)，可增加沙氏葡萄糖培養(yǎng)基，培養(yǎng)溫度為 20~25 ℃，時(shí)間為 5~7 天。《美國(guó)藥典》無(wú)菌生產(chǎn)環(huán)境的微生物控制和監(jiān)測(cè)（United States Pharmacopeia Microbiological Controland Monitoring of Aseptic Processing Environments）指導(dǎo)原則 [11] 規(guī)定，常規(guī)微生物培養(yǎng)基，培養(yǎng)溫度為20~35 ℃，時(shí)間不少于 72 小時(shí)，當(dāng)發(fā)現(xiàn)污染微生物生產(chǎn)緩慢時(shí)，可以考慮延長(zhǎng)培養(yǎng)時(shí)間。世界衛(wèi)生組織疫苗生產(chǎn)設(shè)施潔凈室環(huán)境監(jiān)測(cè)指南
（EnvironmentMonitoring of Clean Rooms in Vaccine ManufacturingFacilities）[12] 則要求，至少 2 種溫度下進(jìn)行培養(yǎng)，在 20~25 ℃，時(shí)間為 3~5 天；30~35 ℃，時(shí)間為2~3 天。
為避免培養(yǎng)基自身污染而導(dǎo)致潔凈區(qū)產(chǎn)生污染的情況，建議采用濕熱、輻射或其他合適的方式對(duì)環(huán)境監(jiān)測(cè)用培養(yǎng)基及其包裝進(jìn)行滅菌，尤其是在A、B 級(jí)區(qū)域使用的培養(yǎng)基。如果使用自制培養(yǎng)基，應(yīng)在傳遞到潔凈區(qū)之前進(jìn)行預(yù)培養(yǎng)和目視檢查確認(rèn)其沒(méi)有污染。
4.2 環(huán)境監(jiān)測(cè)程序全生命周期管理
基于建立的完善環(huán)境監(jiān)測(cè)程序開(kāi)展全生命周期環(huán)境監(jiān)測(cè)，應(yīng)在區(qū)域、產(chǎn)品或工藝的生命周期內(nèi)，結(jié)合環(huán)境監(jiān)測(cè)周期內(nèi)監(jiān)測(cè)指標(biāo)的趨勢(shì)分析情況，仔細(xì)回顧環(huán)境監(jiān)測(cè)策略，以確保其受控狀態(tài)，并定期重新評(píng)估環(huán)境監(jiān)測(cè)策略執(zhí)行的有效性。
4.2.1 趨勢(shì)分析
環(huán)境監(jiān)測(cè)指標(biāo)警戒限度和糾偏限度的設(shè)定可基于單個(gè)樣本點(diǎn)或具有類(lèi)似設(shè)計(jì)或活動(dòng)的相關(guān)樣本組。應(yīng)記錄所有數(shù)據(jù)，并定期進(jìn)行趨勢(shì)分析。趨勢(shì)分析包括但不限于：警戒限或行動(dòng)限事件的增加、連續(xù)超出警戒限、超出行動(dòng)限、微生物菌群類(lèi)型和數(shù)量的變化等。應(yīng)特別注意監(jiān)測(cè)到難以控制的微生物時(shí)，如產(chǎn)孢子微生物和霉菌，這表明潔凈室失去控制或正在惡化。通過(guò)日常環(huán)境監(jiān)測(cè)數(shù)據(jù)來(lái)證明潔凈區(qū)處于良好的運(yùn)行狀況，且各級(jí)別微生物控制在其受控范圍內(nèi)。
4.2.2 異常數(shù)據(jù)識(shí)別和處置
應(yīng)當(dāng)對(duì)生產(chǎn)周期內(nèi)產(chǎn)生的環(huán)境監(jiān)測(cè)數(shù)據(jù)進(jìn)行持續(xù)性及定期回顧性監(jiān)測(cè)，通過(guò)有資質(zhì)的人員做出警戒限度和糾偏限度的決策。基于建立的異常數(shù)據(jù)處理程序，識(shí)別和調(diào)查偏差、不良趨勢(shì)，并采取及時(shí)有效的糾正和預(yù)防措施。糾正措施通過(guò)對(duì)調(diào)查過(guò)程中的要素進(jìn)行全面評(píng)估而形成，需針對(duì)偏差或不良趨勢(shì)的根本原因進(jìn)行對(duì)癥施治。同時(shí)，所有糾正措施需要評(píng)估施行該措施對(duì)產(chǎn)品的影響。
4.2.3 監(jiān)測(cè)程序的有效執(zhí)行
在環(huán)境監(jiān)測(cè)項(xiàng)目的整個(gè)生命周期內(nèi)，如果發(fā)現(xiàn)風(fēng)險(xiǎn)高于企業(yè)風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估時(shí)的接受標(biāo)準(zhǔn)，企業(yè)應(yīng)當(dāng)及時(shí)根據(jù)風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估制定風(fēng)險(xiǎn)控制措施，或通過(guò)增加額外的取樣位置來(lái)增加可檢測(cè)性以確定事發(fā)的根本原因，進(jìn)而采取針對(duì)性的糾正預(yù)防措施從而降低無(wú)菌藥品生產(chǎn)風(fēng)險(xiǎn)的可能性。基于生命周期管理原則，完成的風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估還應(yīng)定期（如每年）進(jìn)行回顧，以確保環(huán)境監(jiān)測(cè)計(jì)劃按預(yù)先設(shè)計(jì)運(yùn)行。同時(shí)，也應(yīng)注意當(dāng)前采取的環(huán)境監(jiān)測(cè)程序識(shí)別出的風(fēng)險(xiǎn)點(diǎn)，是基于目前采取的仍處于持續(xù)不斷且螺旋上升的風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估策略，風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估團(tuán)隊(duì)的知識(shí)、經(jīng)驗(yàn)和能力，以及取樣局限性和測(cè)試技術(shù)等因素影響綜合判定而來(lái)，并不意味著監(jiān)測(cè)結(jié)果無(wú)異常就可以確定整個(gè)無(wú)菌制劑生產(chǎn)環(huán)境是絕對(duì)可靠的，應(yīng)結(jié)合其他污染控制策略綜合考量。
Part.05、環(huán)境監(jiān)測(cè)常見(jiàn)缺陷分析
全生命周期環(huán)境監(jiān)測(cè)程序的建立及實(shí)施，本質(zhì)上是一個(gè)正向反饋機(jī)制，是企業(yè)基于全面邏輯思考構(gòu)建的實(shí)施程序，并從實(shí)施過(guò)程中得到的監(jiān)測(cè)數(shù)據(jù)不斷優(yōu)化監(jiān)測(cè)程序。而現(xiàn)實(shí)檢查中發(fā)現(xiàn)企業(yè)在環(huán)境監(jiān)測(cè)程序及其實(shí)施方面未能形成閉環(huán)管理的邏輯，其典型問(wèn)題有環(huán)境監(jiān)測(cè)程序建立不完善、風(fēng)險(xiǎn)點(diǎn)評(píng)估不準(zhǔn)確、監(jiān)測(cè)數(shù)據(jù)的真實(shí)性存疑、未能對(duì)監(jiān)測(cè)數(shù)據(jù)進(jìn)行有效利用。
5.1 環(huán)境監(jiān)測(cè)程序及其應(yīng)用
環(huán)境監(jiān)測(cè)程序內(nèi)容的合理性和可操作性應(yīng)結(jié)合日常生產(chǎn)中發(fā)現(xiàn)的可能風(fēng)險(xiǎn)點(diǎn)進(jìn)行綜合風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估，而非遠(yuǎn)離生產(chǎn)在質(zhì)量管理辦公室進(jìn)行頭腦風(fēng)暴得出的一套管理文件。典型問(wèn)題如下：
（1）某公司小容量注射劑車(chē)間小容量注射劑 2線上所用的無(wú)菌制劑灌封設(shè)備，該“設(shè)備常規(guī)確認(rèn)報(bào)告”中的結(jié)論是，此灌封設(shè)備“符合”性能確認(rèn)（PQ）方案中對(duì)于懸浮粒子計(jì)數(shù)的規(guī)定。盡管該方案中灌封設(shè)備區(qū)域設(shè)定了一定數(shù)量的取樣點(diǎn)，但未能給出科學(xué)合理的解釋說(shuō)明，用于證明所選擇的取樣位置分別能夠產(chǎn)生對(duì)關(guān)鍵區(qū)域有代表性的、有意義的結(jié)果。
（2）某公司凍干粉針車(chē)間凍干粉針劑生產(chǎn)線灌封間的在線粒子計(jì)數(shù)取樣點(diǎn)選擇合理性報(bào)告中的結(jié)論是，目前安裝的在線顆粒計(jì)數(shù)器足以捕捉灌裝線中 A 級(jí)關(guān)鍵活動(dòng)區(qū)域的顆粒。然而，沒(méi)有試驗(yàn)數(shù)據(jù)或科學(xué)依據(jù)證明所選擇的位置在灌裝區(qū)域連續(xù)監(jiān)測(cè)是否充分合理。
（3）某公司二車(chē)間小容量注射劑生產(chǎn)灌裝線上，現(xiàn)場(chǎng)動(dòng)態(tài)生產(chǎn)時(shí)操作人員在膠塞裝載和灌裝傳送帶區(qū)域（產(chǎn)品仍敞口）多次進(jìn)行人工干預(yù)（在此干預(yù)操作時(shí)，人員會(huì)從灌裝線一邊來(lái)回穿越到另一邊，直接影響 A 級(jí)送風(fēng)，可能導(dǎo)致膠塞和產(chǎn)品受污染），但該情形下的環(huán)境監(jiān)測(cè)仍按照既定頻次進(jìn)行采集，未采取額外增加監(jiān)測(cè)頻次評(píng)估產(chǎn)品質(zhì)量是否受上述操作影響。
5.2 環(huán)境監(jiān)測(cè)數(shù)據(jù)的可靠性和完整性
環(huán)境監(jiān)測(cè)數(shù)據(jù)存在取樣過(guò)程記錄、樣品培養(yǎng)過(guò)程記錄信息不真實(shí)、不可追溯等情況，典型問(wèn)題如下：
（1）2023 年 10 月 12 日，檢查員在對(duì)質(zhì)檢中心微生物實(shí)驗(yàn)室的培養(yǎng)箱進(jìn)行檢查時(shí)，發(fā)現(xiàn)環(huán)境監(jiān)測(cè)和人員表面微生物監(jiān)測(cè)樣品不存在，這些樣品本應(yīng)在 A 生產(chǎn)線的無(wú)菌生產(chǎn)過(guò)程中采集。再如，從2023 年 10 月 6 日至 11 日，批生產(chǎn)記錄中顯示應(yīng)該有 102 個(gè)培養(yǎng)皿，但實(shí)際培養(yǎng)箱中僅有 3 個(gè)培養(yǎng)皿。
（2）2022 年 6 月 2 日，無(wú)菌制劑大樓建筑物出入門(mén)禁記錄顯示，負(fù)責(zé)收集凍干生產(chǎn)線微生物監(jiān)測(cè)樣品的員工沒(méi)有進(jìn)入建筑物的記錄，但是同一時(shí)間內(nèi)門(mén)禁記錄顯示該員工進(jìn)入質(zhì)量控制大樓，且微生物監(jiān)測(cè)樣品已被記錄在凍干生產(chǎn)線收集。
5.3 環(huán)境監(jiān)測(cè)數(shù)據(jù)超標(biāo)及趨勢(shì)分析
企業(yè)未能對(duì)環(huán)境監(jiān)測(cè)數(shù)據(jù)開(kāi)展有效的趨勢(shì)分析，也未對(duì)部分環(huán)境監(jiān)測(cè)異常趨勢(shì)進(jìn)行有效識(shí)別、分析、調(diào)查與處理。典型問(wèn)題如下：
（1）某公司未基于歷史數(shù)值設(shè)置環(huán)境監(jiān)測(cè)點(diǎn)位的警戒限和糾偏限限度值。如 B08 生產(chǎn)車(chē)間 B08生產(chǎn)線上的灌裝線在 2022 年 2 月、3 月、5 月、10月生產(chǎn)期間懸浮粒子計(jì)數(shù)器監(jiān)測(cè)顯示 5 μm 粒子呈現(xiàn)連續(xù)多次階段性超標(biāo)趨勢(shì)，但 2023 年企業(yè)在設(shè)置該區(qū)域懸浮粒子監(jiān)測(cè)警戒限和糾偏限限度值時(shí)仍沿襲往年的標(biāo)準(zhǔn)。
（2）某公司無(wú)菌制劑樓三層 T10 車(chē)間粉針劑生產(chǎn)線上的灌裝線操作人員在生產(chǎn)結(jié)束后進(jìn)行表面微生物采樣，培養(yǎng)皿經(jīng)培養(yǎng)后，顯示該員工身體多個(gè)部位的微生物數(shù)量超出警戒限和糾偏限。該公司于 2022 年 9 月 3 日啟動(dòng)偏差調(diào)查直到 2023 年1 月 23 日才關(guān)閉，但最終調(diào)查結(jié)論為“培養(yǎng)基可能在處理或轉(zhuǎn)移過(guò)程中受到污染”。說(shuō)明偏差調(diào)查不充分，且未評(píng)估調(diào)查的 4 個(gè)月期間所生產(chǎn)產(chǎn)品的風(fēng)險(xiǎn)。
Part.06、結(jié)語(yǔ)
藥品生產(chǎn)潔凈環(huán)境監(jiān)測(cè)是藥品生產(chǎn)污染控制策略的重要組成部分，直接反映藥品生產(chǎn)企業(yè)在無(wú)菌保障、風(fēng)險(xiǎn)管控等方面的能力和水平，也體現(xiàn)了企業(yè)對(duì)于所生產(chǎn)的無(wú)菌藥品潔凈區(qū)廠房布局、生產(chǎn)工藝、清潔和消毒等方面的理解和實(shí)施情況，更是無(wú)菌藥品檢查的重點(diǎn)內(nèi)容 [13-14]。
本文首先闡明了無(wú)菌藥品環(huán)境監(jiān)測(cè)法規(guī)要求，其次從 GMP 檢查視角厘清其與環(huán)境控制、空調(diào)凈化系統(tǒng)確認(rèn)等易混淆概念的差異，并就如何建立全生命周期環(huán)境監(jiān)測(cè)管理程序進(jìn)行探討，最后對(duì)無(wú)菌藥品生產(chǎn)檢查中發(fā)現(xiàn)的環(huán)境監(jiān)測(cè)方面典型問(wèn)題進(jìn)行舉例分析。企業(yè)可據(jù)此評(píng)估目前實(shí)施環(huán)境監(jiān)測(cè)程序的有效性，持續(xù)優(yōu)化質(zhì)量管理工作，確保無(wú)菌藥品質(zhì)量可靠。
此外，無(wú)菌藥品環(huán)境監(jiān)測(cè)數(shù)據(jù)的可靠性和完整性是確保環(huán)境監(jiān)測(cè)全生命周期質(zhì)量管理工作有效開(kāi)展的重要前提，直接影響產(chǎn)品放行科學(xué)性和監(jiān)管評(píng)估準(zhǔn)確性 [15-16]。近年來(lái)，F(xiàn)DA 檢查尤其關(guān)注無(wú)菌藥品生產(chǎn)企業(yè)環(huán)境監(jiān)測(cè)實(shí)施程序細(xì)節(jié)（如微生物監(jiān)測(cè)取樣時(shí)間、培養(yǎng)周期），提示無(wú)菌藥品生產(chǎn)企業(yè)需強(qiáng)化全生命周期管理的意識(shí)，確保數(shù)據(jù)可靠性以保障藥品質(zhì)量安全。
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