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這里面不是完備的證明過程，主要是一點(diǎn)點(diǎn)經(jīng)驗(yàn)。

此處的色譜分析還是傳統(tǒng)的分配色譜，特指C18。

此處更應(yīng)該確切的說是分子體積的大小，不過為了方便還是描述為分子量或者分子大小。

疏水減法模型

1. 公式

還是需要擺出來這個(gè)公式：這個(gè)公式表示了化合物與色譜柱的相互作用。其中色譜柱參數(shù)H、S、A、B、C分別代表疏水性、體積、酸、堿性、介電系數(shù)。η、σ、β、α、κ為對(duì)應(yīng)化合物的相應(yīng)性質(zhì)。

代表以乙苯作為參考物質(zhì)，其保留因子的大小，也可以說是色譜柱相對(duì)于乙苯的選擇性。

2. 示意圖

此處我們單論分子體積的影響，不同體積的分子進(jìn)入鍵和相中的位置存在差異，因此其選擇性存在差異，也就是說鍵和相的“體積或者間隙”對(duì)化合物保留存在影響。這跟色譜柱的性質(zhì)有關(guān)，這點(diǎn)也是手性分離的基礎(chǔ)。

3. 到底能差多大

根據(jù)疏水減法模型，在同樣的色譜條件下，假定兩個(gè)化合物僅存在分子量上的差異，其保留因子大小如下：

從以上兩個(gè)公式推導(dǎo)得到：

化合物保留時(shí)間比值能達(dá)到兩個(gè)化合物體積差異的指數(shù)次方。但是在常規(guī)色譜柱上，小分子化合物的σ值相對(duì)固定，即不同化合物之間不敏感。難以通過該性質(zhì)進(jìn)行分離，即便是SEC。

4. 第二個(gè)問題：分子量增加，保留因子增加還是減小?

從表中可以清晰的看出，不同色譜柱的體積（S值）正負(fù)號(hào)存在差異，對(duì)于窄孔色譜柱而言，該效應(yīng)大部分為正，也就是說分子量增加其保留時(shí)間減少。但是我們也在某些色譜柱上遇到了相反的結(jié)論。

一個(gè)奇怪的案例

制備系統(tǒng)：漢邦Newstyle

色譜柱為：納微（30*250mm，10um）C18

色譜條件為：

由于該產(chǎn)品并沒有對(duì)照品，我們直接采用分析方法制備，放大計(jì)算流速后進(jìn)行制備。

之所以稱做奇怪，主要原因是其乳糖加合物并沒有如我們預(yù)期一般大幅度提前，而是只有略微的增加，其二聚體卻大幅度延后。