01.溫度控制：最關(guān)鍵因素
黃金傾注溫度：47℃–50℃
過(guò)高（>55℃）：水分大量蒸發(fā) → 皿蓋迅速形成冷凝水；同時(shí)可能使熱敏感成分（如抗生素）失活。
過(guò)低（<45℃）：瓊脂提前凝固 → 平板不平整，甚至無(wú)法鋪勻。
實(shí)用判斷法：
“手心不燙、手背微燙”——用手心輕觸三角瓶外壁感覺不燙，手背接觸略感溫?zé)幔f(shuō)明溫度合適。
建議操作：
熔化后的培養(yǎng)基置于 47–50℃恒溫水浴鍋或培養(yǎng)箱中保溫，隨用隨取。
若室溫較低（如冬季），可將培養(yǎng)皿預(yù)熱至40℃約10分鐘，避免冷皿遇熱培養(yǎng)基產(chǎn)生劇烈溫差。
02.環(huán)境濕度與通風(fēng)
超凈臺(tái)內(nèi)操作 + 適度通風(fēng)
在超凈工作臺(tái)中倒平板，并保持風(fēng)機(jī)開啟，有助于帶走水蒸氣。
倒完后敞口靜置5分鐘再蓋蓋，讓多余水汽自然揮發(fā)（注意無(wú)菌操作?。?。
避免高濕環(huán)境：
潮濕天氣（如梅雨季）盡量減少開蓋時(shí)間；
可在超凈臺(tái)內(nèi)放置干燥劑或使用除濕設(shè)備輔助。
03.操作技巧優(yōu)化
1. 倒板手法“穩(wěn)、慢、勻”
瓶口距皿底 2–3 cm，沿內(nèi)壁緩緩倒入（90 mm 皿約 18–20 mL）；
倒完后順時(shí)針+逆時(shí)針各轉(zhuǎn)3圈，使培養(yǎng)基均勻鋪開，避免局部堆積。
2. 減少冷凝水積聚的方法
方法A（推薦）：倒完平板后敞口靜置5分鐘，再蓋蓋并立即倒置（皿蓋在下，皿底在上），使冷凝水聚集在皿蓋內(nèi)側(cè)，不滴落至培養(yǎng)基表面。
方法B（謹(jǐn)慎使用）：將倒好的平板疊放3–5層靜置凝固，利用上層皿底熱量幫助下層均勻凝固，但專家提醒可能影響厚度均勻性，僅作應(yīng)急。
3. 后續(xù)處理（若已有冷凝水）
若用于表面劃線/涂布：可在超凈臺(tái)中輕吹無(wú)菌風(fēng)（如移液器吹氣）短暫干燥表面，切忌吹干至開裂。
若用于傾注法計(jì)數(shù)：可在已凝固的平板上再覆蓋一層薄瓊脂（約5 mL），隔離冷凝水影響。
04.進(jìn)階建議
低熔點(diǎn)瓊脂
（如用于原位雜交）：需預(yù)冷至25℃再操作，避免高溫加劇水汽。
環(huán)境監(jiān)測(cè)用平板
：可適當(dāng)增加培養(yǎng)基體積（如25 mL），增強(qiáng)抗蒸發(fā)能力。
記錄每次條件
：包括室溫、濕度、培養(yǎng)基溫度、靜置時(shí)間等，便于復(fù)現(xiàn)實(shí)驗(yàn)。
總結(jié)口訣：
“溫控47–50℃，皿要預(yù)熱手要穩(wěn)；
倒完敞口五分鐘，倒置存放水不淋。”
通過(guò)精準(zhǔn)控溫、優(yōu)化環(huán)境與規(guī)范操作，絕大多數(shù)冷凝水問題都能有效避免，從而獲得平整、無(wú)水珠干擾的理想平板。
京公網(wǎng)安備11010802046783號(hào)
