摘要：疫苗的藥學(xué)研發(fā)是確保其從實驗室研究成功過渡到商業(yè)化穩(wěn)定生產(chǎn)的核心環(huán)節(jié)。鑒于我國當(dāng)前疫苗研發(fā)仍多借鑒傳統(tǒng)工藝，且藥學(xué)研發(fā)全生命周期的質(zhì)量管理體系構(gòu)建尚不完善，存在數(shù)據(jù)可靠性管理等挑戰(zhàn)，建立科學(xué)、有效的質(zhì)量管理策略至關(guān)重要。本文在系統(tǒng)分析國際與國內(nèi)監(jiān)管模式的基礎(chǔ)上，提出建立分階段、差異化的質(zhì)量管理體系，強(qiáng)調(diào)以質(zhì)量源于設(shè)計（Quality by Design，QbD）理念為核心指引；并對該體系在疫苗研發(fā)全生命周期中的應(yīng)用進(jìn)行系統(tǒng)闡述，涵蓋菌毒種管理、生產(chǎn)工藝開發(fā)與優(yōu)化、質(zhì)量研究等核心控制要點(diǎn)及各階段的質(zhì)量管理策略，以期為提升疫苗研發(fā)的合規(guī)性、可靠性及對監(jiān)管核查提供系統(tǒng)性參考，最終保障上市疫苗的質(zhì)量與安全。
疫苗工藝與質(zhì)量研究是疫苗藥學(xué)研究的核心，是確保產(chǎn)品從研發(fā)成功過渡至商業(yè)化穩(wěn)定生產(chǎn)的關(guān)鍵基礎(chǔ)，也為疫苗上市后的生產(chǎn)與質(zhì)量控制提供了科學(xué)依據(jù)，從根本上保障了疫苗的安全性、有效性和質(zhì)量可控性。我國大部分已上市疫苗仍以借鑒傳統(tǒng)工藝為主，歷版《中國藥典》通過規(guī)定不同疫苗品種的關(guān)鍵生產(chǎn)步驟、工藝控制要點(diǎn)及質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)，為藥學(xué)研究提供了重要的規(guī)范性參考，相應(yīng)要求也是上市產(chǎn)品的最低要求。隨著疫苗研發(fā)的推進(jìn)及對產(chǎn)品認(rèn)知的不斷深化，對各階段的藥學(xué)研究要求應(yīng)具有相應(yīng)的通信作者：趙欣，E‐mail：zhaoxin@cde.org.cn 特殊性。在研發(fā)早期過程中，生產(chǎn)關(guān)鍵工藝參數(shù)（Critical Process Parameter，CPP）、規(guī)格、質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)等尚處于摸索階段，隨著臨床及藥學(xué)研究的不斷深入，對產(chǎn)品生產(chǎn)、規(guī)模、產(chǎn)線、關(guān)鍵生產(chǎn)設(shè)備、規(guī)格、質(zhì)量控制、關(guān)鍵物料等進(jìn)行不斷調(diào)整，以有利于產(chǎn)品商業(yè)化生產(chǎn)的質(zhì)量控制及確保產(chǎn)品生產(chǎn)的批間一致性；有些研制單位在研發(fā)產(chǎn)品過程中過于偏重研發(fā)效率，不重視產(chǎn)品藥學(xué)研發(fā)全生命周期質(zhì)量管理體系的構(gòu)建，相應(yīng)的質(zhì)量管理投入不足，藥學(xué)及臨床等方面的研究數(shù)據(jù)量龐大且數(shù)據(jù)可靠性管理薄弱，相關(guān)因素使藥學(xué)研制階段的質(zhì)量管理面臨嚴(yán)峻挑戰(zhàn)［1］。針對上述問題，本文在分析國際監(jiān)管法規(guī)框架與國內(nèi)相關(guān)監(jiān)管進(jìn)展的基礎(chǔ)上，提出建立分階段、差異化的質(zhì)量管理體系，并以國際通行的質(zhì)量源于設(shè)計（Quality by Design，QbD）理念為指引［2‐4］，闡述了其在疫苗藥學(xué)研發(fā)全生命周期中的應(yīng)用。QbD的核心在于加強(qiáng)工藝開發(fā)及早期設(shè)計，即通過深入理解產(chǎn)品和生產(chǎn)過程并有效控制CPP［5］，以持續(xù)確保疫苗研制全過程符合法規(guī)要求。
1 國際主要監(jiān)管機(jī)構(gòu)藥品上市前注冊核查和藥品生產(chǎn)管理規(guī)范（Good Manufaturing Pratice，GMP）檢查主要監(jiān)管模式對比分析
1. 1 美國食品藥品監(jiān)督管理局（Food and Drug Administration，F(xiàn)DA）模式
該模式以《批準(zhǔn)前檢查合規(guī)計劃指導(dǎo)手冊》（CPGM7346.832）PAI檢查為核心，通過采用場地選擇模型（Site Selection Model，SSM）實現(xiàn)風(fēng)險導(dǎo)向的場地檢查［6］，其檢查范圍全面，涵蓋生產(chǎn)工藝、分析實驗室、物料、廠房設(shè)施設(shè)備、偏差和變更、數(shù)據(jù)可靠性等方面［7］。重點(diǎn)關(guān)注工藝一致性，涉及CPP及關(guān)鍵質(zhì)量屬性（Critical Quality Attribute，CQA）與數(shù)據(jù)的可靠性，遵循ALCOA++原則，包括Attributable（可歸屬性）、Legible（清晰易讀）、Contemporaneous（同步）、Original（原始性）、Accurate（準(zhǔn)確性）、Complete（全面性）、Consistent（一致性）、End‐uring（持久性）、Available（可用性）、Traceability（可追溯性）［8］。
1. 2 歐洲藥品管理局（European Medicines Agency，EMA）模式
該模式以EMA 的《藥品集中程序上市步驟》為核心，基于風(fēng)險模型制定檢查計劃，強(qiáng)調(diào)原液生產(chǎn)、穩(wěn)定性考察等關(guān)鍵環(huán)節(jié)的審查，并充分利用其監(jiān)督和執(zhí)法資源，用于在規(guī)劃GMP檢查的頻率和范圍時確定檢查地點(diǎn)的優(yōu)先順序［9］。
1. 3 國際藥品認(rèn)證合作組織（Pharmaceutical Inspection Co?operation／Scheme，PIC／S）框架
該框架以《GMP／GDP監(jiān)管環(huán)境下數(shù)據(jù)管理和可靠性的良好實踐》為核心［10］，系統(tǒng)地闡述了數(shù)據(jù)完整性原則，特別強(qiáng)調(diào)了數(shù)據(jù)管理體系及組織文化在保障數(shù)據(jù)完整性方面的重要作用。
2 國內(nèi)藥品監(jiān)管模式
我國已初步構(gòu)建以《藥品注冊核查要點(diǎn)與判定原則（藥學(xué)研制和生產(chǎn)現(xiàn)場）（試行）》與《藥品生產(chǎn)質(zhì)量管理規(guī)范（2010年修訂）臨床試驗用藥品附錄》為核心的疫苗研制監(jiān)管體系。該體系明確要求數(shù)據(jù)必須具備真實性、準(zhǔn)確性、完整性和可追溯性，并持續(xù)強(qiáng)化對工藝驗證與技術(shù)轉(zhuǎn)移的合規(guī)性審查。同時，通過發(fā)布一系列相關(guān)指導(dǎo)原則，為研發(fā)企業(yè)開展藥學(xué)研究提供了明確指引［11］。當(dāng)前監(jiān)管的重點(diǎn)在于持續(xù)夯實藥學(xué)研制數(shù)據(jù)的真實性與可追溯性，并積極推動與國際標(biāo)準(zhǔn)融合，逐步與人用藥品技術(shù)要求國際協(xié)調(diào)理事會（The International Council for Harmonisation of Technical Requirements for Pharmaceuticals for Human Use，ICH）Q8至Q12藥品研發(fā)相關(guān)指導(dǎo)原則接軌。
3 疫苗藥學(xué)研究的階段性質(zhì)量管理
疫苗藥學(xué)研發(fā)具有鮮明的階段性特征，通常可分為實驗室研究、中試放大及工藝驗證3個主要階段，相應(yīng)質(zhì)量管理體系的建立具有階段性、漸進(jìn)性和延續(xù)性。實驗室研究階段，質(zhì)量管理主要通過規(guī)范的操作規(guī)程和完整的實驗記錄，確?；A(chǔ)研究數(shù)據(jù)的可靠性；中試放大階段，質(zhì)量管理的重心轉(zhuǎn)移至對CPP的操作范圍和質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的精確界定，以證明工藝具備放大的可行性；工藝驗證階段，質(zhì)量管理則嚴(yán)格遵循預(yù)定的、等同于商業(yè)化生產(chǎn)的質(zhì)量控制方案，通過連續(xù)批次的成功來“鎖定”工藝，確證其能夠持續(xù)、穩(wěn)定地生產(chǎn)出符合所有預(yù)設(shè)標(biāo)準(zhǔn)的疫苗產(chǎn)品。見表1［12‐14］。
疫苗藥學(xué)研究覆蓋從菌毒種、細(xì)胞基質(zhì)到制劑處方、生產(chǎn)工藝、穩(wěn)定性、質(zhì)量特性、質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)及包裝材料等全環(huán)節(jié)，實施全過程質(zhì)量管控的核心目的在于最大限度地控制上市疫苗質(zhì)量。因此，疫苗研發(fā)單位必須建立并有效運(yùn)行一套與各研制階段相匹配的質(zhì)量管理體系。該體系不僅要能精準(zhǔn)識別與控制疫苗CPP 及CQA 等關(guān)鍵因素，還需重點(diǎn)關(guān)注不同研究階段之間質(zhì)量管理體系的順暢銜接，以及不同研究項目之間質(zhì)量管理活動的協(xié)同影響，最終確保整個研制過程始終處于規(guī)范、受控的狀態(tài)［15］。
4 菌毒種及種子批質(zhì)量管理的核心要點(diǎn)
4. 1 病毒／細(xì)菌疫苗
根據(jù)《中國藥典》三部（2025版）規(guī)定，需明確菌毒種來源，構(gòu)建及傳代穩(wěn)定性數(shù)據(jù)，限定使用代次［16］。對于病毒性疫苗，需明確其生物學(xué)特性；對于多糖疫苗應(yīng)結(jié)合多糖產(chǎn)物等結(jié)構(gòu)確證對多糖抗原生產(chǎn)用菌株進(jìn)行鑒定和確證，應(yīng)結(jié)合產(chǎn)物表達(dá)相關(guān)基因分子遺傳學(xué)特性研究、多糖抗原的結(jié)構(gòu)、分子大小及分布等評估種子批的傳代穩(wěn)定性及商業(yè)化生產(chǎn)的適用性［17］。
4. 2 核酸疫苗
核酸疫苗包括DNA疫苗、mRNA疫苗、病毒載體疫苗等。核酸疫苗需關(guān)注目標(biāo)抗原（基因）選擇、轉(zhuǎn)錄模板（如涉及）、DNA模板設(shè)計（如涉及）、DNA載體的全長核苷酸序列（如涉及）、質(zhì)粒的構(gòu)建和制備、病毒載體的來源和結(jié)構(gòu)、病毒樣顆粒關(guān)鍵結(jié)構(gòu)（如涉及）等方面的資料。質(zhì)粒構(gòu)建需符合ICHQ5A［18］。明確宿主菌的來源、基因型、表型及目標(biāo)克隆篩選的流程，建立工程菌種子庫并驗證遺傳穩(wěn)定性。
4. 3 重組疫苗
重組疫苗需關(guān)注目標(biāo)抗原（基因）選擇，考慮所選目的基因?qū)Π踩?、免疫原性、抗原表達(dá)及病毒抗原完整性等方面的影響，可結(jié)合必要且適用的細(xì)胞水平病毒中和試驗、抗原譜或表位分析試驗開展研究。同時，還應(yīng)關(guān)注目的基因修飾對免疫原性的影響，并提供載體基因序列與限制性內(nèi)切酶圖譜分析數(shù)據(jù)。菌種／細(xì)胞株的建立及檢定可參照重組類產(chǎn)品的相關(guān)指南。
5 生產(chǎn)工藝研發(fā)質(zhì)量管理的核心要點(diǎn)
基于產(chǎn)品和工藝的特點(diǎn)，參考國內(nèi)外相關(guān)指導(dǎo)原則的質(zhì)量風(fēng)險管理理念［19］，科學(xué)利用風(fēng)險評估工具，識別并逐步確定CQA 和CPP；在工藝研發(fā)過程中，應(yīng)對CPP及其控制范圍進(jìn)行篩選、建立、優(yōu)化和確認(rèn)，逐步明確工藝過程控制策略。可依據(jù)工藝開發(fā)和多批次中間產(chǎn)物及制劑生產(chǎn)階段的工藝過程控制信息，擬定合理的過程控制項目及限度，確保在一定的設(shè)計空間范圍內(nèi)產(chǎn)品質(zhì)量均能符合要求。應(yīng)明確生產(chǎn)工藝流程并輸出流程圖，說明相應(yīng)工藝步驟的目與具體操作、過程控制描述、物料流轉(zhuǎn)及中間產(chǎn)物等［20］。
5. 1 疫苗原液生產(chǎn)工藝
5. 1. 1 病毒疫苗
病毒疫苗應(yīng)提供原液生產(chǎn)工藝各步驟的研究內(nèi)容，對生產(chǎn)工藝各步驟中各種工藝參數(shù)，如菌毒種的接種量、病毒感染復(fù)數(shù)（multiplicity of infection，MOI）、細(xì)胞和病毒培養(yǎng)的最佳溫度、培養(yǎng)時間和收獲時間、培養(yǎng)和發(fā)酵條件等參數(shù)，滅活、減毒或裂解的關(guān)鍵條件與效果驗證，原液的濃縮和／或活性抗原的提取、純化等步驟進(jìn)行探索和優(yōu)化，建立穩(wěn)定工藝，并制定全過程的控制策略。需提供工藝確認(rèn)資料，包括工藝過程控制確認(rèn)、批次放行數(shù)據(jù)結(jié)果及必要的雜質(zhì)去除效果等數(shù)據(jù)。
5. 1. 2 細(xì)菌多糖疫苗
細(xì)菌多糖抗原的生產(chǎn)工藝主要包括發(fā)酵、殺菌（或除菌）和純化3個階段。應(yīng)基于菌種的生長代謝及多糖合成途徑，合理設(shè)計并優(yōu)化培養(yǎng)基與發(fā)酵工藝，系統(tǒng)研究包括培養(yǎng)基組成、pH、接種比例及種子濃度以及發(fā)酵工藝參數(shù)（培養(yǎng)溫度、通氣流量、溶氧、轉(zhuǎn)速、罐壓等），并明確補(bǔ)料策略與發(fā)酵終點(diǎn)。在該過程中，需建立關(guān)鍵過程控制點(diǎn)與中間體質(zhì)量控制標(biāo)準(zhǔn)，通過工藝表征研究，識別出影響CQA（如多糖產(chǎn)量與分子大?。┑腃PP及其可接受范圍。應(yīng)對殺菌劑種類和濃度、殺菌條件（溫度、時間、細(xì)菌濃度等）進(jìn)行優(yōu)化；應(yīng)對殺菌或除菌效果進(jìn)行研究和驗證；應(yīng)評價殺菌工藝對多糖結(jié)構(gòu)和免疫活性的潛在影響，并在工藝驗證批予以確認(rèn)；應(yīng)根據(jù)產(chǎn)品特性合理設(shè)計純化工藝路線，根據(jù)目標(biāo)產(chǎn)物特性和純化原理，對CPP及其控制范圍進(jìn)行研究與優(yōu)化［21］。
5. 1. 3 核酸疫苗
研發(fā)所用原材料的來源、質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)及檢定報告應(yīng)存檔保留。應(yīng)提供原液生產(chǎn)工藝各步驟研究過程的記錄及研究方案，特別是mRNA疫苗，如采用轉(zhuǎn)錄模板質(zhì)粒擴(kuò)增／線性化工藝，需考慮研究優(yōu)化的工藝參數(shù)；需對轉(zhuǎn)錄模板制備的CPP及其控制范圍進(jìn)行確認(rèn)，并建立相應(yīng)的過程控制檢測標(biāo)準(zhǔn)；對mRNA合成工藝步驟的CPP進(jìn)行研究及優(yōu)化，并確定其控制范圍。應(yīng)明確生產(chǎn)過程中各純化工藝步驟的目的并建立雜質(zhì)譜，需對純化方式、介質(zhì)選擇依據(jù)、動態(tài)載量、回收率、雜質(zhì)去除率等進(jìn)行研究；對純化工藝的CPP優(yōu)化并確認(rèn)；對純化工藝建立相應(yīng)的過程控制。
5. 1. 4 重組疫苗
重組疫苗是利用基因工程技術(shù)，將目的抗原基因插入宿主細(xì)胞進(jìn)行表達(dá)，從而發(fā)揮免疫效應(yīng)。使用的表達(dá)體系較多，包括原核（如大腸埃希菌）、真核（如酵母、昆蟲細(xì)胞）等表達(dá)體系。研制過程涉及環(huán)節(jié)較多，每個環(huán)節(jié)均需有質(zhì)量控制要點(diǎn)。
原液生產(chǎn)的起始物料（如宿主細(xì)胞、培養(yǎng)基等）及前期研發(fā)環(huán)節(jié)（目的基因構(gòu)建、載體選擇等）需重點(diǎn)進(jìn)行質(zhì)量控制，建立嚴(yán)格的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)，確保無污染、序列正確。重點(diǎn)關(guān)注工藝研究中宿主細(xì)胞表達(dá)系統(tǒng)的培養(yǎng)條件，確保目的抗原（如重組蛋白、病毒樣顆粒）的高表達(dá)量，同時，應(yīng)關(guān)注抗原翻譯后修飾和空間結(jié)構(gòu)，避免錯誤折疊或聚體形成影響免疫原性或引發(fā)不良反應(yīng)。關(guān)鍵雜質(zhì)如宿主細(xì)胞蛋白（host cell protein，HCP）、宿主DNA殘留清除效率應(yīng)重點(diǎn)關(guān)注。純化步驟CPP應(yīng)依據(jù)品種選擇合適的超濾、純化工藝將殘留控制在安全閾值內(nèi)。
5. 2 疫苗制劑處方及生產(chǎn)工藝
疫苗制劑處方與生產(chǎn)工藝是保障疫苗安全性、有效性、質(zhì)量可控性的核心環(huán)節(jié)，需結(jié)合抗原特性、劑型要求及法規(guī)標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行科學(xué)設(shè)計與嚴(yán)格管控。疫苗產(chǎn)品早期處方開發(fā)通常關(guān)注抗原活性成分的選擇及含量、佐劑系統(tǒng)的選擇及含量、穩(wěn)定劑、保護(hù)劑、緩沖系統(tǒng)、表面活性劑及其他輔料（如pH調(diào)節(jié)劑、滲透壓調(diào)節(jié)劑）等方面，臨床試驗期間需關(guān)注產(chǎn)品規(guī)格（不同抗原含量、佐劑含量等）的探索研究，檢查過程中應(yīng)重點(diǎn)關(guān)注處方選擇科學(xué)性及合理性。
各類疫苗應(yīng)明確處方各組分（抗原、佐劑、緩沖劑、穩(wěn)定劑）的作用機(jī)制、濃度范圍及篩選依據(jù)，需符合《中國藥典》四部（2025版）通則生物制品制劑的要求。輔料來源需通過國家原輔料登記平臺備案，質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)應(yīng)符合《歐洲藥典》（2023版）、《美國藥典》（2024版）、《中國藥典》四部（2025 版）的要求［22‐24］。禁用瘋牛病疫區(qū)牛源性原料，需提供傳染性海綿腦?。偱２。╰ransmissiblespongiformencephalopathies／bovinespongiform encephalopathy，TSE／BSE）聲明。若疫苗添加佐劑，應(yīng)關(guān)注研發(fā)產(chǎn)品的佐劑和抗原協(xié)同作用是否能達(dá)到疫苗有效性和安全性的既定要求，應(yīng)對佐劑、抗原和含佐劑疫苗分別建立明確的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)，以確保產(chǎn)品CQA的可控。佐劑研發(fā)需關(guān)注國內(nèi)外使用情況，提供工藝、處方、質(zhì)量研究、質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)、穩(wěn)定性研究等數(shù)據(jù)及已有的動物毒理、臨床安全性和人體使用數(shù)據(jù)作為支持依據(jù)［25］。對于含有新型佐劑疫苗產(chǎn)品的研發(fā)，建議依據(jù)藥品審評中心《預(yù)防用疫苗佐劑藥學(xué)研究技術(shù)指導(dǎo)原則（征求意見稿）》相關(guān)要求［26］，系統(tǒng)開展制備工藝、處方開發(fā)、質(zhì)量研究（佐劑存在形式、佐劑與抗原相互作用等）、安全性及有效性（免疫增強(qiáng)效應(yīng)）等方面的研究，并通過CPP及質(zhì)量研究最終確定佐劑、成品生產(chǎn)工藝步驟及CPP。相關(guān)藥學(xué)研究資料應(yīng)完整歸檔，以備監(jiān)管審核。
半成品配制工藝應(yīng)對原液和輔料的加入順序及加入量、混合攪拌的速度、時間和溫度等參數(shù)進(jìn)行研究與優(yōu)化。凍干制品需系統(tǒng)研究凍干工藝對產(chǎn)品質(zhì)量、納米顆粒特性及凍干前后效力的影響，并據(jù)此確定適宜的生產(chǎn)工藝參數(shù)。半成品配制工藝，應(yīng)對原液與輔料的投料順序與比例、混合攪拌速率、時間及溫度等CPP進(jìn)行研究與優(yōu)化。針對疫苗制劑，其凍干工藝研究應(yīng)綜合考慮疫苗的生物學(xué)特性、穩(wěn)定性及生產(chǎn)規(guī)范，明確CPP及其可控范圍，提供完整的凍干曲線，并評估凍干過程對結(jié)合疫苗質(zhì)量、相關(guān)特性及效力的影響。在工藝評估中，應(yīng)重點(diǎn)分析活性成分的理化特性，如蛋白質(zhì)、病毒或抗原的熱穩(wěn)定性、pH敏感性與分子結(jié)構(gòu)，并研究凍干過程對抗原及活性成分的影響。另外，需加強(qiáng)保護(hù)劑與賦形劑的研究，關(guān)注其濃度與配比及凍干過程對活性成分穩(wěn)定性的影響，緩沖體系應(yīng)合理設(shè)定pH范圍，避免凍干后出現(xiàn)pH波動。最后應(yīng)重點(diǎn)關(guān)注凍干工藝曲線中各階段參數(shù)對產(chǎn)品質(zhì)量的影響，包括預(yù)凍階段的降溫速率、最低溫度與保溫時間，升華階段的溫度與真空度控制及解析干燥階段的升溫速率、最高溫度與保溫時間。
疫苗制劑處方開發(fā)和生產(chǎn)工藝研究中還應(yīng)關(guān)注不同種類疫苗的差異性考量。對于細(xì)菌多價／多聯(lián)疫苗，需研究不同血清型／抗原間的相容性并關(guān)注其免疫原性的潛在干擾；若添加佐劑，則應(yīng)闡明其合理性與必要性，并提供佐劑種類、用量、對抗原的影響及最佳配伍劑量等數(shù)據(jù)，同時參照相關(guān)指導(dǎo)原則提交完整的佐劑藥學(xué)研究資料；若佐劑與抗原相互吸附，需提供吸附動力學(xué)曲線并在工藝開發(fā)中研究各型別結(jié)合物的吸附率，以確保制劑過程中結(jié)合物的完整性和產(chǎn)品的批間一致性。對于核酸疫苗，則應(yīng)關(guān)注處方中各組分的功能、濃度范圍及篩選依據(jù)，并綜合評估制劑對mRNA的保護(hù)作用、轉(zhuǎn)染效率、體外翻譯效率及動物藥效學(xué)和毒理學(xué)研究結(jié)果；另外，還需對納米顆粒與遞送系統(tǒng)制備所涉及的關(guān)鍵原材料／輔料進(jìn)行充分的篩選和質(zhì)量控制。
6 質(zhì)量研究
6. 1 病毒疫苗
應(yīng)對代表性批次進(jìn)行全面的質(zhì)量特性分析。雜質(zhì)方面可參照《中國藥典》三部（2025版）中人用疫苗雜質(zhì)控制技術(shù)指導(dǎo)原則的規(guī)定［27］，應(yīng)重點(diǎn)關(guān)注疫苗特異性的體內(nèi)效力／體外效價研究。對于減毒活疫苗，應(yīng)重點(diǎn)關(guān)注減毒前后的病毒形態(tài)、增殖特征、結(jié)構(gòu)及理化特性對比情況；若涉及，應(yīng)對基因序列鑒定、病毒顆粒性、病毒復(fù)制能力、免疫后排毒特征、病毒滴度、毒力、疫苗效力等方面開展質(zhì)量研究。另外，還應(yīng)開展常規(guī)的理化性質(zhì)核查，如對工藝殘留有機(jī)溶劑或防腐劑進(jìn)行檢測；對宿主蛋白殘留、宿主殘留DNA進(jìn)行檢測；對液體制劑的可見異物、裝量等進(jìn)行檢測；對凍干制劑水分、真空度等進(jìn)行檢測。
6. 2 細(xì)菌多糖疫苗
應(yīng)采用適宜分析方法進(jìn)行質(zhì)量特性分析研究，通常包括結(jié)構(gòu)特征、純度、雜質(zhì)分析（工藝相關(guān)雜質(zhì)及產(chǎn)品相關(guān)雜質(zhì)）、生物學(xué)活性等研究，應(yīng)提供盡可能全面的信息以反映樣品的質(zhì)量屬性。應(yīng)開展不同階段中間產(chǎn)物（精制多糖、降解產(chǎn)物、活化物、衍生物、結(jié)合物原液等）糖鏈相關(guān)的質(zhì)量特性研究并建立質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)，若涉及載體蛋白，應(yīng)依據(jù)載體蛋白類型、工藝路線開展質(zhì)量特性研究，關(guān)注蛋白單體含量／均一性、結(jié)合位點(diǎn)含量等影響結(jié)合反應(yīng)的質(zhì)量特性。另外，應(yīng)開展制劑工藝對結(jié)合疫苗質(zhì)量特性、效力等影響的研究，包括制劑過程對結(jié)合物穩(wěn)定性影響的研究，如多糖結(jié)合物分子大小及分布、粒徑、游離糖含量變化等；對多價疫苗或含佐劑疫苗應(yīng)開展全面的組分相容性研究，包括多個抗原、抗原‐佐劑‐緩沖體系之間的相容性等。對含佐劑疫苗建議在工藝開發(fā)過程中開展各型別結(jié)合物的吸附狀態(tài)、吸附動力學(xué)、吸附率（結(jié)合抗原）等研究。
6. 3 核酸疫苗
核酸疫苗質(zhì)量特性研究可參考相關(guān)技術(shù)指南［28］。在質(zhì)量研究與特性分析進(jìn)程中，常規(guī)放行檢驗分析是主要環(huán)節(jié)，先進(jìn)的分析技術(shù)廣泛應(yīng)用于多種檢測，在放行檢驗中發(fā)揮重要作用。核酸疫苗質(zhì)量特性研究包括多方面內(nèi)容，涵蓋了結(jié)構(gòu)特征的剖析、純度的精準(zhǔn)測定、雜質(zhì)的詳細(xì)分析（包含工藝及產(chǎn)品相關(guān)雜質(zhì)）［29］，另外，還包括對體內(nèi)外效力的評估及免疫學(xué)特性的研究等。檢測項目應(yīng)盡可能涵蓋特征分析相關(guān)方面［30］。
6. 4 重組疫苗
為確保藥物研發(fā)的嚴(yán)謹(jǐn)性與科學(xué)性，針對藥理毒理批次及臨床樣品批次等代表性樣本，需開展全面且契合研究階段的特性分析與質(zhì)量研究。在此過程中，應(yīng)提供常規(guī)放行檢驗數(shù)據(jù)，并運(yùn)用先進(jìn)、靈敏的分析技術(shù)，獲取質(zhì)量研究與特性研究相關(guān)數(shù)據(jù)。特性研究涵蓋多個關(guān)鍵方面，包括結(jié)構(gòu)確證、生物學(xué)活性（如結(jié)合與中和活性）分析、免疫學(xué)特性研究、純度測定（涉及分子大小與電荷異構(gòu)體）、雜質(zhì)分析（包括工藝相關(guān)與產(chǎn)品相關(guān)雜質(zhì)）、污染物檢測、體內(nèi)外效力評價等。
對于重組疫苗，除參照重組治療用生物制品相關(guān)要求提交適用資料外，若該疫苗形成病毒樣顆粒，還需提供病毒樣顆粒關(guān)鍵結(jié)構(gòu)的詳細(xì)研究數(shù)據(jù)；若為純化的抗原肽或具有保護(hù)性特征的表位肽，則需提供準(zhǔn)確無誤的正確性鑒定結(jié)果；對于載體疫苗，研究內(nèi)容還應(yīng)包括病毒DNA測序、轉(zhuǎn)基因與載體病毒骨架的精準(zhǔn)鑒別、目的抗原表達(dá)譜分析、病毒相對分子質(zhì)量測定及病毒粒度分布研究等。
在研發(fā)早期應(yīng)提交初步的結(jié)構(gòu)確證數(shù)據(jù)，至上市申報時則需提供完整的結(jié)構(gòu)確證資料。疫苗的生物效價研究作為反映工藝性能和產(chǎn)品質(zhì)量的綜合指標(biāo)，相關(guān)研究工作應(yīng)盡早啟動并持續(xù)推進(jìn)。
7 分析方法
在分析方法的驗證環(huán)節(jié)，需嚴(yán)格遵循ICH Q2的相關(guān)要求［31］，涵蓋專屬性、準(zhǔn)確度、精密度、線性范圍、定量限、耐用性及系統(tǒng)適用性等多方面內(nèi)容。在驗證過程中，需精準(zhǔn)且及時地對樣品信息、儀器設(shè)備詳情、操作流程及最終結(jié)論等關(guān)鍵信息進(jìn)行記錄。
8 穩(wěn)定性研究
疫苗穩(wěn)定性研究應(yīng)遵循《中國藥典》三部（2025版）中的生物制品穩(wěn)定性試驗指導(dǎo)原則、《生物制品穩(wěn)定性研究技術(shù)指導(dǎo)原則（試行）》和ICH相關(guān)指導(dǎo)原則的要求［32‐34］。穩(wěn)定性研究方案應(yīng)結(jié)合疫苗劑型特點(diǎn)、生產(chǎn)工藝、臨床用藥方案等情況設(shè)計，包括長期試驗、加速試驗、影響因素試驗、運(yùn)輸穩(wěn)定性試驗（如振蕩、凍融）和使用穩(wěn)定性試驗（復(fù)溶后穩(wěn)定性）。疫苗生產(chǎn)過程中各中間產(chǎn)物如需儲存，應(yīng)開展穩(wěn)定性研究或相關(guān)驗證研究，明確儲存條件、儲存方式下產(chǎn)物質(zhì)量符合生產(chǎn)使用要求的支持?jǐn)?shù)據(jù)。原液、制劑生產(chǎn)工藝中使用的所有與產(chǎn)品接觸的耗材（如儲存袋、硅膠管、管道等），需具備相關(guān)研究資料或其他適用的支持資料，并提供支持包材相容性的研究數(shù)據(jù)。在上市申報前完成全面的穩(wěn)定性考察，選擇適宜的包裝材料和給藥裝置，明確貯存、運(yùn)輸條件，制定合理的有效期。
9 聯(lián)合疫苗
聯(lián)合疫苗中各組分的藥學(xué)研究要求大體等同于對應(yīng)的傳統(tǒng)單價疫苗。在聯(lián)合疫苗的研發(fā)過程中，應(yīng)對聯(lián)合后疫苗各組分之間的相互作用，以及防腐劑、佐劑、非活性成分等對聯(lián)合后活性成分的影響等進(jìn)行研究［35‐37］。對于多糖蛋白聯(lián)合疫苗，還需考慮不同載體蛋白適用性方面的問題，如載體蛋白的啟動效應(yīng)、載體蛋白誘導(dǎo)的表位抑制效應(yīng)和旁觀者效應(yīng)等。應(yīng)采用適宜的理化、生化和生物學(xué)檢測方法，對制品的特性和組分的完整性進(jìn)行測定［38‐41］。如涉及，應(yīng)評價制品再懸浮的影響（尤其是含鋁佐劑疫苗）。聯(lián)合疫苗生產(chǎn)過程中應(yīng)考慮的主要問題是生產(chǎn)的一致性，即生產(chǎn)穩(wěn)定性，需提供充分的工藝驗證及穩(wěn)定性研究數(shù)據(jù)，證明在確定的生產(chǎn)條件下，產(chǎn)品質(zhì)量具有良好的穩(wěn)定性和批間一致性。
10 上市前數(shù)據(jù)的可溯源性
疫苗研發(fā)過程中應(yīng)關(guān)注相關(guān)數(shù)據(jù)的不斷積累、記錄及可溯源性的證明性資料。藥學(xué)研發(fā)的漸進(jìn)性涉及毒種、生產(chǎn)工藝建立及驗證、質(zhì)量特性研究不斷拓展、穩(wěn)定性研究不斷更新等多個方面。
為確保藥物研發(fā)的嚴(yán)謹(jǐn)性與科學(xué)性，針對藥理毒理批次、臨床樣品批次、上市驗證批次等代表性樣本，需開展充分且契合相應(yīng)研究階段的工藝開發(fā)、質(zhì)量研究、質(zhì)量分析及穩(wěn)定性研究等。在此過程中，應(yīng)提供質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定的放行檢驗數(shù)據(jù)，并運(yùn)用先進(jìn)、靈敏的分析技術(shù)，在此基礎(chǔ)上對質(zhì)量研究與放行檢測數(shù)據(jù)進(jìn)行相關(guān)性研究及分析；疫苗臨床試驗期間存在變更的，應(yīng)開展充分的可比性研究，并建立支持上市產(chǎn)品可溯源至關(guān)鍵性臨床批次的數(shù)據(jù)檔案和質(zhì)量管理體系。上述內(nèi)容也是批準(zhǔn)前注冊核查的重點(diǎn)。
11 小結(jié)與展望
疫苗藥學(xué)研發(fā)的質(zhì)量管理體系建立具有階段性、漸進(jìn)性和延續(xù)性，本文通過從全生命周期角度系統(tǒng)闡述了疫苗不同研制階段的質(zhì)量管理要求及核心控制點(diǎn)，在藥學(xué)研究不同階段應(yīng)強(qiáng)化工藝開發(fā)與風(fēng)險管理。對研制單位有如下建議：①在藥學(xué)研制不同階段應(yīng)關(guān)注并不斷提高質(zhì)量管理意識，合理運(yùn)用風(fēng)險管理工具，明確各階段質(zhì)量目標(biāo)與要求，在遵循共性質(zhì)量管理原則的基礎(chǔ)上，建立分階段的質(zhì)量管理體系并持續(xù)改進(jìn)，確保研制現(xiàn)場規(guī)范可控；②應(yīng)依據(jù)藥品研發(fā)相關(guān)指導(dǎo)原則，產(chǎn)品研發(fā)采用QbD理念，從早期開發(fā)工藝設(shè)計階段即嵌入質(zhì)量管控，明確CQA與CPP之間的關(guān)聯(lián)，不斷優(yōu)化工藝控制策略；③應(yīng)實施分階段合規(guī)管理，實驗室階段注重數(shù)據(jù)原始性與真實性，中試階段逐步引入GMP 要素，至商業(yè)化工藝驗證階段實現(xiàn)全體系合規(guī)；④應(yīng)建立電子數(shù)據(jù)管理系統(tǒng)（Electronic Document Management System，EDMS），加強(qiáng)數(shù)據(jù)可靠性管理，確保全生命周期數(shù)據(jù)符合ALCOA++原則，實現(xiàn)完整可溯。本文相關(guān)內(nèi)容為研發(fā)企業(yè)疫苗研發(fā)及監(jiān)管機(jī)構(gòu)疫苗研制現(xiàn)場核查等提供了參考及借鑒。
利益沖突所有作者聲明無利益沖突
參考文獻(xiàn)
［1］ SONG B, HUANG Y, ZHOU M M, et al. Analysis and suggestions on on‐site verification of pharmaceutical development [J].Drugs Clinic, 2024, 39 (5): 1332‐1336. (in Chinese)宋波, 黃鶯, 周萌萌, 等. 藥學(xué)研制現(xiàn)場核查的問題分析和建議[J]. 現(xiàn)代藥物與臨床, 2024, 39 (5): 1332‐1336.
［2］ CMC‐Vaccines Working Group. A‐VAX: Applying Quality by Design to vaccines [EB/OL]. (2012‐05‐xx) [2025‐07‐04]. https://qbdworks.com/storage/2014/06/a‐vax‐applying‐qbd‐to‐vaccines.pdf.
［3］ VANDEBERG D, KISZ A, BEHMER C F, et al. Quality by design modelling to support rapid RNA vaccine production against emerg ing infectious diseases [J]. NPJ Vaccines, 2021, 6 (1): 65.
［4］ ZHAO X, MA Y S, YANG D, et al. Thoughts on pharmaceuticalresearch of rabies vaccine for human use [J]. Chin J New Drugs,2025, 34 (6): 650‐655. (in Chinese)趙欣, 馬巖松, 楊丹, 等. 人用狂犬病疫苗研發(fā)藥學(xué)研究思考[J]. 中國新藥雜志, 2025, 34 (6): 650‐655.
［5］ CHAROO N A, KHAN M A, RAHMAN Z. Data integrity issues in pharmaceutical industry: Common observations, challenges and mitigations strategies [J]. Int J Pharm, 2023, 631: 122503. DOI：10.1016/j.ijpharm.2022.122503
［6］ U.S. Food and Drug Administration. Understanding CDER's Risk‐ Based Site Selection Model MAPP 5014.1 Rev.1 [EB/OL]. (2023‐06‐26)［2025‐07‐04］. www.fda.gov/media/116004/download.
［7］ U.S.FoodandDrugAdministration.Complianceprogram7346.832 preapprovalinspections [EB/OL].(2022‐09‐16) [2025‐07‐04].https://www.fda.gov/media/121512/download.
［8］ United States Pharmacopeial Convention. United States Pharmacopoeia and the National Formulary <1029> Good documentation guidelines and data integrity (Draft) [S]. 2025‐07‐09.
［9］ European Medicines Agency. A Model for Risk Based Planning for Inspections of Pharmaceutical Manufacturers [EB/OL]. (2024‐01‐01) [2025‐07‐04]. https://www.gmp‐compliance.org/files/guidemgr/model‐risk‐based‐planning‐inspections‐pharmaceuticalmanufacturers_en.pdf.
［10］ Pharmaceutical Inspection Co‐operation Scheme. Good Practices for data management and integrity in regulated GMP/GDP environments[S]. 2021‐07‐01.
［11］ 國家藥監(jiān)局藥審中心. 關(guān)于發(fā)布《臨床試驗期間生物制品藥學(xué)研究和變更技術(shù)指導(dǎo)原則(試行)》和《已上市疫苗藥學(xué)變更研究技術(shù)指導(dǎo)原則(試行)》的通告(2024 年第29 號)[EB/OL].(2024‐06‐14) [2025‐07‐04]. https://www.cde.org.cn/main/news/viewInfoCommon/e56700d8d2aaf1394610b2c47d8c6a5c.
［12］ 國家藥品監(jiān)督管理局. 藥品記錄與數(shù)據(jù)管理要求(試行) [S].北京: 中國醫(yī)藥出版社, 2020‐07‐01.
［13］ 國家藥品監(jiān)督管理局. 藥品生產(chǎn)質(zhì)量管理規(guī)范(2010年修訂)臨床試驗用藥品附錄[S]. 北京: 中國醫(yī)藥出版社, 2022‐05‐27.
［14］ 國家藥監(jiān)局藥審中心. 臨床試驗期間生物制品藥學(xué)研究和變更技術(shù)指導(dǎo)原則(試行) [S]. 北京: 中國醫(yī)藥出版社, 2024‐06‐07.
［15］ AVUMEGAH M S, MATTIUZZO G, SARNEFALT A, et al. Availability and use of Standards in vaccine development [J]. NPJ Vaccines,2023, 8 (1): 95.
［16］ 國家藥典委員會. 中華人民共和國藥典(三部) [S]. 北京: 中國醫(yī)藥科技出版社, 2025: 3‐9.
［17］ STEFANETTI G, MACLENNAN C A, MICOLI F. Impact andControl of Sugar Size in Glycoconjugate Vaccines [J]. Molecules,2022, 27 (19): 6432.
［18］ The International Council for Harmonisation of Technical Requirements for Pharmaceuticals for Human Use. Viral Safety Evaluation of Biotechnology Products Derived From Cell Lines of Human or Animal Origin [S]. 2023‐11‐01.
［19］ The International Council for Harmonisation of Technical Requirementsfor Pharmaceuticals for Human Use. Quality Risk Management[S]. 2023‐01‐18.
［20］ DANIEL S, KIS Z, KONTORAVDI C, et al. Quality by Design for enabling RNA platform production processes [J]. Trends Biotechnol,2022, 40 (10): 1213‐1228.
［21］ 國家藥監(jiān)局藥審中心. 多糖結(jié)合疫苗藥學(xué)研究及評價技術(shù)指導(dǎo)原則(試行) [S]. 北京: 中國醫(yī)藥出版社, 2024‐12‐20.
［22］ United States Pharmacopeial Convention. The United States Pharmacopoeia and the National Formulary [S]. 2024‐05‐01, Issue 1.
［23］ European Directorate for the Quality of Medicines & HealthCare. European Pharmacopoeia [S]. 11th Edition. 2023‐01‐01.
［24］ 國家藥典委員會. 中華人民共和國藥典(四部) [S]. 北京: 中國醫(yī)藥科技出版社, 2025: 833‐1166.
［25］ World Health Organization. WHO ECBS Sixty‐forth report, TRS987 ANNEX2, Guidelines on the nonclinical evaluation of vaccine adjuvants and adjuvanted vaccines [S]. 2014‐01‐18.
［26］ 國家藥品審評中心. 預(yù)防用疫苗佐劑藥學(xué)研究技術(shù)指導(dǎo)原則[S]. 北京: 中國醫(yī)藥科技出版社, 2025‐09‐16.
［27］ 國家藥典委員會. 中華人民共和國藥典(三部) [S]. 北京: 中國醫(yī)藥科技出版社, 2025: 796‐798.
［28］ 國家藥監(jiān)局藥審中心.預(yù)防用mRNA疫苗藥學(xué)研究技術(shù)指導(dǎo)原則（征求意見稿）[S]. 2025‐09‐16.
［29］ U.S. Food and Drug Administration. Regulatory Considerations in the Safety Assessment of Adjuvants and Adjuvanted Preventive Vaccines [EB/OL]. (2018‐10‐08) [2025‐07‐04]. https://www.fda. gov/media/81720/download.
［30］ HU C, LIU J, WANG Y, et al. Research progress on the qualitycontrol of mRNA vaccines [J]. Expert Rev Vaccines, 2024, 23 (1):570‐583.
［31］ The International Council for Harmonisation of Technical Requirements for Pharmaceuticals for Human Use. Validation of Analytical Procedures [S]. 2023‐11‐30.
［32］ 國家藥典委員會. 中華人民共和國藥典(三部) [S]. 北京: 中國醫(yī)藥科技出版社, 2025: 794‐796.
［33］ 國家藥監(jiān)局藥審中心. 生物制品穩(wěn)定性研究技術(shù)指導(dǎo)原則(試行) [S]. 北京: 中國醫(yī)藥科技出版社, 2025‐04‐15.
［34］ The International Council for Harmonisation of Technical Requirements for Pharmaceuticals for Human Use. Quality of biotechnological products: Stability testing of biotechnological/biological products [S]. 1995‐11‐30.
［35］ U.S. Food and Drug Administration. Guidance for Industry for the Evaluation of Combination Vaccines for Preventable Diseases: Production, Testing and Clinical Studies [S]. 1997.
［36］ JERAJANI K, WAN Y, KUMRU O S, et al. Multi‐Dose FormulationDevelopment for a Quadrivalent Human Papillomavirus Virus‐Like Particle‐Based Vaccine: Part Ⅰ‐Screening of PreservativeCombinations [J]. J Pharm Sci, 2023, 112 (2): 446‐457.
［37］ XING J, ZHAO X, LI X, et al. The recent advances in vaccine adjuvants [J]. Front Immunol, 2025, 16: 1557415. DOI: 10.3389/fimmu.2025.1557415.
［38］ CHEN Q, SHI J C, YE Q. Immune interference of carrier proteins in bacterial glycoconjugate vaccines [J]. Chin J Biologicals, 2013,26 (7): 1034‐1039. (in Chinese)陳瓊, 石繼春, 葉強(qiáng). 細(xì)菌多糖結(jié)合疫苗載體蛋白的免疫原性干擾作用[J]. 中國生物制品學(xué)雜志, 2013, 26 (7): 1034‐1039.
［39］ MACCALMAN T E, PHILLIPS‐JONES M K, HARDING S E. Glycoconjugate vaccines: Some observations on carrier and production methods [J]. Biotechnol Genet Eng Rev, 2019, 35 (2): 93‐125.
［40］ VAN DER PUT R M F, METZ B, PIETERS R J. Carriers and antigens: New developments in glycoconjugate vaccines [J]. Vaccines,2023, 11 (2): 219.
［41］ STEFANETTI G, MACLENNAN C A, MICOLI F. Impact and Control of Sugar Size in Glycoconjugate Vaccines [J]. Molecules,2022, 27 (19): 6432.
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