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培養(yǎng)基傾注溫度太高會(huì)殺死細(xì)菌？不同微生物的熱敏感性實(shí)測(cè)參考

嘉峪檢測(cè)網(wǎng)        2026-01-09 16:29

01.為什么傾注溫度太高會(huì)殺死細(xì)菌？

 

蛋白質(zhì)變性：高溫可導(dǎo)致細(xì)菌細(xì)胞內(nèi)酶和結(jié)構(gòu)蛋白變性失活。

 

細(xì)胞膜損傷：高溫破壞脂質(zhì)雙分子層，引起內(nèi)容物泄漏。

 

DNA損傷：極端高溫可引發(fā)DNA斷裂或堿基修飾。

 

芽孢 vs 營(yíng)養(yǎng)體：芽孢耐熱性強(qiáng)（如枯草芽孢桿菌），而營(yíng)養(yǎng)細(xì)胞普遍更敏感。

 

02.推薦的傾注溫度范圍

 

一般建議將融化后的瓊脂培養(yǎng)基冷卻至45–50℃再進(jìn)行傾注操作：

 

45–50℃：大多數(shù)非嗜熱微生物可耐受，且瓊脂尚未凝固。

 

>55℃：開始對(duì)多數(shù)革蘭氏陰性菌（如大腸桿菌、沙門氏菌）產(chǎn)生顯著殺傷。

 

>60℃：絕大多數(shù)非芽孢細(xì)菌在短時(shí)間內(nèi)死亡。

 

實(shí)驗(yàn)室常規(guī)做法：將融化的瓊脂置于50°C水浴中平衡10–15分鐘，再與樣品混合。

 

03.不同微生物的熱敏感性實(shí)測(cè)參考

 

微生物種類	典型代表	50℃下存活率（5 min）	55℃下存活率（5 min）	備注
大腸桿菌 （E. coli）	革蘭氏陰性桿菌	>90%	<10%	對(duì)熱較敏感
金黃色葡萄球菌（S. aureus）	革蘭氏陽性球菌	~85%	~20%	比革蘭氏陰性稍耐熱
沙門氏菌（Salmonella spp.）	革蘭氏陰性桿菌	>90%	<5%	食品檢測(cè)中需特別注意
乳酸菌 （Lactobacillus spp.）	革蘭氏陽性桿菌	70–80%	<10%	益生菌，熱敏感
酵母 （Saccharomyces cerevisiae）	真核微生物	~80%	~30%	比細(xì)菌略耐熱
霉菌孢子 （如 Aspergillus）	真菌	>95%	>80%	孢子耐熱性較強(qiáng)
枯草芽孢桿菌芽孢	芽孢	>99%	>99%	耐熱極強(qiáng)，需高壓滅菌才能殺滅

 

04.實(shí)用建議

 

使用恒溫水?。捍_保瓊脂在傾注前穩(wěn)定在45–50℃。

 

避免反復(fù)融化：多次加熱會(huì)降解營(yíng)養(yǎng)成分并增加氧化風(fēng)險(xiǎn)。

 

快速操作：混合后盡快傾注，防止瓊脂凝固或微生物長(zhǎng)時(shí)間暴露于余熱。

 

特殊菌種需優(yōu)化：如檢測(cè)熱敏感益生菌（雙歧桿菌等），可考慮更低傾注溫度（如42–45℃）或采用涂布法（spread plate）替代。

 

對(duì)于高度熱敏感的微生物（如某些乳酸菌、厭氧菌），推薦使用涂布法：

 

培養(yǎng)基預(yù)先凝固；樣品直接涂布于表面；完全避免熱暴露。

 

來源：食品實(shí)驗(yàn)室服務(wù)