中文字幕一级黄色A级片|免费特级毛片。性欧美日本|偷拍亚洲欧美1级片|成人黄色中文小说网|A级片视频在线观看|老司机网址在线观看|免费一级无码激情黄所|欧美三级片区精品网站999|日韩av超碰日本青青草成人|一区二区亚洲AV婷婷

在色譜分析檢測(cè)中（GC&HPLC），我們經(jīng)常要使用到衍生化技術(shù)手段來達(dá)到對(duì)目標(biāo)物質(zhì)的定性定量分析，按照衍生化發(fā)生在色譜分析前后，分為柱前衍生和柱后衍生，今天我們就一起學(xué)習(xí)衍生化目的、原理、分類和應(yīng)用等。

衍生化的目的

GC&HPLC衍生化包括分析物與衍生化試劑之間發(fā)生的化學(xué)反應(yīng)，其目的是改變?cè)摲治鑫锏睦砘再|(zhì)，主要有以下幾個(gè)目的：提高檢測(cè)性能改變分析物的分子結(jié)構(gòu)或極性以獲得更出色的色譜分離增加揮發(fā)性改變基質(zhì)性質(zhì)以實(shí)現(xiàn)更好的分離穩(wěn)定分析物

常用的衍生化試劑

GC&HPLC1.硅烷化試劑   硅烷基指三甲基硅烷Si(CH3)3或稱TMS；硅烷化作用是指將硅烷基引入到分子中，一般是取代活性氫；活性氫被硅烷基取代后降低了化合物的極性，增強(qiáng)了揮發(fā)性和穩(wěn)定性；對(duì)于不揮發(fā)或者200-300℃的穩(wěn)定性，可以使用硅烷化試劑衍生；硅烷化試劑容易吸潮失效，因此在使用過程中需要對(duì)樣品和試劑脫水。

2.酰基化衍生試劑?；芙档土u基、氨基、巰基的極性，減小色譜峰拖尾，增強(qiáng)揮發(fā)性；能增強(qiáng)某些容易氧化的化合物（如：兒茶酚胺）的穩(wěn)定性；引入含有鹵離子的?；?，可以提高電子捕獲檢測(cè)器（ECD）的靈敏度。

3.紫外衍生試劑紫外衍生化試劑主要是給一些沒有紫外吸收或者紫外吸收很弱的化合物分子引入強(qiáng)紫外吸收的基團(tuán)，使得目標(biāo)物能被紫外檢測(cè)器檢測(cè)。

4.熒光衍生化試劑液相色譜檢測(cè)中熒光檢測(cè)器的靈敏度要比紫外檢測(cè)的靈敏度高出幾個(gè)數(shù)量級(jí)，但是大多數(shù)化合物沒有熒光，通過熒光衍生化試劑將目標(biāo)物上接上能發(fā)出熒光的生色基團(tuán)，以達(dá)到熒光檢測(cè)的目的，由于熒光衍生物的激發(fā)波長與發(fā)射波長與衍生化試劑不同，即使衍生化試劑過量或者有副反應(yīng)，也不干擾熒光衍生物的檢測(cè)。

5.電化學(xué)衍生化試劑電化學(xué)檢測(cè)器（ECD）是根據(jù)電化學(xué)原理和物質(zhì)的電化學(xué)性質(zhì)進(jìn)行檢測(cè)的，在液相色譜中常用來檢測(cè)無紫外和無熒光的，但是有電活性的化合物，其檢測(cè)靈敏度高，選擇性強(qiáng)，對(duì)于沒有電活性的化合物，與電化學(xué)衍生試劑反應(yīng)，生成具有電化學(xué)活性的衍生物就可以使用ECD檢測(cè)，由于硝基具有電化學(xué)活性，因此常用來作為電化學(xué)衍生試劑，常見電化學(xué)衍生試劑化如下：

衍生化在HPLC及GC中的應(yīng)用案例分享

GC&HPLCHPLC中的應(yīng)用案例-氨基甲酸酯農(nóng)藥檢測(cè)（GB23200.112-2018）甲奈威和克百威屬于氨基甲酸酯一類的廣譜殺蟲劑，常用于水稻和玉米作物，其本身無熒光，通過高溫堿性條件下，將其水解為甲基胺，再與鄰苯二甲醛(OPA) 和2-巰基乙醇(RSH) 反應(yīng)，生成具有強(qiáng)熒光性的異吲哚衍生物，可用于熒光檢測(cè)，檢測(cè)級(jí)別可到達(dá)ppt級(jí)別。

GB23200.112-2018中9種氨基甲酸酯類農(nóng)藥及其代謝物的柱后衍生譜圖

GC中的應(yīng)用案例-氯丙醇及其脂肪酸脂的檢測(cè)（GB5009.191-2016）：?；芙档土u基、氨基、巰基的極性，改善這些化合物的色譜性能（減少峰拖尾），并能提高這些化合物的揮發(fā)性，也能增強(qiáng)某些容易氧化的化合物的穩(wěn)定性，當(dāng)?；瘯r(shí)引入了含有鹵素離子的?；鶗r(shí)，還能提高使用ECD檢測(cè)的靈敏度。GBGB5009.191-2016中，采用七氟丁酰咪唑作為衍生化試劑，在溫和的條件下將羥基鈍化反應(yīng)生成具較好穩(wěn)定性、良好揮發(fā)性和強(qiáng)電負(fù)性的衍生物，并使用GCMS檢測(cè)。

為什么有時(shí)候我們?cè)谏V分析中需要用到衍生化呢？當(dāng)檢測(cè)物質(zhì)不容易被檢測(cè)時(shí)，如無紫外吸收等，這時(shí)可以將其進(jìn)行處理，如加上生色團(tuán)等，生成可被檢測(cè)的物質(zhì)。按衍生化反應(yīng)發(fā)生在色譜分離之前還是之后進(jìn)行，可將衍生化分為柱前衍生化和柱后衍生化。

柱前衍生法和柱后衍生法各有其優(yōu)缺點(diǎn)

柱前衍生法的優(yōu)點(diǎn)：相對(duì)自由地選擇反應(yīng)條件；不存在反應(yīng)動(dòng)力學(xué)的限制；衍生化的副產(chǎn)物可進(jìn)行預(yù)處理以降低或消除其干擾；容易允許多步反應(yīng)的進(jìn)行；有較多的衍生化試劑可選擇；不需要復(fù)雜的儀器設(shè)備。
缺點(diǎn)：形成的副產(chǎn)物可能對(duì)色譜分離造成較大困難；在衍生化過程中，容易引入雜質(zhì)或干擾峰，或使樣品損失。

柱后衍生法的優(yōu)點(diǎn)：形成副產(chǎn)物不重要，產(chǎn)物也不需要高的穩(wěn)定性，只需要有好的重復(fù)性即可；被分析物可以在其原有的形式下進(jìn)行分離，容易選用已有的分析方法。
缺點(diǎn)：需要額外的設(shè)備，對(duì)儀器要求比較高；反應(yīng)器可造成峰展寬，降低分辨率；有過量的試劑會(huì)造成干擾。
由于柱后衍生化法受儀器的制約，多數(shù)還是采用柱前衍生化法。下面詳細(xì)介紹一下柱前衍生化法。 1.  柱前衍生化的目的柱前衍生化就是在色譜分離之前將樣品與一定的化學(xué)試劑發(fā)生化學(xué)反應(yīng)，將樣品中的目標(biāo)化合物制備成適當(dāng)?shù)难苌?，然后再用色譜進(jìn)行分離檢測(cè)。
①將一些不適合某種色譜技術(shù)分析的化合物轉(zhuǎn)化成可以用該種色譜技術(shù)分析的衍生物。如某些無法氣化或熱不穩(wěn)定的化合物不能用氣相色譜分析，通過衍生化轉(zhuǎn)化成可以汽化的或熱穩(wěn)定的衍生物，然后再用氣相色譜分析。
②提高檢測(cè)的靈敏度，如很多化合物沒有紫外吸收或紫外吸收很弱，而其它檢測(cè)方法靈敏度又不夠，這就可以通過衍生化反應(yīng)給這些化合物接上一個(gè)有強(qiáng)紫外吸收的基團(tuán)，以此來提高這些化合物的檢測(cè)靈敏度。又如氣相色譜的電子捕獲檢測(cè)器對(duì)含鹵素的化合物有很高的靈敏度，可以通過衍生化反應(yīng)將一些化合物接上鹵素基團(tuán)，提高這些化合物的檢出靈敏度。
③改善分離度。如一些異構(gòu)體在色譜上很難分離，通過衍生化反應(yīng)，使兩個(gè)異構(gòu)體生成的衍生物色譜性能產(chǎn)生較大差異而得到分離。對(duì)一些難分離的物質(zhì)對(duì)也可以選用某些衍生化試劑，只使其中一個(gè)發(fā)生衍生化反應(yīng)轉(zhuǎn)化成衍生物，兩者可得到分離。
④利用衍生化反應(yīng)可以幫助化合物結(jié)構(gòu)的鑒定，這點(diǎn)在使用色譜-質(zhì)譜，色譜-紅外光譜和色譜-核磁共振波譜聯(lián)用方法確定化合物結(jié)構(gòu)時(shí)作用更加明顯。
不同模式的色譜柱前衍生化的目的有不同的側(cè)重，氣相色譜中柱前衍生化主要是改善目標(biāo)化合物的揮發(fā)性；而液相色譜和薄層色譜中柱前衍生化的主要目的是改善檢測(cè)能力。所以不同模式的色譜柱前衍生化的方法和所用的衍生化試劑也略有不同。
2. 柱前衍生化的條件色譜中柱前衍生化使用的衍生化反應(yīng)應(yīng)滿足以下幾個(gè)條件：① 衍生化反應(yīng)要既迅速又完全，便于計(jì)算衍生物的含量及定量計(jì)算。② 反應(yīng)的選擇性高，最好只與目標(biāo)化合物反應(yīng)，即反應(yīng)要有專一性。③ 衍生化反應(yīng)產(chǎn)物只有一種，反應(yīng)的副產(chǎn)物和過量的衍生化試劑應(yīng)不干擾目標(biāo)化合物的分離與檢測(cè)。④ 衍生化試劑應(yīng)方便易得，通用性好。
總之，柱前衍生化可以擴(kuò)大色譜分析的應(yīng)用范圍，使色譜分析的結(jié)果能更令人滿意，所以柱前衍生化是色譜樣品處理的一個(gè)重要方法。