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三聚氰酸又稱“氰尿酸”，是一種廣泛的化工原料，用于生產(chǎn)樹脂、涂料等化工產(chǎn)品。近年來，三聚氰酸被非法添加到食品或飼料中以虛假提高蛋白質(zhì)的含量，人或動物長期食用含三聚氰酸的食品，會造成腎組織損傷、泌尿系結(jié)石等嚴(yán)重危害，因此其毒性作用引起了人們的廣泛關(guān)注。

適用于牛奶、奶粉中三聚氰酸的檢測。

儀器、試劑與材料

主要儀器設(shè)備

高效液相色譜儀，紫外檢測器，SPE固相萃取裝置，真空旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器，超聲儀，渦旋振蕩儀，離心機(jī)。

試劑材料

市售濃縮牛奶；三聚氰酸標(biāo)品；Ⅰ級蒸餾水；甲醇、乙腈（均為色譜純）；甲酸、氨水、四丁基溴化銨、磷酸氫二鈉（均為分析純）。

      色譜柱：ZKAT-C18（5 μm，120 Å，4.6×250 mm，訂貨號：152200542）

SPE柱：AE.SPE-MAX（500 mg/6 mL）

樣品提取

將5 mL液態(tài)奶與5 mL乙腈混合，劇烈振蕩2 min，4000 rpm下離心5 min，取2 mL上清液與2 mL 5%氨水水溶液混合，混合液待凈化。

PE柱凈化

（1）活化：MAX固相萃取柱使用前依次用5 mL甲醇活化、5 mL 5%氨水水溶液平衡。

（2）上樣：將待凈化液加入已活化好的固相萃取柱中，以1 mL/min的流速過柱，棄去濾液。

（3）淋洗：依次加入5 mL 5%氨水水溶液、5 mL甲醇淋洗，淋洗液棄去。

（4）洗脫：用5 mL 2%甲酸甲醇洗脫，收集洗脫液。

（5）重新溶解：洗脫液減壓蒸餾至近干，用流動相溶解并定容至1 mL，0.45 μm微孔濾膜過濾，供HPLC測定。

色 譜 柱：ZKAT-C18（5 μm，120 Å，4.6×250 mm，訂貨號：152200542）

檢 測 器：UV2996 紫外/可見光檢測器

檢測波長：UV 226 nm 

流 動 相：緩沖溶液*/甲醇 = 92/8（v/v）          

流    速：1.0 mL/min

柱    溫：30 ℃                   

進(jìn) 樣 量：20 μL

*緩沖溶液：0.005 mol/L四丁基溴化銨 + 0.005 mol/L磷酸氫二鈉水溶液，用水定容至1 L。

采用此方法進(jìn)行奶制品中三聚氰酸含量的液相測試，添加回收率達(dá)到97.19%，表明AE.SPE-MAX 及ZKAT-C18適于乳制品中三聚氰酸的純化和測試。