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流動相相當(dāng)于液相的血液，可以想象對液相的重要程度。那么流動相都需要注意什么呢？

過濾溶劑

溶劑在使用前一定要用0.5μm的過濾器過濾，如果使用固體化學(xué)試劑（緩沖鹽）配制流動相，過濾特別重要，不能讓固體微粒污染泵，阻塞進(jìn)樣器和柱頭過濾片。本實驗室有水溶性和脂溶性兩種過濾膜供選擇（反光面朝上），過濾水溶性流動相時（如甲醇/水），先用1～2mL甲醇潤濕過濾膜，有助于快速抽濾。

保持儲液瓶的清潔

用普通溶劑瓶作流動相儲液器應(yīng)不定期廢棄瓶子，最后一次應(yīng)用HPLC級的水或溶劑清洗，不能在清洗過程中留下污跡。

保證溶劑的質(zhì)量

一定要用HPLC級的溶劑，水也應(yīng)達(dá)到HPLC級，同樣也要使用高純度的緩沖鹽。

一些因流動相引起的常見問題

流動相脫氣不充分

流動相受熱，或者流動相不同組分混合時會有氣體產(chǎn)生，氣泡進(jìn)入泵內(nèi)引起壓力波動，增加噪音，色譜圖上出現(xiàn)毛刺?？稍囉孟铝蟹椒ń鉀Q問題：流動相再脫氣；采用更有效的脫氣方法或兩種方法配合使用；改系統(tǒng)內(nèi)混合為系統(tǒng)外預(yù)混合。

流動相供給不暢

流動相用完，管道中吸入氣體引起泵壓力不穩(wěn)。應(yīng)經(jīng)常觀察儲液器中流動相的量，加足流動相保證所有的樣品分析完畢。輸液管道上裝沉子沉至瓶底，儲液器蓋上留一小孔正好夾住進(jìn)液管，使其不能上下移動。

過濾器阻塞引起管道和泵腔空化，壓力不穩(wěn)。過濾器被微粒所阻塞或長霉，去掉過濾器后如果系統(tǒng)運(yùn)轉(zhuǎn)正常，說明已找出問題，換上新的過濾器則可。有時候換上新的過濾器仍然不暢，那就需要查查流動相的制備過程，或者換大孔徑的過濾器。不管如何，流動相都需要重新過濾。

流速過高、阻力大，造成空化現(xiàn)象，這是由于過濾器孔徑、管道內(nèi)徑、流速和溶劑黏度等引起的。如果流速大于10mL/min，常會出現(xiàn)這種現(xiàn)象。

使用下列方法解決：

（1）使用低流速；

（2）換大孔徑的過濾器；

（3）增加進(jìn)液管道內(nèi)徑；

（4）抬高或加壓儲液器；

（5）不用過濾器，但流動相一定要先過濾；

（6）儲液器蓋子太緊，在儲液器內(nèi)形成真空，打出的流動相不連續(xù)。應(yīng)松開蓋子或留有1mm的縫隙；

（7）進(jìn)液管道阻塞或彎曲使泵抽不到液，注意調(diào)整進(jìn)液管道或更換新的。其它問題包括滲漏或接頭松動、泵部件損壞等，都能引起供液不正常。

流動相和儲液器被污染

由于污染，噪音越來越大，檢測器基線上升。污染物可能被泵以穩(wěn)定的濃度打入系統(tǒng)，而再以穩(wěn)定的濃度流出來，所以在色譜圖中不出多余的峰。用梯度洗脫時弱流動相可以使污染物聚在柱頂，流動相強(qiáng)度增加后污染物可能被洗脫出來一個大的偽峰。有時基線噪音突然增大或突然提高，都是因為反復(fù)加進(jìn)新的流動相或系統(tǒng)用得太久（通宵）所造成的。新加進(jìn)的流動相有污染物或者流動相長霉，繁殖了細(xì)菌。

臟的儲液器會污染清潔的流動相。每種流動相備有專用的儲液器，或者定期報廢儲液器。

流動相污染來自這幾個方面：

試劑質(zhì)量不高，玻璃器皿不合格；

微生物的影響；

配制流動相時操作不當(dāng)?shù)龋?/span>

因此要求高純度化學(xué)試劑和HPLC級溶劑；

玻璃器皿按規(guī)定清洗干凈；

為防止微生物生長，每天要用甲醇清洗系統(tǒng)；

懷疑系統(tǒng)內(nèi)生長了微生物，可用稀硝酸沖洗即可（注意不要損壞柱和管道系統(tǒng)）；

真空脫氣時防止泵油帶入流動相；

用清潔的惰性塞子、攪棒、過濾器和玻璃器皿配制流動相；

已經(jīng)污染的流動相一定要廢棄掉。