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嘉峪檢測(cè)網(wǎng) 2015-11-16 00:08
MicroFast沙門(mén)氏菌快速增菌培養(yǎng)基是專(zhuān)為沙門(mén)氏菌的快速增菌而設(shè)計(jì),該培養(yǎng)基能夠促進(jìn)沙門(mén)氏菌的快速增殖,抑制競(jìng)爭(zhēng)菌的生長(zhǎng),從而達(dá)到沙門(mén)氏菌的快速增殖。
實(shí)驗(yàn)通過(guò)三種不同培養(yǎng)基對(duì)沙門(mén)氏菌菌的復(fù)蘇效果的比較,可以看出MF培養(yǎng)基對(duì)于冷損傷和熱損傷的該菌具有三種中最高的復(fù)蘇效果,且8h的復(fù)蘇效果和國(guó)標(biāo)24h的復(fù)蘇效果相同或者更優(yōu)。測(cè)定沙門(mén)氏菌在不同培養(yǎng)基中的生長(zhǎng)曲線(xiàn),可以得到在MF培養(yǎng)基中,殺菌氏菌具有最高的生長(zhǎng)速度。經(jīng)過(guò)優(yōu)化的培養(yǎng)基仍然保持了沙門(mén)氏菌菌增菌的特異性。綜上,MF培養(yǎng)基時(shí)一種能夠?qū)崿F(xiàn)沙門(mén)氏菌菌快速、特異增殖的培養(yǎng)基。
注:MICRO FAST 培養(yǎng)基以下簡(jiǎn)稱(chēng)MF培養(yǎng)基、BPW為GB/T 4789.4-2010要求培養(yǎng)基、*FM為某國(guó)外品牌培養(yǎng)基
1.修復(fù)能力(比較MF、BPW和*FM培養(yǎng)基的復(fù)蘇效果)
1)熱損傷模型制備:經(jīng)過(guò)試驗(yàn),選取55℃,加熱15min的方法建立熱損傷模型
2)冷損傷模型制備:選取-20℃冷凍,然后解凍建立冷損傷模型
3)試驗(yàn)方法:分別對(duì)冷損傷組和熱損傷組進(jìn)行檢測(cè)。相同濃度的沙門(mén)氏菌菌分別用上述方法進(jìn)行建模,將建模后的沙門(mén)氏菌,分別加入到96孔板中,并用不同的培養(yǎng)基進(jìn)行復(fù)蘇培養(yǎng),分別培養(yǎng)8h,24h,然后接種于選擇性培養(yǎng)基中繼續(xù)培養(yǎng)24h,最后用顯色平板進(jìn)行確認(rèn)。
4)結(jié)果分析:
通過(guò)圖1我們可以看到MF培養(yǎng)基對(duì)熱損傷和冷損傷菌的修復(fù)效果菌優(yōu)于PBW和*FM培養(yǎng)基。

2.擴(kuò)增速度
1)實(shí)驗(yàn)方法:分別選取6株不同的沙門(mén)氏菌標(biāo)準(zhǔn)菌株(菌株編號(hào)分別為:),重新活化培養(yǎng),技術(shù)后,分別在三種不同的培養(yǎng)基內(nèi)進(jìn)行培養(yǎng),分別于0h、1h、2h、3h、4h、5h、6h、7h、8h取適量于600nm處測(cè)定OD值,并取平均值,并繪制生長(zhǎng)曲線(xiàn)。
2)結(jié)果分析:
圖3表明沙門(mén)氏菌菌在MF培養(yǎng)基的生長(zhǎng)速度均優(yōu)于BPW和*FM培養(yǎng)基,進(jìn)口*FM培養(yǎng)基優(yōu)于BPW.

3.特異性
1)實(shí)驗(yàn)方法 將干擾菌株接種于不同培養(yǎng)基中,培養(yǎng)18小時(shí),觀(guān)察培養(yǎng)管的渾濁程度,并對(duì)結(jié)果進(jìn)行統(tǒng)計(jì)。
2)結(jié)果
表1說(shuō)明了三種培養(yǎng)基均能抑制革蘭陽(yáng)性菌。其中MF對(duì)大腸桿菌的抑制效果最好,能夠避免樣品中的大腸桿菌對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果的影響。

4、實(shí)際樣品檢測(cè)
1)實(shí)驗(yàn)方法
(1)將豬肉分割成14塊25g左右的肉塊,做以下處理(每塊肉單獨(dú)處理),4度放置過(guò)夜。
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組別 |
樣品處理 |
數(shù)目 |
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對(duì)照組 |
實(shí)際樣本(不添加陽(yáng)性菌株) |
4 |
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低菌組 |
低菌量(5 CFU/25 g) |
12 |
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高菌組 |
高菌落(50 CFU/25 g) |
12 |
注:豬肉中本身菌數(shù):6.1*104cfu/g
(2)MF快增法
a. 一步增菌(42度):
取上述7個(gè)樣本分別轉(zhuǎn)接至225mL快速增菌培養(yǎng)基(FM)中的PM中:
分別為:對(duì)照組、低軍組、高菌組,培養(yǎng)約6 h。
b. 二步增菌(42度):
取上述增菌液0.1 mL,轉(zhuǎn)接至1 ml SM中,42度培養(yǎng)約18h。
c. 轉(zhuǎn)接至顯色培養(yǎng)基(OXIOD沙門(mén)顯色平板)中。
(3)國(guó)標(biāo)法
a.一步增菌
將另一半樣本分別轉(zhuǎn)接至225mL BPW中,36度培養(yǎng)8h。
分別為:對(duì)照組、低軍組、高菌組,培養(yǎng)約24 h。
b.二步增菌:
取上述增菌液1mL,轉(zhuǎn)接至10 ml SC中,培養(yǎng) 18h。
c.轉(zhuǎn)接至顯色培養(yǎng)基(OXIOD沙門(mén)顯色平板)中。
2)結(jié)果
通過(guò)顯色培養(yǎng)基對(duì)比結(jié)果,F(xiàn)M快速增菌培養(yǎng)基中幾乎無(wú)除沙門(mén)氏菌以外的雜菌長(zhǎng)出,而GB增菌后,雜菌較多,所以MF培養(yǎng)基的選擇性要遠(yuǎn)遠(yuǎn)高于國(guó)標(biāo)培養(yǎng)基。

來(lái)源:良潤(rùn)生物