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聚合酶鏈反應(yīng)(PCR)簡述

嘉峪檢測網(wǎng)        2017-08-08 09:20

一、PCR概念
 
  聚合酶鏈反應(yīng)(基因擴增):基本原理類似于DNA的天然復(fù)制過程,其特異性依賴于與靶序列兩端互補的寡核苷酸引物。PCR是模擬體內(nèi)DNA復(fù)制過程,在體外特異性擴增DNA片段的一種技術(shù)。
 
二、PCR的應(yīng)用領(lǐng)域
 
  1、遺傳病和某些疑難病的診斷
 
  2、病原體的檢測。某些惡性疾病一般用微生物學(xué)、生化和免疫 學(xué)技術(shù)無法查出病原體時,可用PCR來檢查。
 
  3、法醫(yī)和刑偵鑒定。
 
  4、癌基因的檢查。
 
  5、基因探針的制備。
 
  6、基因組測序、染色體巡視。
 
  7、cDNA庫的構(gòu)建。
 
  8、基因突變的分析和定位誘變。
 
  9、DNA重組。
 
  10、基因的分享和克隆。
 
三、標準的PCR過程,分為三步:
 
  1. DNA變性
 
  (90℃-96℃):雙鏈DNA模板在熱作用下,氫鍵斷裂,形成單鏈DNA
 
  2. 退火
 
  (60℃-65℃):系統(tǒng)溫度降低,引物與DNA模板結(jié)合,形成局部雙鏈。
 
  3. 延伸
 
  (70℃-75℃):在Taq酶(在72℃左右,活性最佳)的作用下,以dNTP為原料,從引物的3′端開始以從5′??′端的方向延伸,合成與模板互補的DNA鏈。
 
聚合酶鏈反應(yīng)(PCR)簡述
 
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來源:AnyTesting

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