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蛋白濃度測定的各種方法及比較

嘉峪檢測網(wǎng)        2016-03-23 09:03

不同測量方法樣品中各物質(zhì)兼容性

名稱

特點

Bradford法(考馬斯亮藍法)

Lowry法(Folin-酚試劑法)

BCA法(二喹啉甲酸法)

檢測靈敏度

檢測濃度下限達到25ug/ml,最小檢測蛋白量達到0.5ug

25~250 μg/mL

檢測濃度下限達到25ug/ml,最小檢測蛋白量達到0.5ug

測量范圍

50-1000ug/ml

25~250 μg/mL

50-2000ug/ml

干擾因素

1:不受絕大部分樣品中的化學(xué)物質(zhì)的影響。樣品中β-巰基乙醇的濃度可高達1M,DTT的濃度可高達5mM。

2:略受高濃度的去垢劑影響。需確保SDS低于0.01%,Triton X-100低于0.05%,Tween 20, 60, 80低于0.015%。

3:含去垢劑的樣品推薦BCA蛋白濃度測定試劑盒

1:干擾物質(zhì)多(如Tris緩沖劑、蔗糖、硫酸銨、巰基化物、酚類、檸檬酸等)

 

1:不受絕大部分樣品中的化學(xué)物質(zhì)的影響,可以兼容樣品中高達5%的SDS,5%的Triton X-100,5%的Tween 20, 60, 80。

2:受螯合劑和略高濃度的還原劑的影響,需確保EDTA低于10mM,無EGTA,二硫蘇糖醇低于1mM,β-巰基乙醇低于0.01%。:3:不適用BCA法時建議試用Bradford蛋白濃度測定試劑盒

檢測速度

快,顯色3-5min即可讀數(shù)

室溫反應(yīng)30min

37-60℃,30min

成本

低,適合大量樣品檢測。

低,適合大量樣品檢測,比色皿檢測

稍高一些,酶標板法比較常用的一種方法

最大吸收峰

595 nm

500nm

562 nm

測量樣品

總蛋白測量

總蛋白測量

茶多酚測量

總蛋白測量

總結(jié)

三種蛋白定量方法,各有優(yōu)缺點。根據(jù)所使用的裂解液的不同,需要采用適當(dāng)?shù)牡鞍诐舛葴y定方法。因為不同的蛋白濃度測定方法對于一些去垢劑和還原劑等的兼容性差別很大,可根據(jù)具體情況選取。

 

標準曲線

 

產(chǎn)品編號

產(chǎn)品名稱

規(guī)格

價格

KMS01

Bradford蛋白濃度測定試劑盒

50ml×2

56.00

BCA01

BCA蛋白定量試劑盒

50ml(250T)

150.00

BCA02

BCA蛋白定量試劑盒

1000ml(5000T)

280.00

FLF01

Folin-酚蛋白定量試劑盒

50ml

70.00

 

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來源:AnyTesting

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