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皮膚的完整性對于體外皮膚滲透性研究的結(jié)果有較大的影響，同時也會產(chǎn)生數(shù)據(jù)的變異性。本文從法規(guī)要求、皮膚完整測試方法和各方法的優(yōu)劣等進行如下闡述：

法規(guī)要求

       皮膚完整性測試試驗，除了目視檢查外，建議在每個實驗中至少還需要進行以下完整性測試的一種或者兩種，再將皮膚安裝在 Franz 擴散池上。根據(jù)文獻報道常用的皮膚完整性測試方法有：

(1)TWP(Tritiated Water Method) 氚水方法

(2)Transepidermal Electrical Resistance Method(TEER)經(jīng)皮電阻方法

(3)Transepidermal Water Loss Method（TEWL）經(jīng)皮失水方法

       氘水方法：為了確定氚化標記水的吸收特性，將受體隔室充滿生理鹽水。將無限劑量的氘代無施加到皮膚表面。在不同的時間點（0.5、1、2、3、4 和 5 小時）收集受體溶液，并測定氘代物，計算滲透常數(shù) (Kp)，通過滲透常數(shù)判斷皮膚的完整性。

      經(jīng)皮電阻方法：皮膚的電阻抗性，用電阻值KΩ表示，采用惠斯登電橋記錄皮膚對離子的通透性，這是一種簡單穩(wěn)定的評價皮膚屏障功能的方法。比如試驗用皮膚來自于經(jīng)安樂處死的28日到30日齡的大鼠，根據(jù)皮膚角質(zhì)層缺失的程度以及皮膚屏障功能的減少（TER低于閾值）的情況來鑒定皮膚是否破損。

      經(jīng)皮失水方法：經(jīng)皮失水又稱為透皮失水，表明真皮深層的水分通過表皮的蒸發(fā)散失，是描述皮膚完整性的重要參數(shù)，其與皮膚角質(zhì)層含水量密切相關，TEWL值越高，表明皮膚散失水分越多，角質(zhì)層的屏障功能越差。經(jīng)表皮失水 (TEWL) 被廣泛用于評估皮膚的屏障功能。TEWL 定義為單位時間內(nèi)通過角質(zhì)層擴散到每個皮膚表面的水蒸氣量，用g·m-2·h-1表示。

幾種方法的優(yōu)勢劣勢

       氘水方法有幾個限制。首先，如果測試化合物是氚標記的，則該方法不能應用。其次，水通量會使角質(zhì)層水合，這對于進行一些化合物的滲透研究來說可能是不希望的狀態(tài)。此外，氚水通量測定非常耗時，而使用放射性標記物質(zhì)需要適當?shù)谋O(jiān)管批準。

       經(jīng)皮電阻測得的電阻取決于設備，即應用頻率、產(chǎn)生的電流、溶液的離子強度以皮膚樣品的表面積以kΩ為測量單位，很難與各種現(xiàn)有的文獻報道數(shù)值相關聯(lián)。常規(guī)的經(jīng)驗是確定電阻值小于基線（無皮膚膜溶液）三倍的皮膚切片，其屏障已經(jīng)損壞建議拒絕使用，或者電阻度數(shù)高于基線20倍。其具有角質(zhì)化上皮細胞，也建議拒絕使用。

       經(jīng)皮失水方法有很多文獻來源的數(shù)值限度依據(jù)，常規(guī)更容易測定而更受企業(yè)研發(fā)人員的認可。TEWL 是液態(tài)水通過 SC/屏障擴散的通量。TEWL 儀器測量鄰近空氣中的水蒸氣通量。具體原理如下圖：

參考文獻：

（1）  GB∕T 27828-2011_化學品 體外皮膚腐蝕 經(jīng)皮電阻試驗方法

（2）  Arch Dermatol Res （1987）279：351-356

（3）  Toxicology in Vitro 23（2009）1429-1435

（4）  Toxicology in Vitro 29 (2015) 113–123