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抗體的制備、純化、評價、膠乳偶聯(lián)技術(shù)總結(jié)(33頁)

  • 抗體的制備、純化、評價、膠乳偶聯(lián)技術(shù)總結(jié)(33頁)

    目錄

    一、抗體的制備與純化 5

    (一) 抗體的概念5

    (二) 抗體的本質(zhì)、結(jié)構(gòu)和類型5

    (三) 抗體的產(chǎn)生5

    (四) 抗體的制備5

    1所需原料 5

    2抗體的制備程序 6

    (五) 單克隆抗體與多克隆抗體的特點與區(qū)別7

    (六) 抗體純化的方法、原理和特點 7

    二、抗體純化方法簡明手冊 8

    (一) 鹽析法 9

    1主要材料 9

    2影響鹽析的因素 10

    3鹽的性質(zhì) 10

    (二) 冷酒精沉淀法10

    (三) Deae-sephadexa-50 柱層析法 11

    (四) SPA-sepharosecl-4b 親和層析法 12

    (五) 高效和液相色譜 14

    三、TMB 可溶性底物、HRP 酶穩(wěn)定劑、弗氏佐劑和不完全佐劑的說明書 14

    (一) TMB 可溶性底物(TMBSolubleSubstrate)14

    (二) 辣根過氧化物酶穩(wěn)定劑(HRPSTABILIZER)  15

    (三) 弗氏完全佐劑和弗氏不完全佐劑 Freund'sAdjuvant,CompleteandIncomplete  16

    四、抗體保存指南17

    (一) 保存溫度和條件 17

    1特別注意:特殊保存條件 17

    2用疊氮化鈉防止污染17

    3不使用疊氮化鈉的情形 18

    (二) 冷凍/融化損傷  18

    五、不同來源的抗體純化的方法和注意事項 18

    (一) 不同來源的抗體 18

    1抗血清19

    2組織培養(yǎng)血清19

    3腹水 19

    六、短期免疫抗血清制備及抗體效價檢測 19

    (一) 實驗一:免疫19

    1實驗動物的選擇 20

    2實驗步驟 20

    (二) 實驗二:抽血、放血,分離抗血清20

    1取血 21

    2抗血清的分離,保存21

    (三) 實驗三:ELISA 法測定抗體效價21

    1實驗材料 22

    2實驗步驟 22

    3結(jié)果分析 23

    (四) 玻片法—血型鑒定(興趣實驗) 24

    1實驗方法和步驟 24

    2實驗結(jié)果分析24

    七、熒光微球標記抗體方法及問題分析25

    (一) 膠乳大小選擇25

    1【求助】免疫膠乳或免疫顆粒(聚苯乙烯)的粒徑 - 丁香園論壇 25

    (二) 膠乳標記方法25

    2【交流】蛋白如何偶聯(lián)到聚苯乙烯乳膠顆粒上 - 丁香園論壇25

    3【求助】膠乳標記 - 丁香園論壇26

    4【求助】抗原或抗體致敏膠乳的緩沖液和 pH 值 - 丁香園論壇 27

    (三) 膠乳標記過程問題 27

    5【求助】膠乳偶聯(lián)出現(xiàn)絮凝 - 丁香園論壇 28

    八、膠乳標記過程中常見問題集28

  • 1694.98KB
  • 科研開發(fā)
  • 2024-02-06
  • 藥品與生物制品

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