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抗體的制備、純化、評價、膠乳偶聯(lián)技術(shù)總結(jié)(33頁)
目錄
一、抗體的制備與純化 5
(一) 抗體的概念5
(二) 抗體的本質(zhì)、結(jié)構(gòu)和類型5
(三) 抗體的產(chǎn)生5
(四) 抗體的制備5
1所需原料 5
2抗體的制備程序 6
(五) 單克隆抗體與多克隆抗體的特點與區(qū)別7
(六) 抗體純化的方法、原理和特點 7
二、抗體純化方法簡明手冊 8
(一) 鹽析法 9
1主要材料 9
2影響鹽析的因素 10
3鹽的性質(zhì) 10
(二) 冷酒精沉淀法10
(三) Deae-sephadexa-50 柱層析法 11
(四) SPA-sepharosecl-4b 親和層析法 12
(五) 高效和液相色譜 14
三、TMB 可溶性底物、HRP 酶穩(wěn)定劑、弗氏佐劑和不完全佐劑的說明書 14
(一) TMB 可溶性底物(TMBSolubleSubstrate)14
(二) 辣根過氧化物酶穩(wěn)定劑(HRPSTABILIZER) 15
(三) 弗氏完全佐劑和弗氏不完全佐劑 Freund'sAdjuvant,CompleteandIncomplete 16
四、抗體保存指南17
(一) 保存溫度和條件 17
1特別注意:特殊保存條件 17
2用疊氮化鈉防止污染17
3不使用疊氮化鈉的情形 18
(二) 冷凍/融化損傷 18
五、不同來源的抗體純化的方法和注意事項 18
(一) 不同來源的抗體 18
1抗血清19
2組織培養(yǎng)血清19
3腹水 19
六、短期免疫抗血清制備及抗體效價檢測 19
(一) 實驗一:免疫19
1實驗動物的選擇 20
2實驗步驟 20
(二) 實驗二:抽血、放血,分離抗血清20
1取血 21
2抗血清的分離,保存21
(三) 實驗三:ELISA 法測定抗體效價21
1實驗材料 22
2實驗步驟 22
3結(jié)果分析 23
(四) 玻片法—血型鑒定(興趣實驗) 24
1實驗方法和步驟 24
2實驗結(jié)果分析24
七、熒光微球標記抗體方法及問題分析25
(一) 膠乳大小選擇25
1【求助】免疫膠乳或免疫顆粒(聚苯乙烯)的粒徑 - 丁香園論壇 25
(二) 膠乳標記方法25
2【交流】蛋白如何偶聯(lián)到聚苯乙烯乳膠顆粒上 - 丁香園論壇25
3【求助】膠乳標記 - 丁香園論壇26
4【求助】抗原或抗體致敏膠乳的緩沖液和 pH 值 - 丁香園論壇 27
(三) 膠乳標記過程問題 27
5【求助】膠乳偶聯(lián)出現(xiàn)絮凝 - 丁香園論壇 28
八、膠乳標記過程中常見問題集28
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